药物对细胞的IC50检测的应用

简介^[1]

IC50 (half maximal inhibitory concentration)是指被测量的拮抗剂的半抑制浓度。它能指示某一药物或者物质(抑制剂)在抑制某些生物程序(或者是包含在此程序中的某些物质，比如酶，细胞受体或是微生物)的半量。在凋亡方面，可以理解为一定浓度的某种药物诱导肿瘤细胞凋亡50%，该浓度称为50%抑制浓度，即凋亡细胞与全部细胞数之比等于50%时所对应的浓度，IC50值可以用来衡量药物诱导凋亡的能力，即诱导能力越强，该数值越低，当然也可以反向说明某种细胞对药物的耐受程度。

利用噻唑兰(MTT)，透过细胞膜进入细胞内，活细胞线粒体中的琥珀脱氢酶能使外源性MTT还原为难溶于水的蓝紫色的甲臜（Formazan）结晶并沉积在细胞中，结晶物能被二甲基亚砜（DMSO）溶解，用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定其光吸收值，可间接反映细胞数量。

检测步骤^[1]

1、细胞接种：收到客户细胞后，我们会用细胞计数板计数细胞，得出细胞悬液浓度。计算出应稀释倍数，按MTT试剂盒要求在96孔板内接种相应浓度的细胞悬液；

2、细胞培养：然后在无菌恒温细胞培养箱内培养接种好的96孔细胞培养板，并实时观察细胞状态； 

3、药物处理并呈色：按不同浓度梯度加入药物作用细胞；

4、溶解，比色：加入MTT检测试剂，按操作要求孵育相应时间，在酶标仪内检测对照组和实验组的吸光值。并处理数据得出IC50结果。

主要参考文献

[1] 赵斌 葛金芳 黄晓晖 李俊；小议在MTT法测细胞增殖抑制率中IC50的计算方法。第十一届全国数学药理学学术会议