细胞苏木素伊红染色试剂盒的应用

背景^[1-3]

细胞苏木素伊红染色试剂盒综合了多种经典的HE染色方法，例如Harris法、Mayer法等，简化了操作步骤，缩短了操作时间，并且染色液内不使用汞、甲醇等有毒试剂。可以用于组织切片或培养细胞的染色。苏木素伊红染色后细胞核呈现蓝色，细胞浆呈现粉红色或红色。

苏木素染色(hematoxylin staining or haematoxylin staining)，也被称作苏木精染色，是最常用的组织和细胞的染色方法之一。无色的苏木素(hematoxylin)氧化后形成有醌环结构(quinoid ring)的氧化苏木素(hematein or haematein)，从而可以和三价的铝离子、铁离子等形成有颜色的带正电荷的复合物(如hematein-Al3+complexes)。氧化苏木素(也称氧化苏木精)和铝离子等形成有色的复合物的过程也被称为Dye Lake Formation。细胞核内基因组DNA的双螺旋结构中，双链上的磷酸基团向外，带负电荷，呈酸性，很容易与带正电荷的氧化苏木素复合物结合，从而形成细胞核染色。苏木素染色液有多种不同的配制方法，不同的方法可以把细胞核染色成不同深浅的蓝色或蓝紫色。

应用^[4][5]

用于动脉粥样硬化易损斑块发生机制、检测方法和干预措施的研究

动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)斑块破裂是急性心血管事件的主要病因。一般认为,具有薄纤维帽,大脂质核心及大量激活巨噬细胞的斑块不稳定,易于破裂。易损斑块的早期识别和干预对于急性心血管事件的预防具有十分重要的意义。组织病理学及免疫组织化学染色检查:应用β-半乳糖苷酶原位染色试剂盒使5μm冰冻切片lac Z显色,油红O使脂质染色;采用原位末端脱氧核苷酸转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL)检测测定斑块内细胞凋亡情况。

常规苏木素-伊红(H&E)染色,同时进行天狼猩红及Masson染色使胶原及平滑肌细胞显色,应用RAM-11及α-actin抗体分别测定检测斑块内巨噬细胞、平滑肌细胞的分布情况,应用P53及TNFα抗体检测斑块内P53及TNFα表达水平。连续切片H&E染色发现纤维帽断裂并腔内血栓形成诊断为斑块破裂。应用Image-Pro Plus 5.0图像分析系统测量病变部位斑块的纤维帽厚度、血管内膜-中层厚度(intima-media thickness,IMT),并计算纤维帽厚度/内膜-中层厚度的比值。

参考文献

[1]A Novel Feature-Tracking Echocardiographic Method for the Quantitation of Regional Myocardial Function[J].Bahar Pirat,Dirar S.Khoury,Craig J.Hartley,Les Tiller,Liyun Rao,Daryl G.Schulz,Sherif F.Nagueh,William A.Zoghbi.Journal of the American College of Cardiology.2008(6)

[2]Pathological mechanisms and dose dependency of erythrocyte-induced vulnerability of atherosclerotic plaques[J].Hui-li Lin,Xin-sheng Xu,Hui-xia Lu,Lei Zhang,Chang-jiang Li,Meng-xiong Tang,Hui-wen Sun,Yan Liu,Yun Zhang.Journal of Molecular and Cellular Cardiology.2007(3)

[3]Serum Soluble Lectin-Like Oxidized Low-Density Lipoprotein Receptor-1 Levels Are Elevated in Acute Coronary Syndrome:A Novel Marker for Early Diagnosis[J].Kazutaka Hayashida,Noriaki Kume,Takatoshi Murase,Manabu Minami,Daisuke Nakagawa,Tsukasa Inada,Masaru Tanaka,Akira Ueda,Goro Kominami,Hirofumi Kambara,Takeshi Kimura,Toru Kita.Circulation.2005(6)

[4]Effects of amlodipine and lisinopril on intima–media thickness in previously untreated,elderly hypertensive patients(the ELVERA trial)[J].Willem F Terpstra,Johan F May,Andries J Smit,Pieter Ade Graeff,Betty Meyboom-de Jong,Harry JGM Crijns.Journal of Hypertension.2004(7)

[5]张蕾.动脉粥样硬化易损斑块发生机制、检测方法和干预措施的研究[D].山东大学,2008.