Anti-BCMA Antibody的应用

背景^[1-3]

Anti-BCMA Antibody是一类可以特异性结合BCMA的多克隆抗体，主要用于检测BCMA的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多种免疫学实验。

检测原理：双抗体夹心法测定标本中BCMA水平。用纯化的BCMA抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入BCMA，再与HRP标记的BCMA抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的BCMA呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中BCMA浓度。

BCMA（B cell maturation antigen），也叫TNFRSF17（TNF receptor superfamily member 17，TNF配体超家族成员17），主要在浆细胞和成熟B淋巴细胞中表达，在其它的正常人体细胞中基本检测不到。

BCMA RNA在MM细胞中普遍检测到，多发性骨髓瘤患者的浆细胞表面可检测到BCMA蛋白。BCMA是肿瘤坏死因子受体（TNF）超家族的成员，可结合B细胞激活因子（BAFF）和增殖诱导配体（APRIL）。

据报道，在正常细胞中，BCMA主要由浆细胞和一部分成熟B细胞表达，而在大部分B细胞以及其它器官上都不表达。BCMA缺乏的小鼠看上去一切正常，似乎很健康，而且B细胞数量正常，但浆细胞却不能长期存活。因此，BCMA将是用于治疗具有CAR表达T细胞的MM的合适的靶抗原。

应用^[4][5]

用于B淋巴细胞刺激因子及增殖诱导配体在多发性骨髓瘤中表达及临床意义的研究

B淋巴细胞刺激因子(B lymphocytestimulator,BLyS)和增殖诱导配体(a proliferation-inducling ligand,APRIL)是近年来发现的肿瘤坏死因子(TNF)家族的新成员。二者因具有高度同源性(48%基因序列相同,33%氨基酸相同)和共同的受体(BCMA和TACI)而关系密切。BLyS和APRIL通过与受体的结合影响B、T淋巴细胞的激活、增殖和存活而广泛参与免疫调节,尤其与免疫球蛋白分泌、自身抗体生成等体液免疫功能紊乱关系密切。已有研究发现BLyS/APRIL系统的异常与肿瘤和多种自身免疫性疾病的发生、发展有关。

以酶联免疫吸附实验(ELISA)检测并分析MM患者血清中BLyS和APRIL水平,探讨BLyS/APRIL系统在MM发病中的作用及其与临床肿瘤负荷及预后指标的相关性。方法:1标本的采集用真空采血管分别抽取健康成年人(即对照组,14例)和多发性骨髓瘤患者(实验组,14例)静脉血4ml,14例患者分别抽取其治疗前(即初治组),治疗3个疗程后(即治疗中期组)和治疗6个疗程后(即治疗后期组)的血液标本。血液离体后室温放置30分钟,2000r/min离心15分钟,取上层血清分装于1.5ml的离心管中。标本放入-80℃的低温冰箱中保存备用。

2酶联免疫吸附法检测血清BLyS、APRIL水平,同时检测血清IL-6水平。样本孔内加入100ul的蒸馏水后加入50ul的血清样本,室温孵育三小时,倒掉孔内液体并用洗液缓冲液清洗6次,每个孔内加入100ul的TMB,室温孵育10分钟后加入100ul的反应终止液,于450nm的地方读取吸光值,测定健康对照者和多发性骨髓瘤患者初治组、治疗中期组及治疗后期组血清中BLyS、APRIL及IL-6的浓度变化。

参考文献

[1]Multiple meyloma:diagnosis and treatment.Rajkumar SV,,Kyle RA.Mayo Clinic Proceedings.2005

[2]Immunomodulatory analogs of thalidomide:an emerging new therapy in myeloma.Richardson P,Anderson K.Journal of Clinical Oncology.2004

[3]Neutralizing B-cell activating factor antibody improves survival and inhibits osteoclastogenesis in a severe combined immunodeficient human multiple model.Paola N,,Shaji K,Mariateresa F,et al.Clinical Cancer Research.2007

[4]BLyS:Member ofthetumor nee—rosis factor family and B lymphocyte stimulator.Moore PA,Belvedere O,OrrA,et a1.Science.1999

[5]李超.B淋巴细胞刺激因子及增殖诱导配体在多发性骨髓瘤中表达及临床意义的研究[D].河北医科大学,2009.