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TTC-沙保罗培养基的应用

发布日期:2020/10/15 9:36:03

背景[1-3]

TTC-沙保罗培养基由蛋白胨、葡萄糖、琼脂、氯霉素、TTC溶液等组成,用于各种假丝酵母菌的检出和鉴定。

假丝酵母菌属归于真菌界、半知菌亚门、芽孢菌纲、隐球酵母目、隐球酵母科。对人致病的有白假丝酵母菌(C.albicans)、热带假丝酵母菌(C.tropicalis)、近平滑假丝酵母菌(C.parapsilosis)和都柏林假丝酵母菌(C.dubliniensis)等,其中以白假丝酵母菌感染最为多见,可占感染中的75%。白假丝酵母菌又称白念球菌(candida albicans),是重要的条件致病菌,主要引起人体皮肤、黏膜及内脏的急性或慢性炎症,占深部真菌感染的首位。

假丝酵母菌的主要特征是细胞呈球形、椭圆形、圆筒形、长条形,有时为不规则形;通过发芽而繁殖,可形成假菌丝,少数形成厚膜孢子及真菌丝。假丝酵母菌为酵母型真菌,芽生酵母在特定条件下转为菌丝后则致病力增强。按细胞壁甘露糖蛋白的主要抗原成分不同可分为A和B两种血清型,据报道免疫功能正常人中A型比B型多2倍,免疫功能缺陷者的A、B两型相等。

白假丝酵母菌在普通琼脂、血琼脂和沙保培养基上均生长良好。在沙保培养基于室温或37℃培养1~3天长出菌落,呈奶油色或呈蜡状,柔软、光滑、湿润,有浓厚的酵母气味。培养稍久,有大量向下生长的营养假菌丝,无向上生长的气中菌丝,呈类酵母型菌落。在玉米粉培养基上可长出厚膜孢子。在血琼脂培养基上菌落中等大小呈暗灰色。

应用[4][5]

用于念珠菌显色培养基的研制和临床评价研究

念珠菌病是一类与滥用抗生素、机体免疫缺陷、妊娠、雌激素治疗、难治性糖尿病等因素密切相关的疾病。快速有效地检测和鉴别念珠菌对于念珠菌病的诊断和治疗具有重要意义,但目前临床上尚缺乏比较简单有效的方法,特别对于外阴阴道念珠菌病(vulvovaginal candidiasis,VVC)而言,由于使用的标本是阴道分泌物,其成分比较复杂,检测和鉴别念珠菌时较为困难。

利用酶显色底物研制念珠菌显色培养基并对其进行临床评价,以期获得具有较高敏感性、特异性、经济性的产品。

方法:以沙保罗葡萄糖琼脂为基础,结合酶显色底物(H012、H026、H092),通过一系列优化实验和两组正交实验,筛选出念珠菌显色培养基的配方;再分别用166株临床分离的念珠菌菌株和212例临床VVC疑似患者标本,以CHROMagar念珠菌显色培养基作对照,评价该培养基的性能。

结果:①研制的念珠菌显色培养基主要成分:日本琼脂、蛋白胨、麦芽浸膏、酵母浸膏、氯化血红素、葡萄糖、N-乙酰-D-氨基葡萄糖、H012、H026、H092、BB2、巯基乙醇和土霉素等。

②用临床分离的念珠菌菌株评价,与CHROMagar念珠菌显色培养基没有显著性差异,P>0.05。

③用临床VVC疑似患者标本评价,与CHROMagar念珠菌显色培养基没有显著性差异,P>0.05。

结论:自行研制的念珠菌显色培养基在性能上与CHROMagar念珠菌显色培养基没有显著性差异,可用于临床检测。

参考文献

[1]An epidemiological survey of vulvovaginal candidiasis in Italy[J].Salvatore Corsello,Arsenio Spinillo,Giuseppe Osnengo,Carlo Penna,Secondo Guaschino,Anna Beltrame,Nicola Blasi,Antonio Festa.European Journal of Obstetrics and Gynecology.2003(1)

[2]Evaluation of different commercial ELISA methods for the serodiagnosis of systemic candidosis[J].F.Persat,R.Topenot,M.A.Piens,A.Thiebaut,E.Dannaoui,S.Picot.Mycoses.2002(11‐)

[3]Multicenter prospective surveillance of oral Candida dubliniensis among adult Brazilian human immunodeficiency virus-positive and AIDS patients[J].Diagnostic Microbiology&Infectious Disease.2001(1)

[4]“Room temperature”use of CHROMagar Candida?[J].Frank C.Odds,Amanda Davidson.Diagnostic Microbiology&Infectious Disease.2000(3)

[5]王则宇.念珠菌显色培养基的研制和临床评价[D].郑州大学,2006.

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