RNA酶抑制剂的应用

概述^[1-2]

核糖核酸酶(RNA酶)是一类水解RNA的酶，广泛存在于所有动植物和微生物中。核糖核酸酶(RNA酶)抑制剂(RNase inhibitor ， RI)呈马蹄铁形， 分子量50 kD ， 是存在于哺乳动物胞浆中的酸性糖蛋白，与进入细胞的异源RNase 结合， 阻止其攻击和破坏细胞中的RNA 。在正常细胞中，抑制剂与RNaseA 以1∶1 比例紧密结合成复合物，抑制90 %以上的RNaseA 活性， 抑制剂与核糖核酸酶(RNA酶)A 的结合能调节细胞内的RNA 代谢，对细胞的生理功能造成很多影响；抑制剂还能与血管生长因子紧密结合，具有阻断肿瘤细胞对血管生长因子的粘附和强烈抑制血管生长因子活性的作用；RNase 抑制因子能使RNA 降解速度减慢， 延长其半衰期，故RNase及其抑制因子的活性与衰老密切相关。

应用^[3-6]

CN201610525863报道了一种microRNA的快速检测方法，属于生物检测技术领域，该microRNA的快速检测方法根据待测靶标microRNA的序列设计出与其完全互补的单链DNA序列，而后在单链DNA序列两端分别修饰荧光基团和荧光淬灭基团，从而获得与待测靶标microRNA相对应的Taqman探针，而后将患者血清、RNase-free水、DSN酶、Taqman探针和RNA酶抑制剂按照一定的比例在特定的条件下进行反应，在激光的激发作用下，检测出反应液的荧光强度，即得到待测靶标microRNA的检测结果，该检测方法大大缩短了四个心肌损伤标志物的检测时间，在保证检测质量的基础上，提高了检测效率。        

CN201610710713报道了一种单个细胞RNA的提取方法，是利用无限梯度稀释接种培养单细胞；显微镜下观察，加入RNA酶抑制剂和胰蛋白酶消化细胞，将其在液氮速冻后高温处理；再立即置于液氮速冻，速冻后加入蛋白酶K和RNA酶抑制剂，置于53℃的PCR仪中1h；最后对提取的RNA反转录后进行PCR检测。本发明的起始样本量低，适用于单个细胞或少量细胞，安全无毒、操作简单快速、提取高效、提取的RNA质量高，可用于后续如RT-PCR等分子生物学实验。

CN201610877375报道了一种用于从细胞中提取核酸的方法和试剂。本发明提供的核酸提取试剂包含以下成分：表面活性剂，RNA酶抑制剂，还原剂，螯合剂和缓冲成分。核酸提取方法是向细胞中加入适量的核酸提取试剂裂解细胞，加热失活RNA酶，在冰上冷却后即可用于基因表达水平检测、基因克隆或测序等操作，也可保存于-20℃或-80℃以待后续的实验使用。此方法操作简单，结果稳定可靠，耗时仅需20分钟左右，使用的试剂安全低毒，大大优于传统的核酸提取方法。   

CN201110096219提供了一种预测脓毒症患者病死率的试剂盒，该试剂盒包括反转录系统和扩增系统。反转录系统由反转录酶、反转录体系缓冲液、RNA酶抑制剂、hsa-miR-16茎环结构引物和消化后的RNA提取液组成。扩增系统由含Taq酶的miRNA表达定量检测混合液、hsa-miR-16扩增引物与hsa-miR-16荧光标记探针和U6snRNA扩增引物与U6snRNA荧光标记探针组成。本发明还提供了一种利用上述试剂盒预测脓毒症患者病死率的方法。本发明的方法检测定量准确，简便、快速且经济实用。可进一步同其他分子指标与评分系统相结合，为脓毒症患者预后预测提供综合性分子标记试剂盒，方便于临床应用。

主要参考资料

[1] 卫生学大辞典

[2] 核糖核酸酶(RNA酶)研究进展

[3]CN201610525863.X一种microRNA的快速检测方法

[4]CN201610710713.6一种单个细胞RNA的提取方法

[5]CN201610877375.5一种用于从细胞中提取核酸的方法和试剂

[6]CN201110096219.2一种用于预测脓毒症患者病死率的试剂盒及其用途