降钙素的使用说明及制备方法

背景及概述^[1-2]

降钙素(一个由32个氨基酸组成的多肽)是治疗骨质疏松的首选药之一，降钙素的优势是其抑制破骨细胞活性，减少破骨细胞数量，抑制骨吸收，降低骨转换，同时降钙素有中枢神经镇痛作用，能够缓解骨痛。降钙素的劣势是其半衰期过短，需要一天一次注射给药。另外，降钙素的在相当比例的患者中出现恶心、腹痛、手肿，注射部位出现风疹。顾忌副反应和患者顺应性，诺华公司开发了鲑鱼降钙素鼻喷剂(密钙息)，虽使患者免受注射之苦，但其生物利用度仅为3～5％，仍需每日给药，而且不能保持长效的血药浓度，无论从经济方面或疗效方面对患者来说都是不小的考验。

适应症^[3]

骨质疏松症：早期和晚期绝经后骨质疏松症。为了防止骨质进行性丢失，使用本品的患者必须根据需要给予足量的钙和维生素D。Paget氏骨病(变形性骨炎)高钙血症和高钙血症危象(由下列原因引起)：乳房癌、肺或肾癌、骨髓瘤和其它恶性肿瘤骨转移所致的大量的骨溶解；甲状旁腺机能亢进症、缺乏活动或维生素D中毒(包括急救和长期治疗)。痛性神经营养不良症或Sudeck氏病(神经营养不良性征候群)：常见病因和易患因素包括创伤后痛性骨质疏松症、神经反射不良症、肩-臂综合征、灼性神经痛、药源性神经营养不良征候群。

孕妇及哺乳期妇女用药^[3]

妊娠由于目前缺乏本品在妊娠妇女中的使用经验，故妊娠期妇女不能使用本品。动物试验证明本品无胚胎毒性和致畸潜在风险，而且鲑鱼降钙素不能通过动物的胎盘屏障。哺乳目前缺乏本品在哺乳期妇女中的使用经验，且鲑鱼降钙素是否可以进入乳汁尚不明确，故不推荐哺乳期妇女使用本品。

儿童用药^[3]

由于缺乏在儿童中长期使用本品的充分资料，所以除非医生认为有长期治疗的指征，一般治疗时间不要超过几周。

老年用药^[3]

在治疗老年患者的大量临床经验中没有发现老年人的耐受性降低，或需调整用药剂量的证据。同样适用于肝、肾功能损害的患者，尽管没有对这样特殊人群进行正式的研究。

药物过量^[3]

非肠道用药可出现与剂量有关的恶心、呕吐、面部潮红和头晕等症状，已经发现非肠道过量使用本品后出现恶心、呕吐的报道，迄今尚无因过量引起严重不良反应的报道。如果药物过量，应对症治疗。

药理作用^[3]

所有的降钙素结构相似，为一条由32个氨基酸组成的单链．其N-末端呈环状排列的7个氨基酸的排列顺序因物种不同而不同。由于鲑鱼降钙素与受体结合部位有很高的亲和力，所以比哺乳类降钙素的效果更好、作用时间更长。鲑鱼降钙素通过其特异性受体，抑制破骨细胞活性。在骨吸收率增加的情况下，如骨质疏松症时，它能明显降低骨转换至正常水平。已证明鲑鱼降钙素对动物模型和人类有止痛作用，可能是直接作用于中枢神经系统的结果。本品单剂量给药就可在人体内产生明显的临床生物学效应。用药后尿中钙、磷和钠(通过减少肾小管再吸收)的排泄增加，尿羟脯氨酸排泄显著下降。长期非肠道应用本品可致骨转换标志物如：胶原吡啶交联和骨碱性磷酸同工酶等明显降低。降钙素抑制胃和胰腺的分泌。由于这些特性，本品对急性胰腺炎的治疗有益。

毒理研究^[3]

已经在试验动物中进行了常规的长期毒性、对生殖的影响、致突变性和致癌性等研究。毒性试验中发现，鲑鱼降钙素的轻微作用是其药理作用引起的。本品无胚胎毒性、无致畸及致突变性的潜在风险。毒性及致癌性研究表明，当鼠暴露于低于临床剂量的鲑鱼降钙素时，其垂体瘤的发生率会增加。然而进一步的临床前期研究，尤其是鼠的致癌性研究发现垂体瘤的诱发是鼠特异性的，此试验给鼠的药物剂量大于人常规剂量50IU约760倍。目前在患者中也未发现与垂体瘤相关的不良反应。因此有充分的证据表明垂体瘤的诱发是鼠特异性的，并且鼠垂体瘤与本品的临床应用没有任何相关性。

制备^[4]

一种醋酸鲑降钙素的制备方法，包括以下步骤：用脱保护试剂将RinkAmideMBHA树脂脱保护，去Fmoc保护基团；以脱保护后的RinkAmideMBHA树脂为起始原料，以Fmoc保护的氨基酸为单体，依次耦联氨基酸，得到醋酸鲑降钙素肽树脂；其中，耦联第1、2、4～13、15～19、21、23、25和27～32位氨基酸时的缩合剂为N，N‑二异丙基碳二亚胺（N，N‑diisopropylcarbodiimide，DIC）/1‑羟基苯并三氮唑（1‑Hydroxybenzotriazole，HOBt）；耦联第3、14、20、22、24和26位氨基酸时的缩合剂为六氟磷酸苯并三唑‑1‑基‑氧基三吡咯烷基（Benzotriazol‑1‑yl‑oxytri pyrrolidino phosphonium hexafluoro phosphate，PyBOP）/HOBt；耦联第2～32位氨基酸之前，用所述脱保护试剂依次脱去上一位耦联产物的Fmoc保护基团；裂解所述醋酸鲑降钙素肽树脂，然后加入乙醚沉淀所述醋酸鲑降钙素肽树脂，得到还原型醋酸鲑降钙素粗肽；将所述还原型醋酸鲑降钙素粗肽环化得到氧化型醋酸鲑降钙素粗肽；将所述氧化型醋酸鲑降钙素粗肽纯化、转盐、浓缩和冻干得到醋酸鲑降钙素。

参考文献

[1]中国老年百科全书·生理·心理·长寿卷

[2]CN201310237886.7一种降钙素长效缓释微球及其制备方法和组合

[3]降钙素注射液说明书

[4]CN201310213820.4醋酸鲑降钙素的制备方法