Β-AMYLOID(1-9)肽的应用

背景^[1-3]

Β-AMYLOID(1-9）肽是由淀粉样前体蛋白(amyloid precursor protein，APP)经β-和γ-分泌酶的蛋白水解作用而产生的含有1～9个氨基酸的多肽。Aβ的沉积不仅与神经元的退行性病变有关，而且可以激活一系列病理事件，包括星型胶质细胞和小胶质细胞的激活、血脑屏障的破环和微循环的变化等，是AD病人脑内老年斑周边神经元变性和死亡的主要原因。

在正常的生理状态下，Aβ在血液和脑脊液中都能被检测出。Aβ的浓度主要受以下几个因素的影响:①APP的代谢调节;②Aβ的清除和跨血脑屏障运输;③Aβ蛋白酶降解作用;④Aβ的寡聚化;⑤Aβ结合蛋白与Aβ的结合和分离能力。Aβ可被多种肽酶降解，最主要的是两种锌依赖性金属内切蛋白酶:脑啡肽酶和胰岛素降解酶。Aβ的清除还依赖于机体的免疫机制。外周的Aβ抗体(IgG)可通过浸透运输至脑内，与Aβ结合形成免疫复合物，激活小胶质细胞，以清除Aβ沉积。另外，Aβ抗体/Aβ免疫复合物还能通过新生儿Fc受体跨血脑屏障运输至外周血中。Aβ与其结合蛋白的相互作用亦能调节其代谢过程，减少Aβ聚集，促进其清除和降解。Aβ的自然属性使它能与多种蛋白结合，在血浆中Slrp1、白蛋白、α1抗胰凝乳蛋白酶、血清淀粉样蛋白P成分、脂蛋白等均能与Aβ结合。

应用^[4][5]

用于高血压性脑白质损害大鼠认知功能减退及脑内β-淀粉样蛋白沉积的观察研究

脑白质损害(white matter lesions,WML)在中老年人群中具有极高的患病率,大量临床研究已表明WML会引起认知功能障碍,并明显增加认知障碍及痴呆的发病风险。随着全球社会人口构成的老龄化,认知障碍疾病对人群造成的健康影响日益突出,WML导致的认知障碍逐渐成为当今的研究热点,然而其中的发病机制尚未完全阐明。β淀粉样蛋白(β-amyloid,Aβ)是阿尔茨海默病脑内主要病理标志性蛋白之一。

近期有多项临床研究表明脑脊液或血浆Aβ改变与WML密切相关。但由于临床研究的局限性,无法直接观察WML脑内Aβ异常沉积情况。高血压是WML的重要危险因素已得到了广泛认可,高血压大鼠模型也被越来越多的用于WML的研究当中。以易卒中型肾血管性高血压大鼠构建高血压性脑白质损害模型,初步观察高血压性WML大鼠认知功能减退及脑内Aβ异常沉积的情况,以期为高血压性WML及其所致认知障碍的防治提供一种新思路。

方法:1.采用雄性Sprague-Dawley大鼠,经“双肾双夹”法制备易卒中型肾血管性高血压大鼠模型。将受试大鼠随机分为空白对照组、假手术组和高血压模型组,每组再根据造模时间点不同分为术前、术后4周、术后8周、术后12周、术后16周5个亚组,比较分析各组受试大鼠尾动脉收缩压。2.通过Morris水迷宫试验评估假手术组和高血压模型组大鼠运动、学习和视觉空间记忆等认知行为改变。3.利用HE染色观察假手术组和高血压模型组大鼠前额叶、颞叶、海马、胼胝体等脑区神经元细胞数量改变;LFB髓鞘染色观察胼胝体和侧脑室周围白质神经髓鞘改变;免疫组化染色观察海马和胼胝体区星形胶质细胞数量改变。4.运用免疫组化染色观察假手术组和高血压模型组大鼠脑内Aβ的聚集;酶联免疫吸附试验检测海马区Aβ1-42的浓度;Western Blot检测海马和胼胝体区Aβ生成相关蛋白APP、BACE1的表达水平。

参考文献

[1]Neurological dysfunctions associated with altered BACE 1‐dependent Neuregulin‐1 signaling[J].Xiangyou Hu,Qingyuan Fan,Hailong Hou,Riqiang Yan.J.Neurochem..2016(2)

[2]BACE1 physiological functions may limit its use as therapeutic target for Alzheimer’s Disease[J].Soraia Bar?o,Diederik Moechars,Stefan F.Lichtenthaler,Bart De Strooper.Trends in Neurosciences.2016

[3]Amyloid cascade hypothesis:Pathogenesis and therapeutic strategies in Alzheimer’s disease[J].Sagar H.Barage,Kailas D.Sonawane.Neuropeptides.2015

[4]Axonal autophagosomes use the ride-on service for retrograde transport toward the soma[J].Xiu-Tang Cheng,Bing Zhou,Mei-Yao Lin,Qian Cai,Zu-Hang Sheng.Autophagy.2015(8)

[5]江东东.高血压性脑白质损害大鼠认知功能减退及脑内β-淀粉样蛋白沉积的观察[D].广西医科大学,2018.