Anti-alpha Tubulin抗体的应用

背景^[1-3]

Anti-alpha Tubulin抗体是以大肠杆菌内重组表达的人源Alpha-Tubulin蛋白（C末端1-323氨基酸残基）为抗原的多克隆抗体，可以特异性结合Anti-alpha Tubulin。Anti-alpha Tubulin主要用于ICC/IF,Dotblot,ELISA,IHC-P,IHC-Fr,Immunomicroscopy,WB等alpha Tubulin检测实验。

抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原决定簇（表位）和抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性。这种特性是由抗原、抗体分子空间构型所决定的。除两者分子构型高度互补外，抗原表位和抗体超变区必须密切接触，才有足够的结合力。

抗原抗体反应可分为两个阶段：阶段为抗原与抗体发生特异性结合的阶段，此阶段反应快，仅需几秒至几分钟，但不出现可见反应；

第二阶段为可见反应阶段，这一阶段抗原抗体复合物在适当温度、pH、电解质和补体影响下，出现沉淀、凝集、细胞溶解、补体结合介导的肉眼可见的反应，此阶段反应慢，往往需要数分钟至数小时。在血清学反应中，以上两阶段往往不能严格分开，往往受反应条件（如温度、pH、电解质、抗原抗体比例等）的影响。

Tubulin即微管蛋白，是细胞的一种骨架蛋白。Tubulin分为α、β、γ、δ、ε等多种tubulin，其中Alpha Tubulin和Beta Tubulin可以形成异源二聚体，是形成微管的最主要的两种Tubulin。Alpha tubulin和Beta tubulin分子量分别为55kDa和50kDa，其实际检测条带均在55kDa左右。作为内参，Beta tubulin的蛋白水平通常不会发生改变，因此被广泛用于Western Bloting时上样量是否一致的参照，也常被用于免疫染色观察细胞的微管结构。

应用^[4][5]

用于TopoⅡα和β微管蛋白Ⅲ的表达与乳腺癌新辅助化疗疗效的初步研究

探索乳腺癌组织中TopoⅡα和β微管蛋白Ⅲ基本表达规律,分析其表达与新辅助化疗疗效的关系,探讨TopoⅡα和β微管蛋白Ⅲ是否分别与蒽环类和紫杉类药物耐药相关,评价二者的检测是否可以作为制定乳腺癌个体化化疗方案的预测指标。

方法选取64例女性原发性乳腺癌患者,随机接受蒽环类+环磷酰胺或紫杉类+环磷酰胺或蒽环类+紫杉类+环磷酰胺的新辅助化疗3-4周期后评价化疗疗效。采用免疫组化的方法,检测化疗前空心针穿刺组织标本中癌细胞TopoⅡα和β微管蛋白Ⅲ的表达,了解它们的表达与新辅助化疗疗效的关系,探讨二者是否分别与蒽环类和紫杉类药物耐药相关。SPSS17.0系统进行统计分析。

结果1.在本研究人群中,TopoⅡα阳性表达率为59.38%。β微管蛋白Ⅲ阳性表达率为64.06%。

2. TopoⅡα的表达与临床分期、新辅助化疗后术后腋窝淋巴结的数目、ER、PgR、HER2和Ki67之间无相关性。β微管蛋白Ⅲ的表达与新辅助化疗后术后腋窝淋巴结的数目、ER、HER2和Ki67之间无相关性,与临床分期表达呈正相关,与孕激素受体的表达呈负相关。

3.蒽环类化疗药物的化疗疗效与TopoⅡα的表达情况相关。TopoⅡα表达为阳性的患者在使用蒽环类药物化疗时能获得更好的化疗疗效。在HER2过表达的患者中,HER2和TopoⅡα共表达者接受蒽环类药物化疗的疗效更好。4.紫杉类化疗药物的化疗疗效与p微管蛋白Ⅲ的表达间未发现相关性。

参考文献

[1]Association between class IIIβ-tubulin expression and response to paclitaxel/vinorebine-based chemotherapy for non-small cell lung cancer:A meta-analysis[J].Hai-Long Zhang,Li Ruan,Li-Mou Zheng,David Whyte,Chi-Meng Tzeng,Xi-Wu Zhou.Lung Cancer.2012(1)

[2]Class IIIβ-tubulin expression in advanced-stage serous ovarian carcinoma effusions is associated with poor survival and primary chemoresistance[J].Human Pathology.2011(7)

[3]Predictive Markers of Tubulin-Targeting Agents in Breast Cancer[J].Shou-Ching Tang.Clinical Breast Cancer.2008

[4]Taxol Resistance Among the Different Histological Subtypes of Ovarian Cancer May Be Associated With the Expression of Class IIIβ-Tubulin[J].Tomokazu Umezu,Kiyosumi Shibata,Hiroaki Kajiyama,Mikio Terauchi,Kazuhiko Ino,Akihiro Nawa,Fumitaka Kikkawa.International Journal of Gynecological Pathology.2008(2)

[5]戴旭.TopoⅡα和β微管蛋白Ⅲ的表达与乳腺癌新辅助化疗疗效的初步研究[D].中南大学,2012.