小鼠睾丸支持细胞的应用

背景^[1-3]

小鼠睾丸支持细胞采用密度梯度离心法制备而来，细胞总量约为5×105/T25方瓶，3β-HSD呈阳性，细胞纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。支持细胞是为发育中的精子提供保护和营养的细胞，精子发育的各个阶段都是发生在支持细胞的表面。

支持细胞：位于曲细精管管壁上偏于基膜侧的部分，核呈椭圆形或三角形。染色淡，有明显的核仁。其细胞质位于各期生精细胞之间，故不易分辨其细胞界限。

支持细胞是位于生精细管中，具有营养生精细胞和调节生精细胞周期作用的体细胞。光镜下，细胞轮廓部不清核呈椭圆形，三角形或不规则形，染色较浅，核仁明显。电镜下，其侧面核顶部形成许多陷窝，其内嵌入各级生精细胞，胞质内可见丰富的滑面内质网，发达的高尔基复合体，较多的线粒体，溶酶体，微丝和微管。相邻细胞以侧面形成紧密连接。

支持细胞是位于生精细管管壁上，具体作用有以下几点:1.参与构成血睾屏障，保护精子不被破坏。2.可以促进精子产生和成熟。3.分泌雄激素结合蛋白，可与雄激素结合维持精子功能。4.可以吞噬发育不良的精子，保证精子的质量。5.分泌睾网液促进精子的排出，成熟的精子需要通过睾丸网运输到附睾内短暂存储。

小鼠睾丸支持细胞是睾丸间质中的主要细胞类型，能分泌多种生长因子和免疫抑制因子，不仅可为精子提供营养支持和免疫保护，也能对其他细胞，如胰岛和神经细胞提供营养支持，而且当其与胰岛或神经细胞共移植时，也能够为这些细胞提供免疫保护，提高植活率。因此，睾丸支持细胞在细胞移植中具有广泛的应用前景。

应用^[4][5]

用于环境雌激素对小鼠睾丸支持细胞的影响及分子机制的研究

环境雌激素(environmental estrogens),又称环境内分泌干扰物质(endocrine disruptors,EDs),是指一类存在环境中能干扰人或动物体内分泌系统并导致异常效应的物质。

环境雌激素对人类生存环境的损害正在日益成为人类面临的一个严峻问题。环境雌激素能够影响自然界生物包括人类的健康,导致各种疾病,它的影响是多方面的,其中对雄性生殖系统机能的危害最引人注目。

大量动物实验证明,EDs能够影响雄性生殖系统的发育和功能,但其作用机制非常复杂,尤其在分子机制方面目前不甚了解,另外环境雌激素存在较多种类,它们之间还具有协同作用,单独检测某一种环境雌激素活性可能会低估其潜在的危害性,这样就更增加了其危害作用及机理的复杂性,因此有必要对一些常见的环境雌激素进行混合性效应研究。

采用组合酶消化、选择性贴壁的方法,分离得到了高纯度的小鼠睾丸支持细胞;在DMEM培养基中添加不同浓度(10-9,10-7,10-5mol/L)的双酚A(bisphenol A,BPA)、大豆异黄酮(Soybean isoflavones)、BPA与大豆异黄酮的共同处理以及这两种环境雌激素分别与睾酮的混合,作用体外培养的小鼠睾丸支持细胞,然后用激光共聚焦显微镜检测细胞色素C(Cytochrome c,cyt C)和Bcl-2家族蛋白中Bax(Homo sapiens Bcl-2 associated protein)、Bcl-2(B-cell leulcemia-lymphoma 2)的表达变化。

参考文献

[1]Analysis of estrogens in environmental waters using polymer monolith in-polyether ether ketone tube solid-phase microextraction combined with high-performance liquid chromatography[J].Yi Wen,Bing-Sheng Zhou,Ying Xu,Shi-Wei Jin,Yu-Qi Feng.Journal of Chromatography A.2006(1)

[2]Serum Hormones in Boys Prenatally Exposed to Polychlorinated Biphenyls and Dibenzofurans[J].Ping-Chi Hsu,Te-Jen Lai,Nai-Wen Guo,George H.Lambert,Yueliang Leon Guo.Journal of Toxicology and Environmental Health,P.2005(17-1)

[3]In utero exposure to environmental estrogens and male reproductive health:a systematic review of biological and epidemiologic evidence[J].Alex C.Vidaeff,Lowell E.Sever.Reproductive Toxicology.2005(1)

[4]Cryptorchidism:an indicator of testicular dysgenesis?[J].Marko Kaleva,Jorma Toppari.Cell and Tissue Research.2005(1)

[5]刘姗姗.环境雌激素对小鼠睾丸支持细胞的影响及分子机制的研究[D].东北农业大学,2008.