布氏肉汤的用途和应用研究

背景^[1-3]

布氏肉汤是制备培养基的原料，用于布鲁氏菌培养以及弯曲菌分离和动力试验。

布鲁氏杆菌（Brucella）是一种革兰氏阴性的不运动细菌，无荚膜（光滑型有微荚膜），触酶、氧化酶阳性，绝对嗜氧菌，可还原硝酸盐，细胞内寄生，可以在很多种家畜体内存活。布鲁氏杆菌会引起布鲁氏杆菌病，简称布病，它是一种人畜共患的慢性传染性疾病，危害较大。一般来讲，布鲁氏杆菌各个种的形态几乎一样，染色后在普通光学显微镜下呈微小的球状、球杆状和卵圆形。羊布鲁氏杆菌以球形和卵圆形多见，大小约0.3~0.6um。其他种布鲁氏杆菌多呈球杆状或短杆状，比羊布鲁氏杆菌也大些，约在0.6~2.5μm之间。涂片标本上无特殊排列，常单个存在，极少见到呈两个相连或短链排列。无鞭毛不运动，无菌毛，不形成芽胞，毒力菌株有菲薄的微荚膜，多数人认为该菌也无荚膜。空肠弯曲菌（Campylobacter jejuni）菌体轻度弯曲似逗点状，长1.5～5μm,宽0.2～0.8μm。

菌体一端或两端有单鞭毛，运动活泼，在暗视野镜下观察似飞蝇。无荚膜，不形成芽胞。微需氧菌，在含2.5%-5%O2或10%CO2的环境中生长。最适生长温度37℃-42℃。该菌抵抗力不强，易被干燥、直射日光及弱消毒剂所杀灭，对低温敏感，室温下(20℃-23℃)很快死亡，在30℃以下不繁殖。空肠弯曲菌属于螺菌科，弯曲菌属，该属包括空肠弯曲菌、胎儿弯曲菌、大肠弯曲菌、海鸥弯曲菌、简明弯曲菌、痰液弯曲菌等，其中空肠弯曲菌包括空肠亚种和多氏亚种，胎儿弯曲菌包括胎儿亚种和性病亚种。

对人类致病的主要是空肠弯曲菌和胎儿弯曲菌胎儿亚种。前者是人类腹泻最常见的病原菌之一，后者在免疫功能低下时可引起败血症、脑膜炎等。

应用^[4][5]

用于空肠弯曲菌致豚鼠不同时间段周围神经病理损伤的研究

通过经消化道感染空肠弯曲菌(Campylobacter jejuni,C.jejuni),构建豚鼠周围神经损伤模型。2观察豚鼠经消化道感染空肠弯曲菌后,不同时间段内周围神经的病理损伤有何差异,从而为建立空肠弯曲菌相关的周围神经病的动物模型提供参考依据。方法1制备空肠弯曲菌菌悬液选取自AMAM型GBS患者粪便中分离、培养的空肠弯曲菌lulei株,经中国和美国疾病预防控制中心鉴定为空肠弯曲菌。将该菌在42℃微需氧条件下(10%CO2、5%O2、85%N2)培养24小时后传代至哥伦比亚血平板培养基上,培养24小时,并连续传至第3代纯化菌株。并经革兰氏染色、马尿酸水解实验以及分子生物学进行细菌鉴定后,收取菌株制备成浓度为3×109CFU/ml的菌悬液。2实验动物分组购买SPF级4周龄Hartley豚鼠55只,饲养一周。按照体重、体重增长速度及毛色等条件筛选出50只健康豚鼠。将筛选出的50只健康豚鼠,随机分为布氏肉汤组A(10只)、空白对照组B(10只)、实验组E(30只)。根据不同的解剖时间(末次灌喂后第1、2、3、4、5周)将布氏肉汤组和对照组再次随机分成5个亚组(各2只),布氏肉汤组A分别标记为A1、A2、A3、A4、A5;空白对照组B分别标记为B1、B2、B3、B4、B5;根据不同的解剖时间(末次灌喂后第1、2、3、4、5周)将实验组30只豚鼠再次随机分为5个亚组(各6只),分别标记为E1、E2、E3、E4、E5组。若豚鼠出现瘫痪等明显的临床症状,因实验组的干预处理是统一的,可以将发生瘫痪的豚鼠合并为一组,标记为实验组T。筛选后余下的5只豚鼠继续饲养,设为备用对照组,其中3只处理同布氏肉汤组,2只同空白对照组。

参考文献

[1]Guillain-Barrésyndrome associated with preceding hepatitis E virus infection[J].Bianca van den Berg,Annemiek A.van der Eijk,Suzan D.Pas,Jeremy G.Hunter,Richie G.Madden,Anne P.Tio-Gillen,Harry R.Dalton,Bart C.Jacobs.Neurology.2014(6)

[2]Axonal Guillain-Barrésyndrome:concepts and controversies[J].Satoshi Kuwabara,Nobuhiro Yuki.Lancet Neurology.2013(12)

[3]Hepatitis E and Guillain-BarréSyndrome[J].Corine H.GeurtsvanKessel,Zhahirul Islam,Quazi D.Mohammad,Bart C.Jacobs,Hubert P.Endtz,Albert D.M.E.Osterhaus.Clinical Infectious Diseases.2013(9)

[4]The demyelination neurophysiological criteria can be misleading in Campylobacter jejuni-related Guillain–Barrésyndrome[J].Norito Kokubun,Nortina Shahrizaila,Michiaki Koga,Koichi Hirata,Nobuhiro Yuki.Clinical Neurophysiology.2013(8)

[5]杨静.空肠弯曲菌致豚鼠不同时间段周围神经病理损伤的研究[D].河北医科大学,2015.