"HCE-T Cell|人角膜上皮细胞
细胞背景资料:角膜上皮细胞;Ad-SV40转化;女性
细胞形态:上皮细胞样
解冻细胞常见实验问题分析及推荐解决方法:在解冻冻存细胞时,发现会出现存活率低、大量细胞碎片及生长缓慢等问题,究竟是什么原因导致,我们该怎么进行解决?以下是国内外细胞培养专家针对解冻细胞实验问题,总结的一些解决方案!出现低存活率的可能原因及推荐解决方案如下:1)解冻过程中细胞裂解,推荐的解决方案:可预期到一定量的细胞死亡,因此细胞的浓度应足够GAO,考虑到这一损失。起始浓度为1*10(6)至1*10(7)细胞/毫升;2)解冻过程中的问题,推荐的解决方案:在-70℃至-80℃下保存冷冻的培养物,保存时间为1-5天,但这不是保存的方法。在37℃充分解冻后应立即开始培养;3)对冷冻液过敏,推荐的解决方案:A.完全或部分更换培养基,减少培养基中冷冻液的量。在24小时后更换培养液体可全部去除冷冻液。B.留出更多时间供培养物恢复。有时细胞需要几周时间才能形成单层或密集的悬浮物,取决于冷冻时细胞的年龄或传代次数或在生长阶段中的位置。冷冻的Zui佳条件在对数期;4)被冷冻的原种细胞的年龄或冷冻时培养物的年龄,推荐的解决方案:解冻Zui近冷冻的细胞。细胞处于冷冻状态的时间越长,存活率越低。检查冷冻细胞的时间和方法。在冷冻时细胞应处于对数期。
细胞生长:贴壁
BIU87细胞类似产品::H2591细胞、NCI-H358细胞、HSAEC1-KT细胞
C8D1A细胞类似产品::NCIH1930细胞、EFM-192A细胞、MCF7/WT细胞
KHYG-1细胞类似产品::Y3细胞、EAC细胞、MDA-MB453细胞
HBE 135-E6/E7细胞类似产品::FHL-124细胞、CEM T4细胞、NTERA-2 cl.D1细胞
U-373-MG细胞类似产品::AtT20细胞、SW.620细胞、KYSE 180细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
HCE-T Cell|人角膜上皮细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
悬浮细胞不容易转染:悬浮细胞是指细胞生长不依赖支持物表面,在培养液中呈悬浮状态生长,如淋巴细胞。在实验室经常会遇到悬浮细胞的转染,其和贴壁细胞转染还是有很大不同的。目前大多数实验室用的是脂质体类的转染试剂,脂质体转染是基于电荷吸引原理,先形成脂质体-DNA复合物,散布在细胞周围,然后通过细胞的内吞作用,将目的基因导入细胞内,而脂质体复合物与贴壁细胞的接触机会比悬浮细胞GAO出很多倍,所以,脂质体转染时悬浮细胞的转染效率要明显低于贴壁细胞。其次,脂质体试剂的毒性较大,这就使得悬浮细胞的转染更为困难了。另外,悬浮细胞不易培养,易死亡,也给细胞转染造成了一定的困难。为了提GAO悬浮细胞的转染效率,可以使用非脂质体的转染试剂,如纳米材料的。也可以使用电转染方法,针对悬浮细胞等难转染细胞还是挺不错的,电击对细胞有一定的损伤,ZuiHAO选用具有细胞膜修复功能的电转染试剂,可以将电击对细胞的伤害降到Zui低,悬浮细胞不易转染,选对试剂及良HAO的细胞培养环境才是关键。
KU 19-19细胞类似产品::Bovine Turbinate细胞、NCIH2141细胞、Caco-2BBe细胞
TC-1[JHU-1]细胞类似产品::OCI/AML5细胞、BEL/FU细胞、MLA 144细胞
SK Mel 1细胞类似产品::OVCAR 5细胞、MUG-Chor1细胞、SW-579细胞
NS1-Ag 4/1细胞类似产品::Meat Animal Research Center-145细胞、AMO-1细胞、ESC细胞
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
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细胞生长特性:贴壁
细胞传代比例:对于有限细胞系,传代时以二、四、八或十六倍(传代比率分别是2、4、8和16)降低细胞密度,计算群体倍增数更容易(即分别是传代比率2对应1次倍增,4对应2次倍增,8对应3次倍增,16对应4次倍增);例如,一传八的培养物需要3次倍增才能达到原来相同的细胞密度。脆弱的或生长缓慢的细胞系通常一传二,而有活力的,生长快速的细胞系可以一传八,甚至一传十六。有些连续细胞系可一传五十或一传100。一旦细胞系变为连续细胞系(通常经过150次或200次倍增以上),细胞浓度是主要参数,培养浓度应降至10(4)/ml--10(5)/ml之间。可选择传代间隔合适的传代比率或稀释度,或许为1周或2周,同时要保证:细胞密度不可稀释过低,使其延迟期合理(在24小时以内),可重新进入生长周期;而且在下次传代前不进人平台期。
CL-11细胞类似产品::University of Michigan-Urothelial Carcinoma-1细胞、MGH-U3 (RN)细胞、RC13细胞
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JB6Cl30细胞类似产品::MLO-Y4细胞、H661细胞、DHL4细胞
MLTC-1细胞类似产品::MV3细胞、HemECs细胞、SK N SH细胞
SK BR 03细胞类似产品::3T3NIH细胞、KTC1细胞、Hs 739.T细胞
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HCE-T Cell|人角膜上皮细胞
CCRF-CEM C1细胞类似产品::HIMEC细胞、FaDu细胞、HCT-GEO细胞
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WPMY1细胞类似产品::TJ905细胞、SNU-C1细胞、KYSE 140细胞
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