千里光菲灵碱的制备和生物活性研究

背景及概述^[1]

千里光菲灵碱，属吡咯生物碱类化合物，小菱形片状结晶，易溶于氯仿、氯化乙烯，微溶于乙醇、丙酮，难溶于乙醚、石油醚。来源于菊科千里光属植物千里光的干燥全草，动物实验显示具有解痉作用，对氨甲酰胆碱(Carbachol)引起大鼠及兔的离体肠管的痉挛有较强的解痉作用。

制备^[1]

取千里光药材原料1kg，粉碎至20目，加入90％乙醇溶液回流提取3次，合并提取液，加入其体积的0.8％的活性炭脱色，过滤得到脱色液，脱色液浓缩至浸膏，浸膏用5％的盐酸水溶液溶解，过滤，滤液上D151阳离子交换树脂，先用去离子水洗至中性，再用4LpH11的75％乙醇溶液洗脱，洗脱液减压浓缩，调pH10，放置结晶，过滤得到结晶，结晶用丙酮回流溶解，趁热过滤，放冷结晶，滤出结晶干燥即得产品5.3g，含量为88.7％。

生物活性研究^[2]

马景蕃等人探讨了千里光菲灵碱对人宫颈癌He La、Caski细胞增殖、自噬的影响及其可能的作用机制。MTT法检测千里光菲灵碱对He La、Caski细胞增殖的影响;免疫荧光法检测GFP-LC3/He La和GFP-LC3/Caski两种细胞内自噬体的形成情况;免疫印迹法检测千里光菲灵碱对自噬相关蛋白表达的影响;荧光共定位法检测自噬体与溶酶体的融合情况;建立荷宫颈癌He La、Caski细胞移植瘤裸鼠模型,检测千里光菲灵碱对移植瘤生长的抑制作用。结果显示,千里光菲灵碱呈时间和剂量依赖性抑制He La、Caski两种宫颈癌细胞的增殖;千里光菲灵碱可诱导He La、Caski细胞内自噬体的形成和LC3-II蛋白的增加及P62蛋白的减少,表明千里光菲灵碱可诱导He La、Caski细胞发生自噬;与单药千里光菲灵碱相比,千里光菲灵碱联合自噬下游抑制剂氯喹(CQ)显著增加了LC3-II及P62的蛋白表达,同时荧光共定位显示千里光菲灵碱诱导的自噬体可与溶酶体实现共定位,表明千里光菲灵碱可诱导完整自噬流;与单药千里光菲灵碱相比,千里光菲灵碱联合自噬上游抑制3-甲基腺嘌呤(3MA)剂显著增加了LC3-II的蛋白表达,显著降低了He La、Caski细胞的存活率,表明抑制自噬可增强千里光菲灵碱对宫颈癌细胞增殖的抑制作用;与单药千里光菲灵碱相比,千里光菲灵碱联合MEK抑制剂显著降低了P-ERK1/2的蛋白表达,减少了自噬体的形成,表明千里光菲灵碱诱导的He La、Caski细胞自噬依赖于MEK/ERK1/2途径;另外,千里光菲灵碱可显著抑制宫颈癌细胞裸鼠皮下移植瘤的生长。

应用^[3]

CN201711488595.X报道了杀灭空气霉菌传染病毒的熏蒸植物纳米脂制备方法及应用，原料由杜仲脂、羟基环十五酮、千里光菲灵碱、高纯度左旋龙脑、纳米银溶胶、麝香、肉桂醛配制成的薰蒸植物纳米脂。解决了无孔不入熏蒸杀灭室内空气中霉菌、军团菌、传染性病菌、病毒的独创性。解决了人群中使用持续不断动态高效杀灭传染流感、杀灭人与人呼吸道传播的独创性。实现了人机同一室，产品无毒、无副作用、熏蒸植物纳米脂,升华气体1-30纳米悬浮在室内空气中达到杀灭有害病菌、病毒，预防疾病的传播，应用于空调、汽车、空气净化器、高铁、火车、飞机、轮船、集装箱、居室、学校、幼儿院、医院、宾馆、公共场所等使用，具有应用前景广阔。

参考文献

[1][中国发明]CN201110117945.8一种千里光菲灵碱的提取方法

[2]马景蕃,张燕,叶甘萍,韦启良,邱龙新.千里光菲灵碱诱导MEK/ERK1/2介导的宫颈癌细胞自噬效应[J].中国药科大学学报,2018,49(05):616-623.

[3] CN201711488595.X杀灭空气霉菌传染病毒的薰蒸植物纳米脂制备方法及应用