肿瘤坏死因子抗体的应用

背景^[1-3]

肿瘤坏死因子抗体可以特异性结合肿瘤坏死因子的免疫抗体，主要用于检测肿瘤坏死因子的Western blotting、Immunohistocry、ELISA、IF、IHC-P、IHC-F等生物实验。

肿瘤坏死因子定位于6p21.4，长约3.6 kbp，有4个外显子和3个内含子，与主要组织相容性复合体（MHC）基因紧密连锁位于HLA-B和HLA-C2位点之间的MHC3类基因区内，由TNFA和TNFB组成，分别编码TNFα和TNFβ。位于启动子区238位和308位存在单核苷酸多态性，被认为可调节TNF的转录水平，与慢性乙肝、自身免疫性疾病、胰岛素抵抗、肿瘤等多种疾病的易感性相关。TNF基因编码的mRNA约1.7 kbp，在其3`非翻译区有一段许多细胞因子都具有的保守TTATTTAT序列（AU富含元件，ARE）。

人TNF-α前体由233个氨基酸组成（26 kDa），其中包含由76个氨基酸残基组成的信号肽，在TNF转化酶TACE的作用下，切除信号肽，形成成熟的157个氨基酸残基的TNF-α（17 kDa）。由于没有蛋氨酸残基，故不存在糖基化位点，其中第69位和101位两个半胱氨酸形成分子内二硫键。人类TNF-α与小鼠TNF-α有79%氨基酸组成同源性，TNF-α的生物学作用似无明显的种属特异性。

最近有人报道通过基因工程技术表达了N端少2个氨基酸（Val、Arg）的155氨基酸人TNF-α，具有更好的生物学活性和抗肿瘤效应。此外，还有用基因工程方法，将TNF-α分子氨基端7个氨基酸残基缺失，再将8Pro、9Ser和10Asp改为8Arg、9Lys和10Arg，或者再同时将157Leu改为157Phe，改构后的TNF-α比天然TNF体外杀伤L929细胞的活性增加1000倍左右，在体内肿瘤出血坏死效应也明显增加。TNF-α和β发挥生物学效应的天然形式是同源的三聚体。

应用^[4][5]

用于血管活性肠肽、肿瘤坏死因子在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义研究

测定血管活性肠肽及其受体、肿瘤坏死因子在子痫前期患者胎盘组织中的表达情况，探讨其在子痫前期发病过程中的作用。

方法：选择轻度子痫前期（mild preeclampsia,MP）、重度子痫前期（severepreeclampsia,SP）各20例，选择同期与子痫前期组年龄和终止妊娠天数相匹配的单胎初产未临产剖宫产孕妇20例为对照组，采用免疫组织化学方法测定其胎盘组织中血管活性肠肽及其受体、肿瘤坏死因子的表达及定位，进行半定量检测并作比较。

结果：(1)血管活性肠肽及其受体在正常妊娠组、子痫前期轻度组、重度组中均有表达，且主要表达于胎盘合体滋养细胞、蜕膜细胞的细胞浆及细胞膜。

(2) 在轻度子痫前期组与对照组相比，胎盘组织中血管活性肠肽及其受体的表达明显减弱，差异有统计学意义（P<0.01）；在重度子痫前期组与对照组相比，胎盘组织中血管活性肠肽及其受体的表达明显减弱，差异有统计学意义（P<0.01）；子痫前期重度组与轻度组相比，胎盘组织中血管活性肠肽及其受体的表达结果，差异有统计学意义（P<0.01），且随着病情加重，血管活性肠肽及其受体表达有下降趋势。

（3）在轻度子痫前期组与对照组相比，胎盘组织中肿瘤坏死因子的表达明显增强，差异有统计学意义（P<0.01）；在重度子痫前期组与对照组相比，胎盘组织中肿瘤坏死因子的表达明显增强，差异有统计学意义（P<0.01）；子痫前期重度组与轻度组相比，胎盘组织中肿瘤坏死因子的表达结果，差异有统计学意义（P<0.01）。

（4）血管活性肠肽与受体1及受体2呈正相关；血管活性肠肽与肿瘤坏死因子呈负相关。

参考文献

[1]Chrysin sensitizes tumor necrosis factor-α-induced apoptosis in human tumor cells via suppression of nuclear factor-kappaB[J].Xin Li,Qing Huang,Choon-Nam Ong,Xing-Fen Yang,Han-Ming Shen.Cancer Letters.2010(1)

[2]Intestinal infection with Giardia spp.reduces epithelial barrier function in a myosin light chain kinase–dependent fashion[J].Kevin G.–E.Scott,Jonathon B.Meddings,David R.Kirk,Susan P.Lees–Miller,AndréG.Buret.Gastroenterology.2002(4)

[3]Molecular pharmacology and structure of VPAC Receptors for VIP and PACAP[J].M Laburthe,A Couvineau.Regulatory Peptides.2002(2)

[4]The gene encoding vasoactive intestinal peptide is located on human chromosome 6p21→6qter[J].Illana Gozes,Rina Avidor,Yaakov Yahav,Daniel Katznelson,Carlo M.Croce,Kay Huebner.Human Genetics.1987(1)

[5]陈兰钦.血管活性肠肽、肿瘤坏死因子在子痫前期患者胎盘组织中的表达及意义[D].福建医科大学,2012.