GIBCO胎牛血清(北美血源)的应用

背景^[1-3]

GIBCO胎牛血清(北美血源)适用于MRC5-,Hela-,3T3-,Sf9-,CHO-,杂交瘤细胞，细胞融合，细胞转染，原代细胞和神经原细胞的培养。血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物。血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等。

胎牛血清取自剖腹产的胎牛；新牛血清取自出生24小时之内的新生牛；小牛血清取自出生10－30天的小牛。因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少，所以胎牛血清是品质最高的。

GIBCO胎牛血清(北美血源)在细胞培养中的作用：

1. 提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。

2. 提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调变它们所结合的物质活力。

3. 有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。

4. 在细胞培养试验中是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。

5. 起酸碱度缓冲液作用。

6. 提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。

应用^[4][5]

用于不同浓度胎牛血清培养下骨髓间充质干细胞诱导为心肌样细胞的比较研究

研究不同浓度胎牛血清培养下骨髓间充质干细胞的一般特性如形态、核型、增殖动力学、表型特点和分化成心肌样细胞潜能等生物学性状,并在低血清浓度下培养诱导后的心肌样细胞,并观察心肌样细胞增殖和特异性蛋白的表达情况。

方法:采用全骨髓贴壁的培养方法获取大鼠的骨髓间充质干细胞（BMSCs）。在细胞传到第2代时,分为5个组,加入含有不同浓度胎牛血清（FBS）的L-DMEM培养基,FBS浓度分别为0%,2.5%,5%,7.5%,10%,并以浓度系数标记各组。

取第4代BMSCs,利用MTT法在（1、3、5、7、9d）检测细胞的增殖。分别取各组传代到第4代BMCS,加入Ang II和5-Aza（Ang II 0.1μmol/l和5-Aza 10μmol/l）诱导剂诱导,24h后吸弃含有诱导剂的培养液,跟换新培养液继续培养。

取诱导后各组的第1代（y P1）细胞,使用MTT法检测类心肌细胞在（1、3、5、7d）的生长活力,细胞免疫荧光化学染色法检测诱导后培养至第4周时各组中c Tn I,Cx-43两类心肌相关蛋白的表达情况,并计算其表达率。

结果:在5种不同浓度FBS下的L-DMEM培养液均可获得第4代BMSCs;MTT检测细胞活力（1、3、5、7、9d）结果显示,5组不同体积分数的FBS培养液均可以促进BMSCs的生长,10%组>2.5%,5%,7.5%组>0%组,差异有统计学意义（p<0.05）,2.5%,5%,7.5%组组间比较,差异无统计学意义（p>0.05）。

参考文献

[1]The role of PKCε-dependent signaling for cardiac differentiation[J].D.Galli,G.Gobbi,C.Carrubbi,D.Marcantonio,L.Benedetti,M.G.C.De Angelis,T.Meschi,M.Vaccarezza,M.Sampaolesi,P.Mirandola,M.Vitale.Histochemistry and Cell Biology.2013(1)

[2]Embryonic Stem Cell Marker Expression Pattern in Human Mesenchymal Stem Cells Derived from Bone Marrow,Adipose Tissue,Heart and Dermis[J].Una Riekstina,Inese Cakstina,Vadims Parfejevs,Martin Hoogduijn,Georgs Jankovskis,Indrikis Muiznieks,Ruta Muceniece,Janis Ancans.Stem Cell Reviews and Reports.2009(4)

[3]Characterization of human skin-derived mesenchymal stem cell proliferation rate in different growth conditions[J].Una Riekstina,Ruta Muceniece,Inese Cakstina,Indrikis Muiznieks,Janis Ancans.Cytotechnology.2008(3)

[4]Concise Review:Mesenchymal Stem/Multipotent Stromal Cells:The State of Transdifferentiation and Modes of Tissue Repair—Current Views[J].Donald G.Phinney,Darwin J.Prockop.STEM CELLS.2009(11)

[5]孙国栋.不同浓度胎牛血清培养下骨髓间充质干细胞诱导为心肌样细胞的比较[D].山西医科大学,2015.