D-δ-生育酚的分离提纯和制备

发布日期:2020/6/30 11:27:11

背景及概述^[1]

天然维生素E是一种混合物，主要由从母育酚衍生而来的四种生育酚同系物组成，包括d-α-生育酚、d-β-生育酚、d-γ-生育酚和d-δ-生育酚，它们都带有饱和的C16侧链，仅在苯环上甲基的数目和位置上存在差异。虽然它们结构极其相似，但生物活性却不相同，分别为d-α-生育酚>d-β-生育酚>d-γ-生育酚>d-δ-生育酚，而抗氧化性则是d-δ-生育酚最高。

分离提纯^[1]

称取20g的高含量混合生育酚浓缩液(所述高含量混合生育酚浓缩液通过制备获得，制备方法：以DD油为原料，通过分子蒸馏和离子交换吸附得到混合生育酚浓缩液，该混合生育酚浓缩液中生育酚的含量是30％)，加入20ml正己烷，加热至全溶，将生育酚溶液转移至装有200g硅胶的柱上方，使其缓慢流过硅胶柱，待所有溶液被完全吸附到硅胶柱上，加入1BV(柱体积)正己烷洗脱，然后改用0.5BV的3％四氢呋喃-正己烷混合洗脱液洗脱柱子，然后进一步提高混合溶剂的极性，加入0.5BV的8％四氢呋喃-正己烷混合洗脱液洗脱柱子；上述过程中，分段收集洗脱液，根据TLC检测结果合并具有相同组分的洗脱液，洗脱液脱除溶剂后得到富集d-δ-生育酚的浓缩液，共得浓缩液4.12g，其中总生育酚含量66.71％，d-δ-生育酚相对含量89.3％，收率91.01％；将该浓缩液溶解于4.5ml倍体积的乙醇溶液中，转移至碱性阴离子交换树脂柱上进行离子交换吸附，吸附完毕后用CO2进行解析，然后用乙醇洗脱得到解吸液，解吸液脱溶并经分子蒸馏后得到2.39g高含量d-δ-生育酚浓缩液，其中总生育酚含量93.6％，d-δ-生育酚相对含量93.83％，收率85.54％。

制备^[2]

将100g含40.5％的混合生育酚浓缩液加入到500ml95％乙醇中，冷析过滤后，常温下上树脂吸附柱(φ50mm*600mm)，内装填强碱性离子树脂，型号PA306S，粒径60-100目，树脂经过转型处理，树脂层高度300mm，树脂柱体积(BV)约为0.6L。上样吸附完毕后，用1.5L(2.5BV)95％乙醇冲洗树脂未吸附的洗杂，再用2.4L0.01-0.05mol/L的二氧化碳乙醇溶液解吸，收集流出液，回收溶剂并蒸馏后得到34.5g混合生育酚，其中总生育酚含量93.5％，d-δ-生育酚单体相对含量28.3％。然后再用1.2L0.15-0.2mol/L的二氧化碳乙醇溶液解吸，收集第二流出液，回收溶剂后得到6.4gd-δ-生育酚单体，其中总生育酚含量91.3％，d-δ-生育酚单体相对含量89.6％，总生育酚收率94.1％。