莫匹罗星的纯化和制剂方法

背景及概述^[1]

莫匹罗星，化学式C26H44O9，分子量是500.63，也叫假单胞菌酸A，是由荧光假单胞菌发酵产生的一种天然广谱抗生素。

莫匹罗星对革兰氏阳性球菌的敏感度高，对某些革兰氏阴性球菌也有效，与其抗生素无交叉耐药性。目前在我国临床上莫匹罗星主要用于治疗由金黄色葡萄球菌和链球菌所致各种感染性皮肤病，包括：原发性皮肤感染，如脓胞疮、毛囊炎和疥疮等；继发性皮肤感染，如湿疹、异位性皮炎、皮肤溃疡、手术伤口、小面积烧伤、皮肤外伤；其他还可用于小伤口、切口以及其他灭菌性病损的预防感染。

纯化方法^[1][3]

报道一、

一种莫匹罗星的纯化方法，具体包括以下步骤：

(1)将2275ug/ml莫匹罗星发酵液60L用稀盐酸调节至pH2.5后，经过板框过滤除去莫匹罗星发酵液中的水溶性蛋白、色素等大分子物质，得到莫匹罗星菌渣；称量菌渣重量后，加入浓度为5％的碳酸氢铵溶液，体积(ml)为菌渣重量(g)的1.5倍，搅拌4小时后再进行板框过滤，进一步去掉色素等杂质，得到莫匹罗星滤液40L，含量为3345.72ug/ml；

(2)将莫匹罗星滤液一次纳滤浓缩，浓缩至浓缩液中的莫匹罗星含量为40g/L；

(3)将浓缩液用稀盐酸调pH为3.0进行一次结晶，经离心后得到莫匹罗星粗品115.34g；

(4)将莫匹罗星粗品加水溶解至10g/L，加入2％的氯化钠，再调pH为6.0，以1倍柱床的流速上柱，色谱柱为上海华震的HZ-806，上柱完水洗(体积为3倍柱床)，水洗完后用0.025％碳酸氢铵解吸，收集色谱纯度大于90％的解吸液，含有莫匹罗星103.00g；

(5)将莫匹罗星解吸合格液二次纳滤浓缩，浓缩至浓缩液中的莫匹罗星含量为40g/L；

(6)浓缩液用稀盐酸调pH为4.0进行二次结晶，经离心后得到莫匹罗星潮晶；

(7)将潮晶在温度55℃下真空干燥，真空为-0.092MPa，得到莫匹罗星成品88.61g，色谱纯度为99.4％。

报道二、

一种莫匹罗星的提纯方法，其包括以下步骤：

1)发酵液膜过滤：采用50nm孔径的陶瓷膜对莫匹罗星发酵液进行膜过滤固液分离，得到过滤液，过滤收率为95％。

2)滤液膜浓缩：在0-5℃下，将步骤1)得到的过滤液采用分子量200道尔顿纳滤膜进行膜浓缩，浓缩至浓缩液中莫匹罗星含量为50000-60000ug/mL；

3)溶剂萃取：采用乙酸丁酯对步骤2)得到的浓缩液进行萃取，得到含莫匹罗星的萃取液；所述乙酸丁酯的总加入体积为浓缩液体积的1倍，萃取收率为98％。

4)脱水剂脱水：在步骤3)得到的萃取液中加入脱水剂硫酸镁进行脱水，所述脱水剂硫酸镁的加入重量为萃取液重量的5％；脱水后萃取液含水量2％以下。

5)减压浓缩：将步骤4)得到的脱水萃取液在35℃下，真空度-0.20Mpa进行减压浓缩，得到莫匹罗星含量为200-250g/L的浓缩液；

6)结晶：将步骤5)得到的浓缩液降温至0℃进行搅拌23小时结晶；结晶收率为90％。

7)过滤:将步骤6)的结晶液进行离心过滤，离心转速为3600-3800rpm，得到所述莫匹罗星，得到的莫匹罗星含量98％，莫匹罗星回收率达85％以上。

制剂^[2]

一种莫匹罗星软膏，其原料按重量份包括：20份莫匹罗星，520份聚乙二醇3350，420份聚乙二醇400，1份维生素E，39份丙二醇。

上述莫匹罗星软膏的制备方法，包括如下步骤：

取配制罐于85℃保温干燥30min，然后向配制罐中加入聚乙二醇400，升温至70℃，加入聚乙二醇3350、丙二醇慢速搅拌使聚乙二醇3350融化澄清，降温至65℃得到溶液A；

将聚乙二醇400加入不锈钢桶中，再加入莫匹罗星、维生素E混匀得到混悬液B，其中，用聚乙二醇400润洗不锈钢桶2次得到润洗液，混悬液B包括润洗液；

于55℃将溶液A和混悬液B慢速搅拌25min混匀，然后降温至35℃，用胶体磨研磨3次，冷却至室温，罐装成5g/支得到莫匹罗星软膏，其中，溶液A中聚乙二醇400和混悬液B中聚乙二醇400的重量比为7：3。

参考文献

[1] [中国发明] CN201910866465.8 一种莫匹罗星的纯化方法

[2] [中国发明] CN201911302071.6 一种莫匹罗星软膏及其制备方法

[3] [中国发明] CN201811090901.9 一种莫匹罗星的提纯方法