人白细胞介素的应用

背景^[1-3]

人白细胞介素简称白介素，是指在白细胞或免疫细胞间相互作用的淋巴因子，它和血细胞生长因子同属细胞因子。两者相互协调，相互作用，共同完成造血和免疫调节功能。白细胞介素在传递信息，激活与调节免疫细胞，介导T、B细胞活化、增殖与分化及在炎症反应中起重要作用。

人白细胞介素是一种淋巴因子，可使细胞毒性T细胞、自然杀伤细胞和淋巴因子活化的杀伤细胞增殖，并使其杀伤活性增强，还可以促进淋巴细胞分泌抗体和干扰素，具有促进机体免疫反应等作用。

白细胞介素是由多种细胞产生并作用于多种细胞的一类细胞因子。由于最初是由白细胞产生又在白细胞间发挥作用，所以由此得名，现仍一直沿用。最初指由白细胞产生又在白细胞间起调节作用的细胞因子，现指一类分子结构和生物学功能已基本明确，具有重要调节作用而统一命名的细胞因子，它和血细胞生长因子同属细胞因子。

两者相互协调，相互作用，共同完成造血和免疫调节功能。白细胞介素在传递信息，激活与调节免疫细胞，介导T、B细胞活化、增殖与分化及在炎症反应中起重要作用。

白细胞介素interleukin缩写为IL，功能关系免疫反应的表达和调节，这种调节有来源于淋巴细胞或巨噬细胞等的许多因子参与。来源于淋巴细胞的有淋巴细胞活素，来源于巨噬细胞的总称为monokine，其中的各个因子的生物活性各有不同（例如巨噬细胞活化，促进T细胞繁殖等），因子自身的物理化学性质多不清楚。

应用^[4][5]

用于重组人白细胞介素1受体拮抗剂的鉴定及检验研究

通过经典方法对rIL-1ra各项质量控制指标进行鉴定及检验,并对其中DNA残余量检测进行初步改进,以及进行IL-1β对含有不同浓度rhIL-1ra小鼠T淋巴细胞瘤能量代谢活性影响的试验,为rhIL-1ra的鉴定及检验建立了提供试验依据。

方法：用SDS-聚丙烯酰胺凝胶法,对复性纯化后的rhIL-1ra进行分析并进行了West-Blotting免疫特异性分析试验。

通过反相HPLC分析法,对rhIL-1ra中试样品与对照品进行肽图结构分析,采用地高辛标记探针方法对rhIL-1ra中残余DNA进行检测,采用反相高效液相色谱法确定rhIL-1ra纯度,采用Lowry法测定rhIL-1ra,总蛋白量并通过ELISA法测定大肠杆菌宿主残余蛋白量,从而计算残余蛋白含量,采用ELISA法分别测定卡那霉素浓度,细菌内毒素浓度。

采用薄膜过滤法进行无菌试验的检测。采用豚鼠腹腔注射法对rhIL-1ra的异常毒性进行检测,为rhIL-1ra质量控制方法与质量标准的建立奠定了试验基础。

结果：对rhIL-1ra中试样品的进行了鉴定和检验。①理化鉴定：用SDS-聚丙烯酰胺凝胶法,对复性纯化后的rhIL-1ra进行分析,表观分子量为22kDa,与对照品分子量一致；但大于理论值并分析了其产生的主要原因。West-Blotting免疫特异性分析复性纯化rhIL-1ra与对照品一致。采用反相HPLC分析法,进行肽图结构分析rhIL-1ra样品与对照品,以此判定其一级结构完整性与一致性。

②含量及纯度检验：用采用反相高效液相色谱法检测纯度,rhIL-1ra样品纯度大于96%。

参考文献

[1]RP-HPLC separation and characterization of unknown impurities of a novel HIV-protease inhibitor Darunavir by ESI-MS and 2D NMR spectroscopy[J].Ramisetti Nageswara Rao,Bondigalla Ramachandra,Kondapalli Santhakumar.Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis.2013

[2]An HPLC-ESI-MS method for analysis of loureirin A and B in dragon’s blood and application in pharmacokinetics and tissue distribution in rats[J].Haiyan Zhao,Zilin Chen.Fitoterapia.2013

[3]SDS‐PAGE‐free protocol for comprehensive identification of cytochrome P 450 enzymes and uridine diphosphoglucuronosyl transferases in human liver microsomes[J].Liangliang Sun,Yanyan Zhang,Dingyin Tao,Guijie Zhu,Qun Zhao,Qi Wu,Zhen Liang,Ling Yang,Lihua Zhang,Yukui Zhang.Proteomics.2012(23-2)

[4]Simplified platelet sample preparation for SDS‐PAGE‐based proteomic studies[J].Zuzana Reicheltová,Pavel Májek,Tomá?Riedel,Ji?íSuttnar,Jan E.Dyr.Prot.Clin.Appl..2012(7-8)

[5]王超.重组人白细胞介素1受体拮抗剂的鉴定及检验[D].吉林农业大学,2013.