"Ca9-22人口腔上皮癌复苏细胞(附STR鉴定报告)
细胞生长:贴壁
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞内空泡通常是细胞受到压力的表现,原因可能是培养基中缺乏谷氨酰胺、添加抗真菌剂、不适当的CO2环境对培养基中碳酸氢钠浓度或培养基的营养消耗殆尽。一般来说,对于某些细胞系,尤其是向3T3-L1这样具有脂滴的细胞,细胞包含空泡是正常的。缺氧:当缺氧时 细胞na泵动力不足导致细胞内水储留,Na泵动力不足导致其不能向细胞外运送足量的Na,从而使细胞内处于GAO渗透压状态,更多胞外水分子进入胞内,造成水储留。可以理解为因为水分的流失,细胞内出现细胞质的浓缩,从而出现空泡。原代细胞培养的过程中经常出现这样的情况,是有些细胞处于终末分化状态,不会再分裂,时间长了就会空泡化而死亡。传代细胞出现这种状况比较少见,可能的原因是细胞代龄较长,老化严重。传代次数太多,细胞老化会出现上述的情况,但是还不排除其他因素,胞质中出现颗粒、脂滴或空泡也可能是细胞代谢不良的反应。我前一段时间养成纤维细胞(原代)的时候也出现过类似的情况。可以将血清的浓度提GAO10%到15%到20%;血清的质量,如果是国内的血清的话不同的批次之间的差异很大,可以借用些质量HAO的血清试试,看细胞状态是否会改变;把细胞消化收集起来,然后离心后重悬,重新种植。培养基里添加谷氨酰氨;细胞代谢障碍的问题,传代的次数可能不是关键因素,应该可以调整得过来;PH值不对,就用PH值试纸测了一下,大概6.7左右,加碳酸氢钠调到7.2左右,过了一段就HAO了。不排除轻度污染的可能,重度污染会伴有培养液的浑浊;培养液的PH值与细胞正常所需PH值差别太大;还有一个大家易忽略的问题,我们从相关权威资料中查到如果消化细胞吹打时力度过大,产生太多气泡,长期存在也会出现这种现象。
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细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
Ca9-22人口腔上皮癌复苏细胞(附STR鉴定报告)
细胞株的生长有两种状态,贴壁细胞需要附着在一个表面进行生长(贴壁依赖性),悬浮细胞可在悬浮培养状态下生长 (非贴壁依赖)。在细胞单层贴壁生长或悬浮生长中,都通常遵循四个征性阶段: 迟滞期、对数或指数期、静止或平台期 及衰退期。迟滞期:细胞在刚接种于细胞培养容器的初期呈现生长缓慢,细胞正从解冻或传代后慢慢恢复活力。对数或指数期:细胞进入一个持续快速增长的时期,呈指数级增长,直至贴壁细胞占满整个培养容器表面或悬浮细胞的浓度超过细胞培养基的供给能力。静止/平台期:细胞增殖减慢和停止。衰退期:如果不更换培养基和进行细胞传代处理,细胞会失去活力,数量不断减少。为了确保细胞活力、遗传基因型稳定和表型的稳定,细胞株的培养需要保持在对数期。这意味着需要定期对细胞进行传代。并且注意在细胞进入生长平台期之前,即单层细胞100%汇合长满前或悬浮细胞达到其推荐的大细胞密度之前,要进行细胞传代。监测细胞生长和绘制每个细胞株的生长曲线都有助于确定细胞株的生长性。
细胞背景资料:详见相关文献介绍
细胞形态:上皮细胞样
Ca9-22人口腔上皮癌复苏细胞(附STR鉴定报告)
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
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细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
一旦您在细胞培养的过程中发现有黑点生成,首先,要肉眼观察培养基是否混浊,然后,在镜下观察培养细胞生长的状态,黑点是否游动。如果细胞被污染,微生物则会大量繁殖,培养基就会迅速变黄、变混浊。污染包括细菌污染、支原体污染等。如果在镜下观察细胞,生长状态良HAO,与黑点出现前相比,没有任何变化,那么,黑点的出现可能与以下几种情况有关:细胞生长过老,破碎的细胞残骸;血清质量不HAO,反复冻融的结果;配制培养基的pH值偏GAO,不宜细胞生长;配制培养基的水质、容器不合格。可应用离心、过滤的方法去除这些黑点;培养原代细胞中出现小黑点,可能是原代组织中的杂质,多次传代可以消除。
细胞生长特性:贴壁生长
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Ca9-22人口腔上皮癌复苏细胞(附STR鉴定报告)
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