人游离原卟啉(FEP)ELISA KIT的应用

背景^[1-3]

人游离原卟啉(FEP)ELISA KIT应用双抗体夹心法测定标本中人游离原卟啉(FEP)水平。用纯化的人游离原卟啉(FEP)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入游离原卟啉(FEP)，再与HRP标记的游离原卟啉(FEP)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的游离原卟啉(FEP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人游离原卟啉(FEP)浓度。

缺铁性贫血是最常见的营养性贫血，贫血的产生与血红蛋白合成有密切关系，在许多血液疾患时，影响血红蛋白合成障碍的关键往往是由于血红素形成受阻，常用诊断缺铁的实验室指标有血红蛋白（Hb）、血清铁蛋白（SF）、红细胞内游离原叶琳（FEP、FEP/Hb）、血清铁、总铁结合力、运铁蛋白饱和度等，而其中以SF、FEP、FEP/Hb更敏感可靠。FEP与铁是合成血红素的重要原料，缺铁时，大量原外琳不能与铁结合成血红，以游离形式积聚在红细胞内，FEP增高，因此测定FEP含量对判断有关疾病的发生、发展和转归以及采取相应的防治措施是有价值的。FEP是一种能发微弱荧光的物质，可用荧光分光光度法测定。

应用^[4][5]

用于缺铁患者中性粒细胞（PMN）呼吸爆发及有关因素的研究

缺铁（ID）可造成人体免疫功能损害，特别是细胞介导的免疫和中性粒细胞（PMN）的杀菌能力。由于PMN有许多含铁的酶以及与铁有关的功能，故ID对PMN的影响尤为引人注意。PMN杀菌时所涉及的髓过氧化物酶（MPO）和呼吸爆发均依赖铁，而且与乳铁蛋白（LF）结合的铁可催化Haber-Weiss反应，所生成的羟自由基（·OH）是有效的杀菌物质。

在既往的研究中，用化学发光法间接证明了ID时PMN活性氧的产生减少，但究竟哪一种活性氧受到影响尚不清楚。经生物化学法检测发现：缺铁患者PMN的MPO活性较正常对照明显降低，补铁后恢复，MPO活性与红细胞游离原卟啉（FEP）呈负相关，与EF呈正相关。确证缺铁时可使PMN中的这种含铁酶—MPO活性减低，从而可能影响杀菌活性物质的产生。经放射免疫法检测发现：缺铁患者的PMN内和血清LF与正常对照均无异，且与体内含铁量指标间均无相关性。

参考文献

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[5]王景文.缺铁患者中性粒细胞（PMN）呼吸爆发及有关因素的研究[D].中国协和医科大学,1993.