脂褐素染色液(LONGZIEHL-NEELSEN法)的操作方法

背景及概述^[1]

脂褐素是具有颗粒状的褐黄色色素，由含有脂肪的残存物和溶酶体消化物组成，被认为是由脂质和脂蛋白氧化产生的。脂褐素氧化过程是缓慢的、逐步发生的，因此色素会呈现出不同的染色反应、不同的颜色，形状和大小也变化不一。脂褐素可见于肝脏、肾脏、心肌、肾上腺、神经细胞与神经节细胞等，多分布在细胞核周围。由于脂褐素是由脂质和脂蛋白缓慢氧化逐步形成的，色素所处的氧化程度不同，可以用脂褐素染色液(LONGZIEHL-NEELSEN法)证实来验证色素是否是脂褐质。

其他常用的方法还有PAS法、Schmorl高铁-铁氰化物还原法、Gomori醛复红法、Masson-Fontana银法等。

操作步骤^[1]

1、处理载玻片。

2、组织固定，常规脱水包埋。

3、常规脱蜡至水。

4、组织切片裱贴于载玻片上。

5、载玻片入蒸馏水轻轻清洗。

6、入复红染色液加盖浸染，水浴或室温过夜。

7、自来水洗净。

8、入Long酸性分化液中分化，直至背景染色被去除。

9、流动自来水洗净。

10、入亚甲蓝染色液复染胞核。

11、入乙酸溶液轻轻清洗。

12、常规脱水，常规透明，合成树脂封片。

染色结果^[1]

脂褐素、蜡样物质：棕黑色。

细胞核蓝色：背景淡红紫或淡蓝色。

主要参考资料

[1]脂褐素染色液(LONGZIEHL-NEELSEN法)说明书