内皮素-1(抗体)的应用

背景^[1-3]

内皮素-1(抗体)是可以特异性结合内皮素-1的一类多克隆抗体，主要用于检测内皮素-1的Western Blot、IHC-P、IF、ELISA、Co-IP等多种免疫学实验。

检测原理：双抗体夹心法测定标本中内皮素-1水平。用纯化的内皮素-1抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入内皮素-1，再与HRP标记的内皮素-1抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的内皮素-1呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中内皮素-1浓度。

内皮素（endothelin，ET）不仅存在于血管内皮，也广泛存在于各种组织和细胞中，是调节心血管功能的重要因子，对维持基础血管张力与心血管系统稳态起重要作用。它是由21个氨基酸组成的多肽，分子量为2400D，N端是两个二硫键将1-15，3-11位置的半胱氨酸连接起来，C端是一些疏水性氨基酸的残基。N端结构决定其与受体的亲和力，C端结构决定其与受体的结合位置。ET-1另有两个同分异构体家族即ET-2，ET-3，其差别在于个别氨基酸的残基，对于心血管起主要作用的是ET-1。

内皮细胞受到刺激合成并释放ET-1，其调控主要在基因转录水平，刺激ET-1合成的因素包括：肾上腺素、血栓素、血管加压素、血管紧张素、胰岛素、细胞因子以及血管壁剪切力与压力的变化及缺氧等物理化因素，刺激ET-1合成的过程需要有Ca2+（依赖型蛋白激酶C（PKC）的参与。抑制ET-1合成的因素有：NO，PGI2，心房利钠肽及肝素等。ET-1在血浆中的半衰期很短（<5min），很快与组织上的受体结合，其清除部位主要在肺与肾脏，ET降解酶很快将其分解。

应用^[4][5]

用于内脂素对人脐静脉内皮细胞内皮素-1表达的影响及机制研究

脂素,也称为前B细胞克隆增强因子,是最近发现的一种新的脂肪因子,主要由内脏脂肪组织产生,具有类胰岛素活性,与肥胖及肥胖相关性疾病有关。

内脂素也是一种新的促炎症细胞因子,剂量依赖性上调人单核细胞IL-1β、IL-6和TNF-α表达,各种炎症性疾病血浆内脂素水平增高。

此外,内脂素还是一种新的血管炎症介质,可提高THP-1单核细胞MMP-9活性和外周血单核细胞TNF-α和IL-8水平,诱导内皮细胞分泌ICAM-1和VCAM-1,增强内皮细胞MMP-2和-9的活性。

在动脉粥样硬化形成和发展的过程中内脂素可能起了一定的作用,有症状患者的颈动脉斑块较无症状患者的颈动脉斑块的内脂素基因表达显著增强;冠心病患者,特别是急性冠脉综合征患者血浆内脂素水平显著增高。

内脂素定位于不稳定斑块富含脂质的泡沫巨噬细胞,可能在斑块不稳定过程中发挥重要作用。ET-1是内皮细胞分泌的迄今已知的作用最强的血管收缩肽,能够收缩血管,促进炎症反应,促有丝分裂和增殖,刺激自由基生成和激活血小板。内皮素(ET)-1与高血压、高胆固醇血症、动脉粥样硬化、糖尿病和冠心病等多种心血管疾病的内皮功能障碍有关。

血管内皮损伤刺激ET-1表达,触发内皮黏附、血管平滑肌细胞增殖,最终导致动脉粥样硬化形成。而内皮功能障碍是动脉粥样硬化和血管疾病发病的初期阶段,是心血管事件的独立预测因子。经典观点认为,内皮来源的舒张因子NO、前列环素和内皮依赖性超极化因子的生物利用度降低,引起血管舒张功能受损,导致内皮功能障碍。

参考文献

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[4]Serum Alkaline Phosphatase Negatively Affects Endothelium-Dependent Vasodilation in Na?ve Hypertensive Patients[J].Francesco Perticone,Maria Perticone,Raffaele Maio,Angela Sciacqua,Michele Andreucci,Giovanni Tripepi,Salvatore Corrao,Francesca Mallamaci,Giorgio Sesti,Carmine Zoccali.Hypertension.2015(4)

[5]李杰.内脂素对人脐静脉内皮细胞内皮素-1表达的影响及机制研究[D].中国医科大学,2018.