叠氮津的检测

概述^[1]

叠氮津学名2-叠氮基-4-异丙氨基-6-甲硫基-1，3，5-三嗪，为无色结晶性粉末，微溶于水。其可用作芽前除草剂。在氢氧化钠存在下，由三聚氯氰与异丙胺，再与甲硫醇钠，最后与叠氮钠反应制得。

检测^[2]

ELISA检测扑草净等三嗪类农药包括叠氮津：

1)包被：用包被缓冲液将包被抗原H2-BSA稀释成125ng/mL，在96孔酶标板中每孔加入100μL，37℃包被3小时，用洗涤液洗涤4次；

2)加样品：实验孔每孔加入50μL待测化合物溶液，对照孔加入50μL样品稀释液；其中，待测化合物溶液为扑草净、扑灭通、叠氮津、仲丁通、莠去通、敌草净、西草净、莠灭净溶液，分别用样品稀释液稀释成浓度为1000ng/mL、500ng/mL、100ng/mL、50ng/mL、10ng/mL、5ng/mL、1ng/mL、0.1ng/mL，每个浓度设置三个复孔；

3)加抗体：用样品稀释液将制备得到的单克隆抗体稀释成125ng/mL，每孔加入50μL，37℃孵育30min，洗板4次；

4)加酶标二抗：用样品稀释液将羊抗鼠酶标二抗IgG-HRP稀释成400ng/mL，每孔加100μL，37℃孵育30min，洗板4次；

5)显色：每孔加入100μL新鲜配制的TMB显色液，避光显色10min；

6)终止：每孔加入50μL终止液，用酶标仪450nm处测定各孔的OD值。

以待测化合物溶液浓度为横坐标，OD/OD0(OD值表示实验孔的吸光值，OD0表示对照孔的吸光值)为纵坐标，运用OriginPro9软件分别计算扑草净、扑灭通、叠氮津、仲丁通、莠去通、敌草净、西草净、莠灭净的IC50值，结果如表所示。

结果表明，制备的单克隆抗体能较好地识别上述八种三嗪类农药，并且有较高的灵敏度。

主要参考资料

[1] 简明精细化工大辞典

[2] CN201711256952.X抗八种三嗪类农药的群选性单克隆抗体制备及其应用