辣根过氧化物酶标记羊抗人IGG的应用
发布日期:2020/9/3 9:54:05
背景[1-3]
辣根过氧化物酶标记羊抗人IGG是以人IGG H&L为抗原的辣根过氧化物酶羊多克隆抗体,可以特异性结合人IGG H&L。辣根过氧化物酶标记羊抗人IGG主要用于ICC/IF,Dotblot,ELISA,IHC-P,IHC-Fr,Immunomicroscopy,WB等人IGG H&L检测实验。
抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原决定簇(表位)和抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性。这种特性是由抗原、抗体分子空间构型所决定的。除两者分子构型高度互补外,抗原表位和抗体超变区必须密切接触,才有足够的结合力。
抗原抗体反应可分为两个阶段:阶段为抗原与抗体发生特异性结合的阶段,此阶段反应快,仅需几秒至几分钟,但不出现可见反应;
第二阶段为可见反应阶段,这一阶段抗原抗体复合物在适当温度、pH、电解质和补体影响下,出现沉淀、凝集、细胞溶解、补体结合介导的肉眼可见的反应,此阶段反应慢,往往需要数分钟至数小时。在血清学反应中,以上两阶段往往不能严格分开,往往受反应条件(如温度、pH、电解质、抗原抗体比例等)的影响。
免疫球蛋白baiG(IgG)是血清中免疫球du蛋白主成分,约占血清zhi中免疫球蛋白总含量的75%,正常dao值为9.5~12.5mg/ml。其中40~50%分布于血清中,其余分布在组织中。分子量约为150000道尔顿。人类血清中的IgG主要为单体,正常人的IgG包括四个亚型,其IgG1占60~70%,IgG2占15~20%,IgG3占5~10%,IgG4占1~7%。这些亚型在补体激活的经典途中结合能力各不相同。
应用[4][5]
用于IgG4、补体Ⅰ因子在特发性膜性肾病中的意义研究
IMN发病机制是由于免疫球蛋白G(Immunoglobulin G,IgG)与肾小球足细胞基底膜侧的固有抗原结合形成抗原抗体复合物激活补体形成膜攻击复合物(Membrane attack complex MAC,C5b-9)而导致足细胞的形态改变进而产生蛋白尿和低蛋白血症等一系列症状。足细胞沉积的IgG亚类以IgG4为主,新近发现的几种致病抗原在肾小球内与IgG4的沉积位置一致。补体系统是MN肾小球损伤的最重要的调节者,IMN补体激活主要经替代途径,补体激活受促进因素(免疫复合物)和抑制因素(补体调节蛋白)的影响。
补体调节因子Ⅰ又称补体Ⅰ因子(Complement FactorⅠ,CFI),表达于肝细胞,单核细胞,成纤维细胞及角质细胞等,是补体替代途径中重要的补体调节蛋白,Ⅰ因子可裂解C3b,在补体活化过程中起到了重要的抑制作用,从而减少MAC形成导致足细胞的损伤。
从组织及体液标本两方面,应用生化指标检测、免疫组织化学染色法,对比分析IgG亚类、补体Ⅰ因子及C3b在IMN及微小病变型肾病(minimal change disease,MCD)肾组织中的表达,并通过双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA法)分析IgG4、补体Ⅰ因子及C3b的血、尿表达水平,及其之间的定量关系,从而进一步阐明IgG4、补体Ⅰ因子及C3b之间的关系,以及补体Ⅰ因子在IMN中补体激活调节机制中的意义。
参考文献
[1]IgG4-Related Disease Is Not Associated with Antibody to the Phospholipase A2 Receptor[J].Arezou Khosroshahi,Rivka Ayalon,Laurence H.Beck,David J.Salant,Donald B.Bloch,John H.Stone,Hisanori Umehara.International Journal of Rheumatology.2012
[2]Management of idiopathic membranous nephropathy[J].Claudio Ponticelli,Patrizia Passerini.Expert Opinion on Pharmacotherapy.2010(13)
[3]Membranous glomerulopathy:the evolving story[J].Pierre Ronco,Hanna Debiec.Current Opinion in Nephrology and Hypertension.2010(3)
[4]IgG subclasses and complement pathway in segmental and global membranous nephropathy[J].Yoshie Segawa,Satoshi Hisano,Misao Matsushita,Teizo Fujita,Shinichi Hirose,Morishige Takeshita,Hiroshi Iwasaki.Pediatric Nephrology.2010(6)
[5]刘小静.IgG4、补体Ⅰ因子在特发性膜性肾病中的意义[D].河北医科大学,2014.
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