宋内氏1相诊断血清应用

背景^[1-3]

宋内氏1相诊断血清是一种志贺氏菌诊断血清，主要用于志贺氏菌的血清学鉴定实验。

血清学鉴定是采用含有已知特异性抗体的免疫血清（诊断血清）与分离培养出的未知纯种细菌或标本中的抗原进行血清学反应，以确定病原菌的种或型。该方法具有高效省时、特异性强、灵敏度高、适合大量样品检测等优点，但是检测过程中会经常出现假阳性反应、降低检测的灵敏度、制备抗血清的时间较长且利用该方法一次只能检测一种病毒。经典的血清学反应分三种类别：凝集反应、沉淀反应和补体结合反应。

志贺氏菌属有K和O抗原而无H抗原。K抗原是自患者新分离的某些菌株的菌体表面抗原，不耐热，加热100℃1小时被破坏。K抗原在血清学分型上无意义，但可阻止O抗原与相应抗血清的凝集反应。O抗原分为群特异性抗原和型特异性抗原，前者常在几种近似的菌种间出现；型特异性抗原的特异性高，用物区别菌型。根据志贺氏菌抗原构造的不同，可分为四群48个血清型（包括亚型）。

志贺氏菌属（Shigella Castellani）是一类革兰氏阴性短小杆菌，是人类细菌性痢疾最为常见的病原菌，主要流行于发展中国家，通称痢疾杆菌，耐寒，能在普通琼脂培养基上经过24小时生长，形成直径达2mm大小、半透明的光滑型菌落。无芽胞，无荚膜，无鞭毛，多数有菌毛。是人和灵长类动物的肠道致病菌，引起细菌性痢疾。

应用^[4][5]

用于免疫比浊分析结合免疫磁分离技术在福氏志贺菌自动快速定量检测中的初步应用

以SPA包被的磁珠和富含SPA的金黄色葡萄球菌分别与福氏志贺菌的多抗血清结合,制备福氏志贺菌特异的多抗磁珠和抗体致敏的金黄色葡萄球菌作为协同凝集试剂与免疫比浊试剂,利用免疫比浊分析结合免疫磁分离技术探索其在福氏志贺菌自动快速定量检测中的初步应用。

方法:1.复苏、转种福氏志贺菌F1a,经生化反应及血清学鉴定后,大量培养并灭活福氏志贺菌F1a作为免疫原,免疫日本大耳白兔制备多抗血清。

2. 磁珠包被SPA后再与多抗血清中的IgG偶联,适当固定后制成多抗免疫磁珠。以该磁珠捕获模拟标本的福氏志贺菌,接种MH平板37℃培养18-24h,菌落计数后计算免疫磁珠的特异富集作用。

3. 与商品化磁珠做对照实验,同时与经典的菌落计数比较。

4.富含SPA的金黄色葡萄球菌(No 1800株)经甲醛灭活后,与福氏志贺菌的多抗血清结合,制备特异抗体致敏的金黄色葡萄球菌,作为协同凝集试剂和自动定量检测的免疫比浊试剂。

参考文献

[1]Immunomagnetic separation and PCR detection of Listeria monocytogenes in turkey meat and antibiotic resistance of the isolates[J].F.S.Bilir Ormanci,I.Erol,N.D.Ayaz,O.Iseri,D.Sariguzel.British Poultry Science.2008(5)

[2]Resistance in Nonfermenting Gram-Negative Bacteria:Multidrug Resistance to the Maximum[J].John E.McGowan.The American Journal of Medicine.2006(6)

[3]Mechanisms of Antimicrobial Resistance in Bacteria[J].Fred C.Tenover.The American Journal of Medicine.2006(6)

[4]Efflux-mediated drug resistance in Gram-positive bacteria[J].Penelope N Markham,Alex A Neyfakh.Current Opinion in Microbiology.2001(5)

[5]肖敏.免疫比浊分析结合免疫磁分离技术在福氏志贺菌自动快速定量检测中的初步应用[D].第三军医大学,2009.