细胞转染服务的应用

原理^[1]

细胞转染是指将外源分子如DNA, RNA等等入真核细胞的技术。随着分子生物学和细胞生物学研究的不断发展,转染已经成为研究和控制真核细胞基因功能的常规工具。在研究基因功能、调控基因表达、突变分析和蛋白质生产等生物学试验中，其应用越来越广泛。因为不同的细胞在生理代谢及分裂上均存在差异,因此研究者将外源遗传物质导入细胞的过程中需要选择不同的方式。

方法^[1]

目前，将外源物质导入细胞的方法主要分为三大类: 1、脂质体(或是脂质体替代物)转染; 2、电转; 3、病毒感染。这三种方法互有优劣。脂质体或是脂质体替代物转染操作简便,价格低廉，但是对细胞毒性大。而且，有些细胞通过脂质体转染效率很低;电转操作方便快捷,但是需要专门]的仪器,对细胞损伤也比较大；病毒感染克服了前两者的劣势,感染效率高,对细胞毒性小，但是病毒前期包装需要大量的时间和精力。

操作流程^[1]

1、转染试剂的准备

a.将400ul去核酸酶水加入管中，震荡10秒钟，溶解脂状物。

b.震荡后将试剂放在-20摄氏度保存，使用前还需震荡。

2、选择合适的混合比例(1: 1 - 1: 2/脂质体体积: DNA质量)来转染细胞。在一个转染管中加入合适体积的无血清培养基。加入合适质量的MyoD或者EGFP的DNA,震荡后在加入合适体积的转染试剂，再次震荡。

主要参考文献

[1] 胡英，金一；阳离子膜融合脂质体的细胞转染机制及其保护作用。《中国药学杂志》