土曲霉酮的应用

背景^[1-3]

土曲霉酮是一种化学物质，无色针状晶体(由乙醚或丙酮重结晶)。熔点127 C.易溶丁水、乙醇，难溶于乙醚、丙酮、氯仿、苯，不溶于石油醚。

水溶液中加稀氢氧化钠液呈黄色，久置之变棕，可使菲林氏液氨化硝酸银液还原。存在于土曲霉培养液中。将菌种在恰佩克一道克斯培养基中培养后，滤除菌体，以盐酸使母液呈酸性，将此时产生的沉淀过滤、浓缩;将乙醚萃取物以重结晶法精制即得。用于阻止革兰氏阳性菌、阴性菌及霉菌发育。

土曲霉酮可以从由土壤中分离的青霉菌sp菌株的肉汤培养基中分离出来。具体而言，在500mlErlenmeyer烧瓶中，以140rpm的转速将青霉菌spF020135(一种从土壤中分离出的真菌菌株)在100ml酵母-麦芽提取物(YM)介质上在28℃培养8天。

使用滤纸将细胞和培养液彼此分离，将细胞置于等量丙酮中，放置过夜。用滤纸过滤除去细胞，减压浓缩得到丙酮提取物。将丙酮提取物和培养液置于等量乙酸乙酯中，进一步提取。减压浓缩混合物，得到乙酸乙酯提取物。通过硅胶柱色谱从制备的乙酸乙酯提取物得到馏份。首先，制备20：1的CHCl3和甲醇的混合溶剂，用于洗脱。逐渐提高混合溶剂中的甲醇含量，以提高极性，直到比例达到1∶1。在得到的馏份中，选择表现出黑色素生物合成抑制活性的那些馏份。使用100％甲醇溶剂饱和的交联葡聚糖LH-20柱色谱纯化得到的馏份。此时，甲醇用作洗脱溶剂，仅收集活性馏份，以得到土曲霉酮化合物。

应用^[4]

用于冈村凹顶藻内生真菌单培养和共培养次级代谢产物的化学多样性及其生物活性研究

天然产物是新药研发的重要资源,海洋真菌具有十分多样和特殊的生存环境,代谢途径独特,是天然产物研究不可或缺的一部分。而另一方面,在天然产物研究中,已知化合物的重复分离和新化合物发现几率的降低成为一个普遍性问题,针对这一问题,微生物共培养策略在天然产物研究中逐渐受到重视,在海洋真菌次级代谢产物研究中的应用逐渐增多,是发掘海洋真菌次级代谢潜力的有效途径。

通过对冈村凹顶藻内生真菌的分离和筛选,综合分析菌株代谢产物生物量、生物活性以及TLC和HPLC分析等指标,选择了Talaromyces islandicus EN-501,Cladosporium cladosporioides EN-399和Aspergillus terreus EN-539三株真菌进行单培养代谢产物研究,选择开展了C.cladosporioides EN-399与Bacillus subtilis MA-288共培养、A.terreus EN-539与Paecilomyces lilacinus EN-531共培养探索并对其共培养代谢产物进行了研究。综合利用多种色谱方法和波谱技术分离鉴定了66个化合物,包括17个新化合物,结构类型包括还原型蒽醌类、二苯甲酮类、氧杂蒽酮类、枝孢菌素类、混源萜类和土曲霉酮等。

参考文献

[1] 聂影影.抗阿尔茨海默症相关活性海藻和海洋真菌的筛选及其次级代谢产物的研究[D].广东海洋大学,2017.

[2] 韩娜.车前草内生真菌次级代谢产物及其活性的研究[D].兰州理工大学,2018.

[3] 班万里.两株链霉菌次生代谢产物的分离鉴定及其拒霉素抑菌活性研究[D].塔里木大学,2015.

[4] 李洪雷.冈村凹顶藻内生真菌单培养和共培养次级代谢产物的化学多样性及其生物活性研究[D].中国科学院大学(中国科学院海洋研究所),2017.