玫瑰红钠琼脂培养基的质量研究

概述^[1][2]

玫瑰红钠琼脂培养基是一种选择性分离培养基，在pH酸性条件下使用，选择性抑制细菌生长，促进真菌的生长。玫瑰红钠琼脂培养基可用于霉菌和酵母菌计数。蛋白胨提供碳源和氮源；葡萄糖提供能源；磷酸二氢钾为缓冲剂；硫酸镁提供必须的微量元素；玫瑰红钠作为选择性抑菌剂可抑制细菌的生长，并可减缓某些霉菌因生长过快而导致菌落漫延生长。

成分(g/L)^[1]

蛋白胨5.0

磷酸二氢钾1.0

玫瑰红钠0.0133

硫酸镁0.5

葡萄糖10.0

琼脂14.0

pH值6.0±0.225℃

用法^[1]

称取本品31.5g,加热溶解于1000ml蒸馏水中,121℃高压灭菌15分钟备用。

质量控制^[1]

在25－28℃培养48-96小时。

微生物灵敏度试验^[1]

按标签用法制备培养基，接种以下质控菌株，放置20-25℃需氧培养48-72小时。注：回收率计算时，用SDA琼脂做对照培养基。

质量研究^[2]

谢文等人研究了中国药品检验用玫瑰红钠琼脂培养基整体质量水平,为《中国药典》等药品质量标准的修订提供技术支持。方法:使用4个质控菌对国内外7家培养基生产商的玫瑰红钠琼脂培养基进行质量评价。待评价的玫瑰红钠琼脂培养基为5家中国培养基生产商和2家国外培养基生产商的市售商品，随机编号为A、B、C、D、E、F、G，其中F和G为国外公司产品。玫瑰红钠琼脂对照培养基(批号135005-201103)来自中国食品药品检定研究院。沙氏葡萄糖琼脂培养基(批号1131295)购自OXOID(英国)公司。0．9%氯化钠注射液(批号130220403)购自石家庄四药有限公司。

结果:不同培养基的pH存在差异。7个生产商的培养基对白色念珠菌和黑曲霉的生长率均大于0.7,生长率均值差异无统计学意义(P>0.05)。7个培养基和对照培养基对金黄色葡萄球菌的选择因子均大于6;8个培养基产品对大肠埃希菌的选择因子表现出差别,A、B、C、E、G和对照培养基无抑制性(选择性);D和F表现出一定选择性。结论:不同厂家的药品检验用玫瑰红钠琼脂培养基的促生长能力表现一致;不同厂家产品的pH和对大肠埃希菌的选择性存在差异。

中国药品标准应对计数用玫瑰红钠琼脂培养基的pH和选择性做出具体规定。《中国药典》玫瑰红钠琼脂培养基没有规定使用的pH，受试的7个培养基产品中有3个产品在包装标签上注明使用时的pH范围，1个中国产培养基注明pH范围6．0±0．2，两进口产品分别注明pH范围:6．0±0．2，7．2±0．2。本研究结果显示5个中国产培养基pH呈现出较大差异。

研究表明，pH会影响真菌的菌丝体生长和孢子的形成，玫瑰红钠琼脂培养基在pH酸性条件下使用，选择性抑制细菌生长，促进真菌的生长。也有学者研究得出，使用抗菌药的中性pH培养基比酸性pH条件有利于真菌生长，酸性条件下会导致培养后期会抑制真菌的生长，或未能抑制细菌的生长，会限制霉菌菌落的大小。所以，不同pH的培养基会影响检测结果的稳定性、可比性，《中国药典》应对玫瑰红钠琼脂培养基使用pH范围做出明确规定，培养基生产商应注明其产品的pH，让使用者了解培养基性能并根据其使用目的做出选择。

《中国药典》中玫瑰红钠琼脂培养基用于霉菌及酵母菌的计数，配方中的玫瑰红是一种指示剂，也是具有一定抑菌作用的选择性成分，能抑制细菌的生长和限制快速生长霉菌菌落的大小和高度。玫瑰红钠琼脂培养基在pH酸性条件下使用，也会抑制细菌生长。由于配方中不加抗菌药，该培养基对细菌的抑制不彻底，在特殊情况下也会以该培养基上的细菌数作为细菌计数结果，所以，培养基选择性的强与弱会对检验结果产生不同影响，药品检验者在进行培养基适用性检查时也要测定其选择性是否与对照培养基一致。配方中不加抗菌药素的玫瑰红钠琼脂培养基的选择性可能存在不足。在《中国药典》以外的培养基标准中，玫瑰红钠琼脂培养基一般都添加抗菌药，是一种选择性强的霉菌及酵母菌计数培养基，《中国药典》微生物限度检查中该培养基也会用于细菌计数，配方中不添加抗菌药，这可能会导致该培养基对细菌生长的抑制能力不足，本研究结果也证明这一点。

主要参考资料

[1]玫瑰红钠琼脂培养基说明书

[2]谢文,赵宏大,范文平.药品检验用市售玫瑰红钠琼脂培养基质量研究[J].中国药师,2014,17(05):873-875.