CAMHB肉汤的应用

背景^[1-3]

CAMHB肉汤用于临床样本或其他样品中需氧微生物快速增菌培养。需氧生物是指必须在氧充足的环境中才能生长繁殖的生物。需氧生物在异化作用过程中，需从大气中获得充分的游离氧，才能分解机体中的有机物质而获得能量。

成分(g/L)：牛肉浸粉3.0；酸水解酪蛋白17.5；可溶性淀粉1.5；氯化钙0.05；pH值7.3±0.1 25℃

用法：称取本品22.0g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,分装,116-121℃高压灭菌10分钟,备用。

CAMHB肉汤为阳离子调节肉汤（cationadjusted Mueller-Hinton broth），是肉汤稀释法药敏试验的推荐培养基，具有以下几点：①对药敏试验显示较好的批间重复性；②对磺胺、甲氧苄啶和四环素的抑制物较少；③用这种培养基进行的药敏试验已积累了大量的数据和经验；④M-H肉汤可使绝大多数非苛养病原菌获得满意生长，肉汤中添加某些补充物也可支持苛养菌的生长。

应用^[4][5]

用于拉曼光谱技术快速筛查耐粘杆菌素大肠杆菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌的研究

粘杆菌素（多粘菌素E）发现于19世纪40年代,可有效治疗多种革兰阴性菌的感染。但由于较大的肾毒性和神经系统毒性一度被弃用,因此当前粘杆菌素耐药现象较为罕见。传统的观点认为粘杆菌素耐药仅仅通过细菌染色体介导而在各菌株垂直传递。

另一方面,MDRGNB如鲍曼不动杆菌或铜绿假单胞菌的感染往往危及病人生命,快速准确分析其粘杆菌素敏感性可有效协助治疗,挽救患者生命。因此,行之有效的粘杆菌素耐药快速检测方法是应对可能出现的“无药可救”的MDRGNB感染紧迫局面的重要手段。

美国临床实验室标准化协会（Clinical and Laboratory Standards Institute CLSI）和欧盟药敏试验委员会（The European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing EUCAST）所推荐的粘杆菌素药敏试验标准方法为微量肉汤稀释法（Broth Microdilution Method BMD）。

但该方法费时费力,细菌需经过纯化培养后再培养16-24小时才能获取药敏试验结果。纸片扩散法和E-test法同样需要16-24小时,且其检测原理都基于药物在琼脂糖中的扩散。由于粘杆菌素分子在琼脂糖中扩散速率低,导致药敏结果出现较高的假阴性率。

建立大肠杆菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌粘杆菌素耐药菌株快速筛查新方法。

利用主成分分析方法分析暴露组与非暴露组之间拉曼光谱的差异;获取0.3McF的CAMHB与0 McF、0.2 McF、0.4 McF、0.8 McF细菌菌液混合试样的拉曼光谱,以说明拉曼光谱信号的物质来源;测定细菌培养液中蛋白质、核酸浓度及细菌数量以说明引起暴露组与非暴露组光谱差异的物质基础;获取相同数量的暴露组细菌与非暴露组细菌拉曼光谱,以说明流失的蛋白质和核酸等物质对试样拉曼光谱变化的贡献。

参考文献

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[3]Colistin,mechanisms and prevalence of resistance[J].Abed Zahedi Bialvaei,Hossein Samadi Kafil.Current Medical Research&Opinion.2015(4)

[4]Isolation and identification of bacteria by means of Raman spectroscopy[J].Susanne Pahlow,Susann Meisel,Dana Cialla-May,Karina Weber,Petra R?sch,Jürgen Popp.Advanced Drug Delivery Reviews.2015

[5]林钟劝.拉曼光谱技术快速筛查耐粘杆菌素大肠杆菌、鲍曼不动杆菌和铜绿假单胞菌的研究[D].中国人民解放军陆军军医大学,2019.