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GIBCO胎牛血清的使用注意事项

发布日期:2020/4/27 9:28:05

概述[1]

胎牛血清是妊娠后期剖腹取出的胎牛血清。胎牛血清营养成分完全而丰富,代谢产物极少,微生物感染的可能性最小,品质最高,是组织细胞培养和病毒增殖时的重要营养来源。GIBCO胎牛血清是Gibco原装进口产品分装而成,产地澳洲。GIBCO胎牛血清不仅适用于常规的细胞培养,更适合用于一些要求较高的细胞的培养。GIBCO胎牛血清使用非常便捷,用于常规的细胞培养时,溶解后直接倒入500ml的DMEM等细胞培养基中,混匀后即可使用。

Gibco是世界著名动物血清品牌,所有血源都是由美国农业部和欧盟所认证的无疯牛病区域的屠宰场所提供。Gibco血清凭借其优良的品质、极高的可靠性和良好的技术支持,赢得广大研究人员的信任。GIBCO胎牛血清从血液收集到最终产品检验和审核的每一个步骤,都采用专用设备和标准操作程序,保证高品质和各批次的一致性。所有操作符合GMP(GoodManufacturingPracticesforDrug)标准。

注意事项[2]

1)如果不能短期内使用完毕,解冻后适当分装。血清结冰时体积会增加约10%,因此在分装血清时须使分装瓶预留一定体积空间,否则易导致分装瓶冻裂而发生污染。

2)热灭活是指56℃,30分钟加热已完全解冻的血清。加热过程中需有规则地摇晃均匀。热处理的目的是灭活血清中的补体(complement)。除非必须,一般不推荐对血清进行热处理。因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量。补体参与的反应有:细胞毒作用、平滑肌细胞收缩、肥大细胞和血小板释放组胺、增强吞噬作用、促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化等。

3)瓶装GIBCO胎牛血清解冻需采用缓慢解冻法:把在-15~-40℃低温冰箱中保存的血清放入4℃冰箱中解冻约1天,待全部解冻后再分装。在解冻过程中每隔约2小时可轻轻摇晃均匀(尽量避免产生气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生。切勿直接将血清从-20℃或更低温度进入37℃水浴解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀,从而使用血清的质量下降。

4)GIBCO胎牛血清中的絮状沉淀物主要是解冻后血清中纤维蛋白及4℃长时间保存后血清中的脂蛋白变性造成的,这些絮状物不会影响血清本身的质量,可不用处理。如果必须要处理,可400g离心5分钟去除。但不宜过滤去除,因为絮状物可能阻塞滤膜。

5)经过热处理的血清中沉淀物会显著增多。有些沉淀物在显微镜下观察像“小黑点”,而且由于这些“小黑点”的布朗运动在显微镜下被放大,感觉是在游动,所以经常被误认为血清被微生物污染。通常这些小黑点不会影响细胞生长,但如果怀疑血清存在微生物污染,则应立即停止使用,更换另一批次的血清。可将适量血清用培养液稀释至10%浓度后培养1-3天,观察小黑点是否急剧增多,或取适量血清在LB平板上涂板培养观察是否产生菌落,以确定是否存在微生物污染。

6)请勿将南美胎牛血清在37℃放置过长时间,否则血清会逐渐变浑浊,同时血清中的有效成分也会逐渐失活而影响血清质量。

主要参考资料

[1]农业大词典

[2] GIBCO胎牛血清使用说明

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