胎牛血清(北美特级)应用

背景^[1-3]

胎牛血清(北美特级)是用无菌穿刺FPS胎牛心血制得的特级血清，可以用于任何的细胞培养。血清是由血浆去除纤维蛋白而形成的一种很复杂的混合物，其组成成份虽大部分已知，但还有一部分尚不清楚，且血清组成及含量常随供血动物的性别、年龄、生理条件和营养条件不同而异。

血清中含有各种血浆蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生长因子、激素、无机物等，这些物质对促进细胞生长或抑制生长活性是达到生理平衡的。胎牛血清是品质最高的，因为胎牛还未接触外界，血清中所含的抗体、补体等对细胞有害的成分最少。

牛血清是细胞培养中用量的天然培养基，含有丰富的细胞生长必须的营养成份，常用于动物细胞的体外培养，具有极为重要的功能。

1.提供对维持细胞指数生长的激素，基础培养基中没有或量很少的营养物，以及主要的低分子营养物。

2.提供结合蛋白，能识别维生素、脂类、金属和其他激素等，能结合或调变它们所结合的物质活力。

3.有些情况下结合蛋白质能与有毒金属和热原质结合，起到解毒作用。

4.是细胞贴壁、铺展在塑料培养基质上所需因子来源。

5.起酸碱度缓冲液作用。

6.提供蛋白酶抑制剂，使在细胞传代时使剩余胰蛋白酶失活，保护细胞不受伤害。

应用^[4][5]

用于人胚神经干细胞体外分化的实验研究

对人胚神经干细胞在成人脑脊液中的分化，及抗坏血酸的对其定向诱导分化作用进行了初步研究，并探讨了其可能机制。

方法：将体外原代培养的人胚来源的神经干细胞置入含有正常成人脑脊液培养基(DMEM/F12+B27+30％CSF)使其分化，在分化的不同时间点对分化的细胞进行免疫细胞化学染色，计数产生的各类神经细胞的比例。将人胚中脑来源的神经干细胞体外长期培养，每隔5-7天传代一次。

取不同代数的神经干细胞，种植入含有血清分化培养基(DMEM／F12+B27+10％胎牛血清)中或种植入含一定浓度的抗坏血酸的分化培养基中(DMEM／F12+B27+10％胎牛血清+抗坏血酸)中，待其分化十天后，以免疫细胞化学方法观测其分化细胞中TH(+)细胞的比例。

结果：正常成人脑脊液能诱导人胚来源的神经干细胞分化成神经元，星型胶质细胞，少突胶质细胞，与其在胎牛血清中的分化相比，星型胶质细胞比例增多P＜0.05，而其他类型细胞比例无显著性差异。

参考文献

[1]Osteogenic differentiation of purified,culture-expanded human mesenchymal stern cells in vitro.Jaiswal N,Haynesworth S.E,Caplan A.I,et al.Journal of Cellular Biochemistry.1997

[2]Survival and differentiation of adult neuronal progenitor cells transplanted to the adult brain.Gage FH,Coates PW,Polmer TD,et al.Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America.1995

[3]Mesencephalic neural stem(progenitor)cells develop to dopaminergic neurons more strongly in dopamine-depleted striatum than in intact striatum.Nishino H,Hida H,Takei N,et al.Experimental Neurology.2000

[4]Ethical aspects of clinical neuroscience.Helmchen H.Nervenarzt.2000

[5]卞林.人胚神经干细胞体外分化的实验研究[D].苏州大学,2003.