蓝靛果提取物的主要应用

背景及概述^[1]

蓝靛果忍冬（LoniceraedulisL.）别称蓝靛果、黑瞎子果、山茄子等。为忍冬科忍冬属落叶灌木。主要分布于欧洲、亚洲和美洲北部，在中国主要分布于东北、华北、西北及西南的四川等地，东北的大、小兴安岭和长白山地区的野生资源贮量。生于落叶松林下或针叶林带山沟、湿地、河岸、沼泽灌丛中。果实为蓝紫色小浆果，蓝靛果提取物除了含有维生素、氨基酸、矿物质等营养物质，还富含多酚、黄酮、花色苷等对人类健康具有促进作用的活性物质，使其具有较高的药用价值和保健功能，成为继越橘、树莓、黑穗醋栗等之后又一新兴的小浆果树种。最近研究表明，食用各种浆果可以改善人体健康状况，包括减少癌症，改善高血糖和提高胰岛素水平，改善神经认知功能等多种保健功能。蓝靛果可以取代蓝莓作为一种新兴的超级水果。由于其具有多种保健药理功能而备受研究者的关注。

应用^[1-2]

1. 抗氧化功能

随着自由基医学研究的深入，人们越来越关注各种自由基对机体造成的损伤。现代医学研究也越来越多地证明自由基与许多生命现象有关，如细胞的衰老、癌症的发生、动脉硬化、运动损伤等。目前常用的自由基清除剂有维生素E、抗坏血酸和中草药及其他植物提取物等。随着合成抗氧化剂的禁用，从植物中寻找天然的抗氧化剂已成为当今研究的热点。体外、体内试验研究表明，蓝靛果具有很强的抗氧化活性，是天然抗氧化剂的优良原料。研究表明，采用65%乙醇为提取剂，微波提取得到的蓝靛果红色素具有清除DPPH自由基的能力。研究表明蓝靛果提取物对DPPH自由基的清除率达到85%，比番茄（平均为43%）、沙棘（74%）、和Vc（平均为51%）的清除率均要高。Zhaoetal[13]研究表明蓝靛果纯化物清除DPPH自由基的能力（EC50＝30μg/mL）要高于笃斯越橘（EC50＝35μg/mL）和红树莓（EC50＝35μg/mL）。蓝靛果提取物的总抗氧化能力也高于笃斯越橘和红树莓。研究表明蓝靛果酚类提取物115μg多酚/mL对超氧自由基的清除率达到50％。对蓝靛果提取物清除体外自由基的效果以及抗猪油、抗脂质过氧化反应进行了评价，结果表明，蓝靛果提取物除了对羟自由基、超氧自由基、DPPH自由基具有一定清除作用，且与浓度呈量效关系，清除效果明显优于对照的Vc、VE，并且蓝靛果提取物抗猪油过氧化效果明显。

研究不同品种的蓝靛果忍冬果实中酚类物质对各种自由基的清除能力，结果表明不同野生型品种和选育品种均具有很强的抗氧化能力，并且对不同野生型品种和选育品种超氧阴离子和羟自由基的抗氧化能力不同，从而通过果实的抗氧化能力来优化选育品种。研究表明，花色苷类物质是蓝靛果中主要的抗氧化活性物质。对蓝靛果果渣花色苷提取动物体内实验研究表明，蓝靛果果渣花色苷提取物可提高肥胖大鼠SOD、GSH-Px活性，防止脂质过氧化产物产生。大量的研究结果表明，机体会通过酶系统和非酶系统产生自由基，而非酶系统产生的自由基会攻击生物膜的多不饱和脂肪酸产生脂质过氧化产物如MDA等，引起细胞损伤。而MDA等与低密度脂蛋白（LDL）结合成MDA-LDL复合物，该复合物可使细胞内胆固醇堆积并转变为泡沫细胞，形成动脉粥样硬化早期病变；还可能对胆固醇酯酶活性的抑制，也有助于TC的沉积，促进动脉粥样硬化的形成和发展。脂质过氧化会导致心血管疾病，如动脉粥样硬化。研究表明18.5%的蓝靛果酚类花色苷提取物对肝微粒体脂质过氧化有抑制作用（IC50=160±20μg/mL）。综合研究结果表明蓝靛果提取物可以可有效减少肝脏过氧化损伤，预防动脉硬化的发生。

2. 蓝靛果的调节血脂功能

高血脂及其引发的动脉粥样硬化是心脑血管疾病的重要诱因，其发病率和死亡率在全球范围内呈现逐渐增高的趋势。目前市场上的降脂产品，大多数具有副作用或降脂效果不明显。研发具有降血脂功能的天然药物或通过日常饮食调节来预防和治疗心脑血管疾病具有十分重要的意义。研究表明蓝靛果乙酸乙酯提取物能降低高脂大鼠甘油三酯含量、并能提高密度脂蛋白含量，上调血清中SOD含量，降低血清中MDA含量，从而对高血脂大鼠有明显的降血脂作用。用蓝靛果提取物喂养小白鼠对蓝靛果提取物进行调节血脂功能的验证，结果也表明蓝靛果提取物可以降低胆固醇和甘油三脂含量，提高高密度脂蛋白胆固醇含量，说明蓝靛果提取物具有调节血脂的功效。焦岩[18]从蓝靛果渣提取花色苷用来饲喂大鼠，研究结果表明，蓝靛果果渣花色苷提取物饲喂组与肥胖模型对照组相比，能显著降低肥胖模型大鼠血脂水平，使肝脏脂肪酶（LPS）、肝脂酶（HL）、脂蛋白脂肪酶（LPL）、超氧化歧化酶（SOD）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）的活性和含量明显增强，脂质过氧化物（MDA）的生成量显著减少，说明蓝靛果花色苷可以通过调节高脂膳食诱导肥胖大鼠脂质代谢来起到减肥降脂的效果。研究表明含有51.7%的蓝靛果花青素提取物不但可以降低血浆中高密度脂蛋白和正常甘油三酯浓度，而且可以增强乳糖酶活性，提高胰岛素抵抗能力。并且，A通过实验观察，认为起到降脂作用的不是单纯的某一化合物，而是整个蓝靛果浆果提取物。根据动物实验结果，计算了一个成人每日推荐食用的酚类物质含量（0.8g/kg），这个剂量对人血脂的影响可以与在动物实验中得到的结果类似。

