人血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)ELISA KIT的应用

背景^[1-3]

人血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)ELISA KIT采用双抗体夹心ABC-ELISA法。用抗人ANGPTL3单抗包被于酶标板上，标准品和样品中的ANGPTL3与单抗结合，加入生物素化的抗人ANGPTL3，形成免疫复合物连接在板上，辣根过氧化物酶标记的Streptavidin与生物素结合，加入底物工作液显蓝色，最后加终止液硫酸，在450nm处测OD值，ANGPTL3浓度与OD值成正比，可通过绘制标准曲线求出标本中ANGPTL3浓度。

血管生成素样蛋白3（angiopoietin-like protein 3，angptl 3）是血管生成素和血管生成素样蛋白家族成员，因其与该家族成员有共同的结构特征而得名，即氨基端与分泌相关的信号肽，介导同源寡聚体形成的螺旋样结构域，一段短的连接肽和羧基端介导配体活性的纤维蛋白原样结构域.Angptl 3是一种分泌蛋白，其mRNA主要在人、鼠的肝脏表达.目前研究表明angptl 3的生物学效应表现在两方面:调节血管生成和脂质代谢.它对血管生成的诱导作用较弱，而对脂质代谢的调节作用较显著，因而在心血管病领域受到极大关注。它主要在肝脏中表达，并具有血管生成素的特征结构，由信号肽，N末端卷曲螺旋结构域和C末端纤维蛋白原（FBN）样结构域组成。血管生成素样3蛋白中的FBN样域显示出结合α-5/β-3整联蛋白，这种结合诱导了内皮细胞的粘附和迁移。该蛋白也可能在调节血管生成中起作用。

应用^[4][5]

人血管生成素样蛋白3(ANGPTL3)ELISA KIT用于血管生成素样蛋白3（ANGPTL3）与高脂血症性急性胰腺炎的相关性研究。

构建稳定的高脂血症急性胰腺炎(hyperlipidemic acute pancreatitis,HLAP)大鼠模型。80只雄性SD大鼠随机被分为四组:正常组(n=20)、HL组(n=20)、SAP组(n=20)、HLAP组(n=20)。自制脂肪乳剂灌胃喂养大鼠2周构建HL动物模型,3.5%牛磺胆酸钠溶逆行胰胆管注射液诱发急性重症胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)。模型建立后观察各组大鼠一般情况,6小时后取各组大鼠血液及胰腺标本,测定大鼠血清甘油三脂、总胆固醇、淀粉酶含量,显微镜下对比观察大鼠胰腺组织的HE染色病理变化。结果HL组与HLAP组大鼠血清甘油三脂和胆固醇值较正常组与SAP组升高,差异均有统计学意义(p<0.05)。牛磺胆酸钠注射组大鼠血清淀粉酶量较正常组及HL组明显升高,差异有统计学意义(p<0.01),HLAP组血清淀粉酶显著低于SAP组,差异有统计学意义(p<0.05)。SAP组和HLAP组大鼠胰腺组织均出现严重炎症细胞浸润、出血、坏死,HLAP组坏死评分较SAP组升高,差异有统计学意义(p<0.05)。结论自制脂肪乳剂灌胃结合胆胰管逆行注射3.5%牛磺胆酸钠可成功诱导SD大鼠建立HLAP模型,HL可加重大鼠AP模型胰腺组织的病理损害。ANGPTL3在HLAP模型中表达及对HLAP的影响目的研究血管生成素样蛋白-3(angiopoietin like protein3,ANGPTL3)与高脂血症急性胰腺炎(hyperlipidemic acute pancreatitis,HLAP)相关性,并上调ANGPTL3表达,观察对大鼠HLAP的影响。型建立后观察各组大鼠一般情况,6小时后取各组大鼠血液、肝脏及胰腺标本,测定大鼠血清甘油三脂、总胆固醇、淀粉酶含量,实时荧光定量PCR检测肝脏Angptl3 m RNA表达量,ELISA法检测大鼠血清ANGPTL3浓度。显微镜下对比观察大鼠胰腺组织的HE染色病理变化。结果HL组和HLAP组大鼠肝脏的Angptl3 m RNA表达量与血清ANGPTL3蛋白浓度均高于正常组和SAP组,差异有统计学意义(p<0.05)。

参考文献

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