阪崎肠杆菌显色培养基(DFI琼脂)的应用

背景^[1-3]

阪崎肠杆菌显色培养基(DFI琼脂)是用于阪崎肠杆菌的分离培养，阪崎肠杆菌显蓝-绿色菌落，其它菌显无色或黄色。

用法：称取本品8.62g加入200ml蒸馏水，加热煮沸完全溶解，121℃高压灭菌15min，冷至50℃左右时，倾入无菌平皿。

操作步骤：

⒈取瓶内干粉39.6克，加入蒸馏水或去离子水1 L，搅拌加热煮沸至完全溶解，分装三角瓶，121℃高压灭菌15min；冷却至50℃，摇匀倒平板。在室温可保存一天或在冰箱里贮存数天（避光，4℃）。

⒉取样品333.0克按MPN三管法分别取100.0克、10.0克和1.0克分装在各三个2000.0ml、250.0ml和100.0ml的三角瓶中，在三角瓶中已装有经45℃预热的9/10（样品为1/10）的无菌蒸馏水，摇匀，在36℃培养18～22小时（SN和FDA方法）。

⒊各取10.0ml上述悬浮液加到装有90.0mlEE肉汤（022160）的150.0ml的三角瓶中，在36℃增菌培养18～22小时。

⒋用划线或涂布法把混匀的EE肉汤接种到阪崎肠杆菌显色琼脂平板上，35～37℃培养18～24小时。

⒌可使用MicrogenTMGN-ID或API20E或生化管试验，对疑似阪崎肠杆菌菌落进行生化鉴定。

阪崎肠杆菌（又称阪崎氏肠杆菌）是肠杆菌科的一种，1980年由黄色阴沟肠杆菌更名为阪崎肠杆菌。阪崎肠杆菌能引起严重的新生儿脑膜炎、小肠结肠炎和菌血症，死亡率高达50%以上。目前，微生物学家尚不清楚阪崎肠杆菌的污染来源，但许多病例报告表明婴儿配方粉是目前发现的主要感染渠道。

应用^[4][5]

用于乳制品中阪崎肠杆菌的暴露研究

以奶粉、巴杀乳、UHT乳和发酵乳四种主要乳制品作为研究对象,利用概率论统计的方法研究乳制品加工过程中阪崎肠杆菌的分布情况,对乳制品生产过程各个关键控制点中阪崎肠杆菌的污染情况进行研究统计,对于保障奶粉安全和指导奶粉生产具有重要意义；通过阪崎肠杆菌污染乳制品模拟试验,研究其在乳制品货架期期间的生长趋势和存活情况,对于乳制品的安全贮存及科学喂养具有一定的理论指导意义。

研究结果如下：1、通过对奶粉加工过程关键控制点阪崎肠杆菌污染情况的研究,得出了浓缩后、喷雾干燥后、流化床后和成品中阪崎肠杆菌的污染率分别为0%、9.38%、3.13%和7.81%。

2、通过对巴氏杀菌乳加工过程中关键控制点阪崎肠杆菌污染情况的研究,得出了投产前生乳、配料后、巴氏杀菌(88-94℃,300s)后、灌装后成品中阪崎肠杆菌的污染率分别为41.94%、25.81%、0%和3.23%。

3、通过对UHT乳加工过程关键控制点阪崎肠杆菌污染情况的研究,得出了投产前生乳、配料后、巴氏杀菌(88-94℃,15s)后、灌装后成品中阪崎肠杆菌的污染率分别为50.00%、40.00%、3.33%和0%。

4、通过对发酵乳加工过程关键控制点阪崎肠杆菌污染情况的研究,得出了投产前生乳、配料后、巴氏杀菌(88-94℃,300s)后、灌装后成品中阪崎肠杆菌的污染率分别为23.33%、16.67%、3.33%和3.33%。

5、通过奶粉粉货架期中阪崎肠杆菌污染模拟试验,得出了37℃下贮存第0月、第1月、第2月和第3月阪崎肠杆菌含量分别为2.3cfu/100g、0.92cfu/100g、0.36cfu/100g和小于0.3cfu/100g。

6、通过巴氏杀菌乳原辅材料阪崎肠杆菌污染模拟试验,证明了巴氏杀菌(88-94℃,300s)能完全杀灭巴氏杀菌乳中不同浓度的阪崎肠杆菌。

参考文献

[1]Efficacy of selected probiotic cultures to inhibit Enterobacter sakazakii ATCC 12868 in model reconstituted dairy products[J].Makuba A.Lihono,Aubrey F.Mendonca,Bledar Bisha,La Tanya Bankston,Terri D.Boylston.Int.J.of Food Safety,Nutrition and Public Heal.2011(2/3/)

[2]Distribution,prevalence and persistence of Cronobacter(Enterobacter sakazakii)in the nonprocessing and processing environments of five milk powder factories[J].H.M.Craven,C.M.McAuley,L.L.Duffy,N.Fegan.Journal of Applied Microbiology.2010(3)

[3]Inactivation of Cronobacter spp.(Enterobacter sakazakii)in infant formula using lactic acid,copper sulfate and monolaurin[J].M.A.Al‐Holy,L.F.Castro,H.M.Al‐Qadiri.Letters in Applied Microbiology.2010(3)

[4]Isolation of Enterobacter sakazakii and other Enterobacteriaceae from powdered infant formula milk and related products[J].Carol Iversen,Stephen Forsythe.Food Microbiology.2004(6)

[5]覃小玲.乳制品中阪崎肠杆菌的暴露研究[D].中南林业科技大学,2012.