JNK1/2/3抗体的应用

背景^[1-3]

JNK123抗体是一类可以特异性结合JNK123的多克隆抗体，主要用于检测JNK123的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多种免疫学实验。

检测原理：双抗体夹心法测定标本中JNK123水平。用纯化的JNK123抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入JNK123，再与HRP标记的JNK123抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的JNK123呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中JNK123浓度。

C-Jun N末端激酶（JNK）也称为丝裂原激活的蛋白激酶（MAPK8）。它属于应激激活蛋白激酶的MAPK超家族。MAPK是丝氨酸-苏氨酸蛋白激酶，可响应多种细胞外刺激而被激活，并介导从细胞表面到细胞核的信号转导。JNK参与多种细胞过程，例如增殖，分化，转录调节和发育。JNK途径受压力和炎症信号的刺激。由于差异的mRNA剪接，JNK被表达为十种不同的亚型。主要形式为JNK1和JNK2。

JNK123能够使c-Jun(一种转录调节因子，属亮氨酸拉链家族成员)氨基末端活性区Ser63和Ser73发生磷酸化的蛋白激酶。是促分裂原活化的蛋白激酶超家族中的一个家族，包括JNK1、JNK2、JNK3，当其活化模体Thr-Pro-Tyr内的Thr、Tyr被JNKK1、JNKK2磷酸化后而激活，活化酶可磷酸化c-Jun等多种蛋白质，从而影响细胞凋亡、炎症和肿瘤的发生。

应用^[4][5]

用于谷氨酰胺诱导热休克蛋白70高表达可抑制大鼠心房纤维化及缝隙连接蛋白43重构研究

谷氨酰胺（glutamine，Gln）诱导热休克蛋白70高表达对盐酸异丙基肾上腺素（isoprenaline hydrochloride,ISOprenaline）所致的大鼠心房纤维化及缝隙连接蛋白43（connexin43，Cx43）重构的影响及其机制。并与缬沙坦（valsartan）在抑制大鼠心房纤维化和缝隙连接蛋白43（Cx43）重构中的作用进行比较，评价谷氨酰胺的应用价值。

方法：该实验共分为两部分，具体实验方法如下：部分实验方法:40只SPF级雄性SD大鼠，体质量（180±20）g，按随机数字表法随机等分为对照组、二甲基亚砜（DMSO）组（DMSO组）、盐酸异丙肾上腺素（isoprenaline，ISO）5mg kg-1 d-1组（模型组）、ISO5mg kg-1 d-1+丙氨酰谷氨酰胺（Ala-Gln）0.75mg kg-1 d-1组（干预组）和ISO5mg kg-1 d-1+槲皮素（quercetin，QUE）100mg kg-1 d-1+Ala-Gln0.75mg kg-1 d-1+DMSO组（QUE组），每组8只大鼠。每组每天1次给予相应试剂，7d后处死大鼠。免疫组化SP法半定量测定心肌组织中热休克蛋白70（Hsp70）、磷酸化c-Jun氨基末端激酶1/2/3（p-JNK1/2/3）、c-Jun及Cx43蛋白的表达。

结果：DMSO组大鼠心房肌组织中AngⅡ含量与对照组比较差异无统计学意义（P>0.05），而模型组、干预组和QUE组则均显著高于对照组（P均<0.01）。

参考文献

[1]Protein folding rates and thermodynamic stability are key determinants for interaction with the Hsp70 chaperone system[J].Ashok Sekhar,Hon Nam Lam,Silvia Cavagnero.Protein Science.2012(10)

[2]Interactions between atrial electrical remodeling and autonomic remodeling:How to break the vicious cycle[J].Lilei Yu,Benjamin J.Scherlag,Yong Sha,Shaolong Li,Tushar Sharma,Hiroshi Nakagawa,Warren M.Jackman,Ralph Lazzara,Hong Jiang,Sunny S.Po.Heart Rhythm.2012(5)

[3]PPAR‐γActivator Pioglitazone Prevents Age‐Related Atrial Fibrillation Susceptibility by Improving Antioxidant Capacity and Reducing Apoptosis in a Rat Model[J].DONGZHUXU,NOBUYUKIMURAKOSHI,MIYAKOIGARASHI,AKIHIRAYAMA,YOKOITO,YOSHIHIROSEO,HIROSHITADA,KAZUTAKAAONUMA.Journal of Cardiovascular Electrophysiology.2012(2)

[4]Recent Clinical and Experimental Advances in Atrial Fibrillation[J].Shigeru Miyagawa,Taichi Sakaguchi,Hiroyuki Nishi,Yasushi Yoshikawa,Satsuki Fukushima,Shunsuke Saito,Yoshiki Sawa,C.Hassager,D.Leung,A.D.Szekely.ISRN Cardiology.2011

[5]鲍宏刚.谷氨酰胺诱导热休克蛋白70高表达可抑制大鼠心房纤维化及缝隙连接蛋白43重构[D].第四军医大学,2013.