Anti-NeuN (rabbit monoclonal), clone 27-4的应用

背景^[1-3]

Anti-NeuN(rabbit monoclonal),clone 27-4是以Anti-NeuN为抗原以兔为宿主制得的NeuN(rabbit monoclonal)抗体，可以特异性结合兔NeuN。

神经元是大脑的基本信号组件。因此，一切尝试从整体上了解大脑是如何工作的基本组成部分都要从研究功能不同的各类型神经细胞开始。为此，免疫组化标记已逐渐成为神经科学家最有价值的工具之一。利用各种细胞组分的抗体，研究者能够识别表达神经细胞表型的细胞，而且，就其形态特征和特定蛋白表达收集信息。

NeuN能够识别脊椎动物神经元特异的核蛋白单克隆抗体的产生。该蛋白被称为神经核（NeuN），能够在成年小鼠中枢和外周神经系统的多数神经细胞类型中检测到。NeuN的出现暂时与神经细胞退出细胞周期和/或终末分化开始一致。该蛋白质在胚胎和成年神经细胞中，除小脑浦肯野细胞、嗅球僧帽细胞、视网膜感光细胞、黑质中的多巴胺能神经元外的其他细胞中都能够检测到。

尽管NeuN的免疫组化检测已经被广泛使用，其功能知道最近才被了解清楚。研究人员现在已经能够将NeuN鉴定为Fox-3，Fox-3蛋白质参与调控的mRNA剪接。由于Fox-3由神经系统特异性表达，人们发现它在调节神经细胞分化和神经系统发育中发挥作用

应用^[4][5]

用于人胚胎脊髓发育中Nestin，NeuN，GFAP的表达变化及凋亡细胞的检测研究

探讨人胚胎脊髓发育过程中神经干细胞、神经元、星形胶质细胞的发育变化和规律以及细胞凋亡的变化。

[方法]采用免疫组织化学方法检测神经干细胞、神经元、星形胶质细胞的标记蛋白Nestin,NeuN,GFAP在3w～8m人胚胎脊髓中的表达及变化;应用TUNEL法检测3w～8m人胚胎脊髓中的原位凋亡细胞。

[结果]1.Nestin染色结果:Nestin在整个人胚胎脊髓发育过程中均可见到,3w即可在神经管见到阳性细胞;5w～6w,阳性细胞在神经上皮背侧较腹侧多,套层、边缘层中阳性细胞开始出现并增多,脊神经节内可见阳性反应物;7w～8w,套层可见大量突起较长的阳性细胞(P＜0.05);10w～11w以后神经上皮、灰白质内阳性细胞密度和强度均逐渐减少,中央管、白质阳性细胞于3m、5m后趋于稳定,灰质内可见少量有短突起的阳性细胞。

2.NeuN染色结果:NeuN阳性细胞在5w的套层中始见,数量少且染色浅,边缘层未见NeuN阳性细胞;6w～7w,阳性细胞明显增多,尤以基板为甚,脊神经节内也可见到阳性细胞;8w～9w,套层内阳性细胞进一步增多(P＜0.05);10w,腹角内阳性细胞有所减少,后根处始见少量阳性细胞;11w～3m,灰质内阳性细胞数明显降低(P＜0.05),腹角见体积较大、胞核深染的运动神经元;4m～6m,灰质内的阳性细胞数继续减少(P＜0.05),后根处阳性细胞减少(P＜0.05);7m～8m,灰质内阳性细胞数量未有明显变化。

参考文献

[1]Long-term cultivation of multipotential neural stem cells from adult rat subependyma[J].Glenn T.Gobbel,Seung-Jin Choi,Steven Beier,Ajay Niranjan.Brain Research.2003(2)

[2]Neuroprotection of glial cell line‐derived neurotrophic factor in damaged spinal cords following contusive injury[J].HenrichCheng,Jey‐PeiWu,Shun‐FenTzeng.J.Neurosci.Res..2002(3)

[3]Ciliary Neurotrophic Factor Activates Spinal Cord Astrocytes,Stimulating Their Production and Release of Fibroblast Growth Factor-2,to Increase Motor Neuron Survival[J].Phillip J.Albrecht,John P.Dahl,Olivia K.Stoltzfus,Robert Levenson,Steven W.Levison.Experimental Neurology.2002(1)

[4]Neural stem cells and regulation of cell number[J].Lukas Sommer,Mahendra Rao.Progress in Neurobiology.2002(1)

[5]高燕.人胚胎脊髓发育中Nestin，NeuN，GFAP的表达变化及凋亡细胞的检测[D].昆明医学院,2008.