BHK-21(仓鼠肾细胞)的应用

BHK-21(仓鼠肾细胞)背景^[1]

BHK-21 [C-13]的亲本细胞株是由IA-Macpherson和M-G.P-Stoker于1961年3月从1日龄的仓鼠建立的。随后84天连续培养，仅中断8天进行冻存。通过单细胞分离建立了13号克隆，即BHK-21 [C-13]。BHK-21 [C-13]细胞可用作转染宿主，用于表达包含选择及扩增标记的DNA的载体。

BHK-21(仓鼠肾细胞)的简介^[1]

名称：BHK-21 [C-13] (仓鼠肾成纤维细胞)

别称：BHK 21; BHK21; Baby Hamster Kidney-21; Baby Hamster Kidney 21; Baby Hamster Kidney from ltter No. 21;BHK

种属：仓鼠

年龄(性别)：1日龄

组织来源：正常肾

生长特性：贴壁细胞

细胞形态：成纤维细胞样

生物安全等级：1

生长培养基：MEM(PM150410)+ 10% FBS(164210-500)+ 1% P/S(PB180120)

推荐传代比例：1:3-1:4

推荐换液频率：2~3次/周

倍增时间：~12 hours

冻存条件：冻存液: 55%基础培养基+ 40%FBS+ 5%DMSO；温度:液氮

培养条件：气相:空气, 95%; CO₂, 5%;温度: 37°C

保藏机构：ATCC; CRL-6282

细胞传代^[1]

1.用75%酒精喷洒整个培养瓶消毒，将其平躺置于培养箱中进行1-3小时的缓冲，然后 置于无菌操作台，打开瓶口，将其中的培养液去掉,再往其中加入5-6ml新鲜培养基(以T25培养瓶为例)并置于细胞培养箱中培养,根据细胞生长状况及培养基颜色变化对其进行换液以及传代，-般2到3天换一次液；

2.待细胞长满瓶底面积80%-90%，需要对其进行传代，传代比例为1 :2到1:4；

3传代步骤:将0.25%胰酶-0.53 mM EDTA消化液置于37℃预热，倒掉培养瓶中的培养基，往培养瓶中加入3-5ml PBS, 轻晃洗涤后弃去。往瓶中加1-2 ml预热好的胰酶，置于37℃孵育消化，消化好后加入3ml完全培养基终止消化。用移液枪轻轻吹打瓶壁.上的细胞，使之完全脱落,然后收集细胞悬液，1200rpm离心3min, 弃上清，加入完全培养基重悬细胞，进行传代。

主要参考文献

[1] 武发菊 安芳兰 董文教 宋玉霞 董金杰 陈苗苗 刘学荣 牟克斌 黄银君；氨对幼仓鼠肾细胞(BHK-21)悬浮培养过程中生长代谢的影响。中国畜牧兽医学会生物制品学分会。