磷酸化Β抑制蛋白1抗体的应用

背景^[1-3]

磷酸化Β抑制蛋白1抗体是一类可以特异性结合磷酸化Β抑制蛋白1的多克隆免疫球蛋白，主要用于检测磷酸化Β抑制蛋白1的免疫学先关实验。

β-抑制蛋白(β-arrestins)是一组多功能的小分子蛋白质,对调节细胞内信号转导扮演着非常重要的角色。其经典作用是参与G蛋白偶联受体的脱敏和内吞。近年研究发现，β-arrestins特别是β-arrestin-1蛋白作为信号转导的“交通员”，也参与了许多非G蛋白偶联受体激活的信号转导，在蛋白酶体降解、细胞凋亡以及多种细胞信号转导中起着重要的作用。

G蛋白偶联受体（G Protein-Coupled Receptors，GPCRs）是一大类膜蛋白受体的统称。这类受体的共同点是其立体结构中都有七个跨膜α螺旋，且其肽链的C端和连接（从肽链N端数起）第5和第6个跨膜螺旋的胞内环（第三个胞内环）上都有G蛋白（鸟苷酸结合蛋白）的结合位点。目前为止，研究显示G蛋白偶联受体只见于真核生物之中，而且参与了很多细胞信号转导过程。在这些过程中，G蛋白偶联受体能结合细胞周围环境中的化学物质并激活细胞内的一系列信号通路，最终引起细胞状态的改变。

应用^[4][5]

用于β-抑制蛋白1及蛋白激酶B(PKB/Akt)在棉铃虫脱皮激素信号通路中的功能研究

以鳞翅目昆虫棉铃虫作为研究材料,探索P-arrestin 1在蜕皮激素信号脱敏中的功能及作用机制,对丰富动物甾醇类激素调控机理有重要的意义。胰岛素作为昆虫发育调控重要激素,探究Akt在蜕皮激素信号拮抗胰岛素信号中的作用,对进一步解棉铃虫发育的的分子机理,以及胰岛素和蜕皮激素协同调控昆虫发育的机理提供新的依据。

实验结果及结论：1.β-arrestinl参与蜕皮激素信号终止作用利用免疫印迹实验发现β-arrestinl在表皮、中肠、脂肪体的变态时期高表达,幼虫中干扰β-arrestinl可导致提前化蛹以及嵌合蛹的形成,并且干扰和细胞系过表达实验证明β-arrestinl可会降低20E应答基因的表达。

进一步的免疫细胞实验发现20E诱导β-arrestinl从细胞质向细胞膜迁移,并与ErGPC R1相互作用,GPCR的抑制剂和PKC的抑制剂能够抑制20E诱导的β-arrestinl的磷酸化以及向细胞膜的迁移。进一步的突变实验发现,20E调控β-arrestinl在丝氨酸170和234位氨基酸的磷酸化和移位。

这些结果表明,20E通过ErGPCR1-和PKC-信号诱导β-arrestin1磷酸化；磷酸化的β-arrestin1从细胞质迁移到细胞膜与ErGPCRl相互作用,以反馈调节的方式来阻断20E信号。本文阐明20E信号终止的机制,丰富了动物类固醇激素非基因组信号转导途径。

2.蜕皮激素通过抑制Akt磷酸化拮抗胰岛素信号从棉铃虫细胞系干扰Akt或高浓度的20E均能上调凋亡相关基因的表达,导致细胞凋亡。

参考文献

[1]Estrogen receptor signaling during vertebrate development[J].Maria Bondesson,Ruixin Hao,Chin-Yo Lin,Cecilia Williams,Jan-?ke Gustafsson.BBA-Gene Regulatory Mechanisms.2014

[2]Role ofβ-arrestins and arrestin domain-containing proteins in G protein-coupled receptor trafficking[J].Dong Soo Kang,Xufan Tian,Jeffrey L Benovic.Current Opinion in Cell Biology.2014

[3]Developmentally programmed cell death in Drosophila[J].Donna Denton,May T.Aung-Htut,Sharad Kumar.BBA-Molecular Cell Research.2013

[4]Regulation of Arrestin Translocation by Ca2+and Myosin III in Drosophila Photoreceptors[J].Roger C.Hardie,Akiko K.Satoh,Che-Hsiung Liu.Journal of Neuroscience.2012(27)

[5]张孝乾.β-抑制蛋白1及蛋白激酶B(PKB/Akt)在棉铃虫脱皮激素信号通路中的功能研究[D].山东大学,2015.