CHAT胆碱乙酰转移酶抗体的应用

背景^[1-3]

CHAT胆碱乙酰转移酶抗体是以CHAT胆碱乙酰转移酶为抗原的多克隆抗体，可以特异性结合CHAT胆碱乙酰转移酶。CHAT胆碱乙酰转移酶抗体主要用于ICC/IF,Dotblot,ELISA,IHC-P,IHC-Fr,Immunomicroscopy,WB等CHAT胆碱乙酰转移酶检测实验。

抗原与抗体能够特异性结合是基于抗原决定簇（表位）和抗体超变区分子间的结构互补性与亲和性。这种特性是由抗原、抗体分子空间构型所决定的。除两者分子构型高度互补外，抗原表位和抗体超变区必须密切接触，才有足够的结合力。

乙酰胆碱，是一种神经递质。在组织内迅速被胆碱酯酶破坏。乙酰胆碱能特异性地作用于各类胆碱受体，但其作用广泛，选择性不高。临床不作为药用，一般只做实验用药。在神经细胞中，乙酰胆碱是由胆碱和乙酰辅酶A在胆碱乙酰移位酶（胆碱乙酰化酶）的催化作用下合成的。主流研究认为人体内该物质含量增多与阿尔兹海默病（老年痴呆症）的症状改善显著相关。

胆碱乙酰转移酶是一种在神经元胞体内合成的酶。当该转移酶被合成以后，通过轴质流动方式转移到神经轴突末端。其功能是将乙酰辅酶A转移到胆碱上，导致神经递质乙酰胆碱的形成。

应用^[4][5]

用于胆碱乙酰转移酶在人牙周膜细胞中的表达及尼古丁对其表达的影响研究

观察胆碱乙酰转移酶(choline acetyltransferase,ChAT)在人牙周膜成纤维细胞(Periodontal ligament fibroblast,PDLF)中的表达,并探讨ChAT调节在参与尼古丁对PDLF损伤过程中的作用,通过建立尼古丁作用下PDLF体外实验模型,采用RT-PCR,DNA测序和免疫组化等方法,观察PDLF中是否存在ChAT及在尼古丁作用下其表达的改变。

旨在探讨ChAT在尼古丁与吸烟相关性牙周炎发生发展中的作用,为寻找新的牙周炎防治途径提供理论和实验依据。1人牙周膜成纤维细胞中ChAT的表达取12-18岁志愿者正畸减数拔除的健康前磨牙,刮取根中1/3处牙周膜组织,改良组织块法原代培养PDLF,鉴定,传代,4-6代细胞用于实验。

采用免疫荧光及RT-PCR方法检测PDLF中ChAT的表达。免疫荧光结果显示,PDLF胞浆中存在ChAT的阳性表达;RT-PCR结果显示在与阳性对照组相同位置299 bp处可见阳性条带,且经克隆测序证实扩增产物为ChAT。初步证实,在PDLF中存在ChAT蛋白及mRNA表达。

2尼古丁对ChAT在人牙周膜成纤维细胞中表达的影响第4代PDLF随机分为两组,对照组:5%新生牛血清DMEM培养液;实验组:尼古丁硫酸盐(10-12mol/L)溶于含5%新生牛血清DMEM培养液。37℃、5%CO2孵箱中孵育24h。RT-PCR、实时定量PCR及免疫荧光方法检测尼古丁对ChAT在PDLF表达的影响。

参考文献

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[2]A New Inflammatory Cytokine on the Block:Re-thinking Periodontal Disease and the Th1/Th2 Paradigm in the Context of Th17 Cells and IL-17[J].Gaffen,S L,Hajishengallis,G.Journal of Dental Research.2008(9)

[3]Acetylcholine inhibits long-term hypoxia-induced apoptosis by suppressing the oxidative stress-mediated MAPKs activation as well as regulation of Bcl-2,c-IAPs,and caspase-3 in mouse embryonic stem cells[J].Min Hee Kim,Mi Ok Kim,Jung Sun Heo,Jin Sang Kim,Ho Jae Han.Apoptosis.2008(2)

[4]Receptor-mediated tobacco toxicity:Alterations of the NF-κB expression and activity downstream ofα7 nicotinic receptor in oral keratinocytes[J].Juan Arredondo,Alexander I.Chernyavsky,David L.Jolkovsky,Kent E.Pinkerton,Sergei A.Grando.Life Sciences.2007(24-2)

[5]葛鑫.胆碱乙酰转移酶在人牙周膜细胞中的表达及尼古丁对其表达的影响[D].第四军医大学,2010.