南美胎牛血清的使用注意事项

概述^[1]

胎牛血清是妊娠后期剖腹取出的胎牛血清。胎牛血清营养成分完全而丰富，代谢产物极少，微生物感染的可能性最小，品质最高，是组织细胞培养和病毒增殖时的重要营养来源。南美胎牛血清产地南美，采用全程封闭循环加工程序，在动物来源和原料采集，采用一次性使用除菌过滤系统，避免了不同批次之间的交叉污染风险。南美胎牛血清最终经过3次0.1mm过滤除菌，符合FDA211.72条例，pH值、渗透压、血红蛋白浓度、内毒素水平、总蛋白等多项指标检测合格，无细菌、真菌、支原体及病毒污染，具有高质量和高稳定性。

注意事项^[2]

1）如果不能短期内使用完毕，解冻后适当分装。血清结冰时体积会增加约10%，因此在分装血清时须使分装瓶预留一定体积空间，否则易导致分装瓶冻裂而发生污染。

2）热灭活是指56℃，30分钟加热已完全解冻的血清。加热过程中需有规则地摇晃均匀。热处理的目的是灭活血清中的补体(complement)。除非必须，一般不推荐对血清进行热处理。因为热处理会造成血清沉淀物显著增多，而且还会影响血清的质量。补体参与的反应有：细胞毒作用、平滑肌细胞收缩、肥大细胞和血小板释放组胺、增强吞噬作用、促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化等。

3）瓶装南美胎牛血清解冻需采用缓慢解冻法：把在-15~-40℃低温冰箱中保存的血清放入4℃冰箱中解冻约1天，待全部解冻后再分装。在解冻过程中每隔约2小时可轻轻摇晃均匀(尽量避免产生气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。切勿直接将血清从-20℃或更低温度进入37℃水浴解冻，这样因温度改变太大，容易造成蛋白质凝集而出现沉淀，从而使用血清的质量下降。

4）南美胎牛血清中的絮状沉淀物主要是解冻后血清中纤维蛋白及4℃长时间保存后血清中的脂蛋白变性造成的，这些絮状物不会影响血清本身的质量，可不用处理。如果必须要处理，可400g离心5分钟去除。但不宜过滤去除，因为絮状物可能阻塞滤膜。

5）经过热处理的血清中沉淀物会显著增多。有些沉淀物在显微镜下观察像“小黑点”，而且由于这些“小黑点”的布朗运动在显微镜下被放大，感觉是在游动，所以经常被误认为血清被微生物污染。通常这些小黑点不会影响细胞生长，但如果怀疑血清存在微生物污染，则应立即停止使用，更换另一批次的血清。可将适量血清用培养液稀释至10%浓度后培养1-3天，观察小黑点是否急剧增多，或取适量血清在LB平板上涂板培养观察是否产生菌落，以确定是否存在微生物污染。

6）请勿将南美胎牛血清在37℃放置过长时间，否则血清会逐渐变浑浊，同时血清中的有效成分也会逐渐失活而影响血清质量。

主要参考资料

[1] 农业大词典

[2] 南美胎牛血清使用说明