3. 蓝靛果抗肿瘤功能

肿瘤一直是危害人类健康的杀手。目前常用来治疗恶性肿瘤的方法是外科手术、化学疗法和放射疗法。但是存在毒副作用，治疗不彻底，复发率高等弊端，此外还会出现耐药性。因此从天然产物中寻找毒副作用小、作用显著的具有抗肿瘤作用的生物活性成分或者抗肿瘤辅助药物，成为现在抗肿瘤药物的发展战略和方向之一。目前，细胞凋亡试验和动物体内实体瘤验证，已成为筛选天然抗癌药物的手段。研究表明采用细胞凋亡试验研究表明蓝靛果花色苷10%乙醇洗脱物在质量浓度为0.2mg/mL培养72h后对人肺癌A-549细胞、人肝癌HepG2细胞和人宫颈癌Hela细胞均有较强的抑制作用，抑制率分别为71.39%、75.42%和83.25%。

对蓝靛果花色苷诱导人结肠癌细胞HT29凋亡的形态学特征进行研究，结果表明，蓝靛果花色苷作用于结肠癌HT29细胞，使结肠癌细胞分别出现了细胞数量明显减少，体积缩小，皱缩变形，细胞表面有许多的球状突起，进一步有凋亡小体产生，细胞间连接逐渐断裂，细胞浆出现较多空泡，胞浆浓缩，核物质致密，呈斑块状，或呈新月形边集于核膜，核形不规整等典型的凋亡细胞形态特征，并且随着花色苷浓度的增加，现象更加显著。得出结论，蓝靛果花色苷可诱导结肠癌HT29细胞凋亡，显著抑制结肠癌HT29细胞的增殖，抑制率呈时间剂量依赖性。

研究表明蓝靛果乙酸乙酯提取物可显著降低S180肉瘤小鼠血清NOS活性和NO含量，在一些原发性肿瘤组织中，NOS的活性与肿瘤的恶性程度呈正相关。所以示蓝靛果乙酸乙酯提取物可能是通过减少肿瘤血液供应的肿瘤血管形成机制来抑制S180肉瘤的生长。通过对肝癌H22实体瘤小鼠免疫器官的测定结果表明蓝靛果乙酸乙酯提取物可缓解因接种肿瘤引起的胸腺萎缩，具有提高免疫功能作用，所以推测蓝靛果乙酸乙酯提取物可以通过增强免疫功能来达到抑制肿瘤的效果。研究表明蓝靛果果汁可明显提高化疗后小鼠生存率。提示该果汁可作为肿瘤化疗时，减缓化疗药物副反应，提高生存质量和生存率的辅助药品。

4. 蓝靛果防辐射功能

电离辐射可引起放射病，它是机体的全身性反应，几乎会引起所有器官、系统发生病理改变，尤其以神经系统、造血器官和消化系统的改变最为明显。研究发现，多种天然产物提取物如：多酚（花色苷类、黄酮类等）、多糖、生物碱、维生素类以及多种中药提取物在不同的体外或体内模型中，表现出一定的抗辐射活性。通过建立X射线和60Coγ辐射诱导细胞损伤模型研究蓝靛果花色苷的抗辐射效果，结果表明蓝靛果花色苷可以能够改善由电离辐射诱导的氧化损伤，降低活性氧自由基的产生，调节细胞氧化还原和凋亡信号转导，抑制线粒体凋亡信号途径，对辐射诱导氧化伤害具有显著的防护作用。

5. 其他功能

蓝靛果多酚提取物（其中77%为花色苷）处理牙龈成纤维细胞，可抑制ROS的形成，减少脂质过氧化，降低胞内还原型GSH的消耗，从而抑制自由基引起的氧化损伤，预防牙龈炎。金政研究表明蓝靛果具有保肝的功能，机理可能是通过轻线粒体损伤和脂肪变性，保护溶酶体膜而对肝细胞起到保护作用。研究表明蓝靛果果汁具有降压效果，并且降压作用起效时问短、作用比较温和、持久、无不良副作用。邱绍捷[31]研究表明，蓝靛果果汁可明显提高小数耐高温、抗疲劳、耐寒、耐缺氧能力，表明蓝靛果具有提高应激反应能力。蓝靛果乙酸乙醋提取物对动物实验性胃溃疡具有显著的保护作用。

制备^[1]

一种蓝靛果提取物提取方法，该方法包括如下步骤：

(1)、将蓝靛果原果置于容器中，通入二氧化硫适量和以及加入质量浓度为30％的盐酸适量，依次经粉碎，自然发酵，酶解，过滤得到蓝靛果酶解液；

(2)、将蓝靛果酶解液滴加至大孔树脂柱子中，用质量浓度为10～90％乙醇溶液洗涤，洗涤液减压浓缩至无乙醇味时，调pH至9，离心分离，取清液即为蓝靛果提取物。

主要参考资料

[1] 蓝靛果保健功能研究进展

[2] 蓝靛果忍冬色素提取工艺的研究

[3] CN201610928596.0一种花青素的提取方法