快速硫化氢试验琼脂的用途和应用研究

背景^[1-3]

快速硫化氢试验琼脂是弯曲杆菌的硫化氢试验的鉴定培养基。原理弯曲杆菌可分解培养基中含硫氨基酸或含硫化合物，而产生硫化氢气体，硫化氢遇铅盐或低铁盐可生成黑色沉淀物。

快速硫化氢(H2S)试验琼脂是将布氏杆菌肉汤、无水磷酸氢二钠、无水磷酸二氢钾、琼脂加热溶解，高压灭菌，121℃15min。加入10%硫酸亚铁(含7H2O)，10%偏亚硫酸氢钠，10%丙酮酸钠制得。弯曲菌病是一种人畜共患性疾病。野生动物、家畜及宠物都是弯曲菌的重要宿主，许多国家已经从猪、牛、绵羊、鸡、鸭、鸽子的肠道中检出较高的带菌率。感染的动物通常无明显病症，但可长期向外界排菌，从而引起人类感染。

应用^[4-5]

用于空肠弯曲杆菌的分离鉴定及其生物膜形成的研究

空肠弯曲杆菌对食品安全和人类以及动物健康形成了很大的威胁,感染此菌可引发的细菌性肠炎、动物腹泻和流产,或诱发人类神经系统疾病等。事实证明空肠弯曲杆菌在传播过程中由于受到生存环境的压力,多以生物膜形式存在,但是国内尚无关于空肠弯曲杆菌生物膜建立及其生物膜耐药性方面的研究。为证实空肠弯曲杆菌生物膜的存在,并探讨实验室条件下体外构建空肠弯曲杆菌生物膜的方法,以及对比浮游型细菌与生物膜菌的耐药情况,本实验首先根据国标GB/T4789.28-2003、SNO175-92对由猪盲肠内容物分离出的可疑菌进行常规生化检测,初步鉴定的阳性菌样进一步进行PCR定性检测；然后采用试管法对分离菌和标准菌在不同环境因素下进行生物膜形成能力的检测,探究不同气体成份、温度、pH和培养基对空肠弯曲杆菌生物膜形成的影响；其次,以不锈钢针、盖玻片、医用输液管为载体,构建空肠弯曲杆菌的体外模型,通过光学显微镜和扫描电镜(SEM)观察在三种载体上生物膜形态：最后,以标准菌为质控菌,采用美国临床实验室标准协会(CLSI)推荐的肉汤稀释法检测分离菌对8种抗生素的耐药性,同时根据ASTM E2799-2011通过卡尔加里生物膜发生装置(MBEC)对分离得到的空肠弯曲杆菌生物膜进行药物敏感性研究。

参考文献

[1]Living on a surface:swarming and biofilm formation[J].Natalie Verstraeten,Kristien Braeken,Bachaspatimayum Debkumari,Maarten Fauvart,Jan Fransaer,Jan Vermant,Jan Michiels.Trends in Microbiology.2008(10)

[2]Control of Flow-Generated Biofilms with Surfactants[J].Food and Bioproducts Processing.2006(4)

[3]Adsorption of a biosurfactant on surfaces to enhance the disinfection of surfaces contaminated with Listeria monocytogenes[J].T.Meylheuc,M.Renault,M.N.Bellon-Fontaine.International Journal of Food Microbiology.2006(1)

[4]Environmental survival mechanisms of the foodborne pathogen Campylobacter jejuni[J].C.Murphy,C.Carroll,K.N.Jordan.Journal of Applied Microbiology.2006(4)

[5]张蕾.空肠弯曲杆菌的分离鉴定及其生物膜形成的研究[D].东北农业大学,2012.