人尿蛋白(UP)ELISA KIT的应用

背景^[1-3]

人尿蛋白(UP)ELISA KIT应用双抗体夹心法测定标本中人尿蛋白(UP)水平。用纯化的人尿蛋白(UP)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入人尿蛋白(UP)，再与HRP标记的人尿蛋白(UP)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的人尿蛋白(UP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人尿蛋白(UP)浓度。尿内出现蛋白称为蛋白尿，也即尿蛋白。正常尿液中含少量小分子蛋白，普通尿常规检查测不出，当尿中蛋白增加，尿常规检查可以测出即为蛋白尿。蛋白尿是肾脏病的常见表现，全身性疾病亦可出现蛋白尿。

尿蛋白偏高是指尿液中的蛋白质含量偏高，蛋白质漏进尿液从尿道排出来形成了蛋白尿。尿蛋白越高说明肾脏滤过功能越差，这是衡量肾脏功能的重要指标。正常情况下，人体尿液里不含蛋白质或只含有微量蛋白质，但当肾脏发生病变时，随血液循环流动的蛋白质流经肾脏时，因为肾脏滤过功能的降低而使蛋白质“漏网”。尿蛋白偏高的原因考虑最多的应该是肾病，因为肾病最容易导致尿蛋白。正常的情况下，蛋白都会回吸收的，如果肾脏出现损伤的情况下，根据肾脏纤维化发展原则即肾脏纤维化开始启动，肾脏出现回吸收的功能下降，就会漏出一些蛋白，从而导致尿蛋白的产生，出现尿蛋白偏高。

应用^[4][5]

人尿蛋白(UP)ELISA KIT用于紫癜性肾炎患儿血清及尿液中骨膜蛋白表达水平及意义研究。

骨膜蛋白(periostin)与紫癜性肾炎(Henoch-Schonlein purpura nephritis,HSPN)之间的关系,以及血清、尿液中骨膜蛋白与肌酐、尿素、胱抑素C、24h尿蛋白定量、人尿微量白蛋白的相关性,采用ROC曲线评价血清、尿液中骨膜蛋白在紫癜性肾炎中价值,探讨血清及尿骨膜蛋白与紫癜性肾炎发生之间的关系。采用酶联免疫吸附实验(ELISA)测定研究对象血清及尿液中骨膜蛋白的水平。分别比较HSPN组、HSP组和正常对照组血清及尿骨膜蛋白的表达水平,并比较血清及尿骨膜蛋白与临床常用指标的相关性,采用ROC曲线评价骨膜蛋白对紫癜性肾炎的价值。

结果:1.HSPN组、HSP组、正常对照组血清骨膜蛋白平均浓度分别为(50.02±8.88)pg/ml,(41.68±8.26)pg/ml,(36.99±8.34)pg/ml,三组间差异具有统计学意义(F=18.081,P<0.001),两两之间比较:HSPN组与正常对照组、HSP组与正常对照组、HSPN组与HSP组比较,差异均有统计学意义(P<0.001、P<0.001、P<0.05)。2.HSPN组、HSP组、正常对照组尿骨膜蛋白平均浓度分别为(34.94±3.04)pg/ml,(31.75±1.91)pg/ml,(31.00±1.99)pg/ml。尿骨膜蛋白水平在三组间差异具有统计学意义(F=23.405,P<0.001),两两之间比较:HSPN组与正常对照组、HSPN组与HSP组相比,差异有统计学意义(P<0.001、P<0.001),HSP组与正常对照组相比,差异无统计学意义(P>0.05)。3.HSPN组尿骨膜蛋白与24小时尿蛋白定量(r=0.810,P<0.001)、人尿微量白蛋白呈正相关(r=0.735,P<0.001),与尿素、肌酐、尿酸、胱抑素C无相关性;HSPN组血清骨膜蛋白与人尿微量白蛋白呈正相关(r=0.396,P=0.030),与24小时尿蛋白定量、尿素、肌酐、尿酸、胱抑素C均无相关性。

参考文献

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[5]霍丽娇.紫癜性肾炎患儿血清及尿液中骨膜蛋白表达水平及意义[D].河北大学,2019.