"HCE-T Cell:人角膜上皮细胞系
细胞形态:上皮细胞样
细胞生长:贴壁
细胞背景资料:角膜上皮细胞;Ad-SV40转化;女性
RKO-E6细胞系相关产品:RetroPack PT67细胞、HMEL细胞、SF126细胞
H2452细胞系相关产品:BrCL12细胞、PTK2细胞、EB2细胞
WM-239-A细胞系相关产品:Daudi细胞、Jurkat (clone E6-1)细胞、MKN-28细胞
ChaGo-K1细胞系相关产品:U-118 MG细胞、MDA-330细胞、alpha TC1.6细胞
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
HCE-T Cell:人角膜上皮细胞系
因为细胞生长的时候肯定是要相互联系,大部分的细胞都是要成片生长的,尤其是对于贴壁细胞,单个细胞贴壁之后长着长着就长到一片去了。但是如果是成片的细胞抱团的话,传代后细胞是不能贴壁的,这样抱团的细胞就会死亡。所以,消化传代的时候一定要将细胞消化成单个单个的独立状态,这个啊是非常考究你的功夫的!细胞一旦脱落入悬液里你很难再将他吹打成单个,因为他没有受力点了。很难找到受力点让你对他吹打的力分散开细胞。所以必须要在细胞未脱落之前将其吹打开,受力点就是细胞贴壁的地方。这样你就必须要严格控制好消化的程度啊,这和大师做饭掌握好火候是一样的道理啊。既要消化到容易吹打下来,又不能太过,一吹就整片脱落,要单个单个地往下掉。所以我才要分批分次地加胰酶消化就是为了保证不同生长状态贴壁程度的细胞能够都维持在好的受力点分散开。这个是很重要的一点。尤其是对于某些细胞这一点就是他活去死的致命点。像Caco-2细胞就是如此。另外关于传代很重要一点就是一定不能等到细胞长满的时候才去消化传代。要在细胞长到70%左右的时候就要传代了,一旦发现细胞生长中已经有叠层生长的时候就要立即进行消化传代。不能再拖了。关于换液传代时候洗瓶的问题。对于用DMEM培养基培养的细胞,你在洗的时候如果是用无血清1640去洗细胞在随即后的几次中会比用DMEM洗的长的要好。同样,用1640培养的也有这个现象。如果不嫌麻烦的话,可以用PBS来洗,洗的效果和用无血清培养基洗的效果基本上是一样的,对于有些细胞会更胜一筹。洗的目的主要是洗去培养瓶里残留的血清,防止它对胰酶的影响。这样能够保证胰酶的消化能力优先,是很关键的一点。先补充这么多,还会后续更新。再补充一点:传代时PBS洗是很重要的一步,最近发现,用PBS就可以把细胞消化开来。加入PBS放置10-15分钟,有些需要更长的时间,等到细胞一个个分离开来的时候,就可以直接吹打下来,但是和胰酶消化一样,要控制好时间,不能时间太过了,要不然损伤细胞,细胞不容易成活,状态容易不好。这个方法对于某些细胞是很管用的。有些细胞用胰酶消化不容易消化成单个的时候,或者临时没有胰酶了,可以选用此方法。不过一定要试试,看是否适合你的细胞。
细胞产品包装:复苏形式:T25培养瓶(一瓶)或冻存形式:1ml冻存管(两支)
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞常规培养传代流程(请严格遵照无菌操作):1)吸出原培养瓶中的培养基,PBS缓冲液润洗细胞两次,加2-3ml 0.25%胰酶进行消化细胞(注意把握消化时间,通常控制在1-2min);2)镜下观察消化情况,在细胞边缘缩小,贴壁松动时(不建议消化到细胞漂浮)去掉胰酶,加6-8ml完全培养基,轻轻吹打细胞层,尽量把细胞层吹落,吹散;3)取部分细胞悬液转移到新的培养皿/瓶中,添加适当的完全培养基,把细胞悬液打匀,于培养箱中培养;4)注意培养基PH值变化情况,定期换液(每周2-3次),待细胞密度达到80%以后重复1项操作或者冻存;特别注意:(如使用公共实验室或者初次接触细胞培养,建议添加双抗培养)1)收到细胞后请尽快更换为含15%血清的新鲜培养基,如因特殊情况需要继续使用原瓶,请在原瓶培养基中额外添加10%的血清,(原瓶培养基的继续使用时间最长不宜超过72小时);2)贴壁细胞收到当天切忌立刻消化,请将细胞换液后放置培养箱孵育到第二天再做消化传代,请优先选择直径6cm的培养皿进行传代培养;3)如签收时出现培养瓶壁破裂,漏液等情况请及时做好照片记录并联系实验室。
细胞来源说明:细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系
CCD966SK细胞系相关产品:KYSE-150细胞、Hs821T细胞、YD38细胞
DSL-6A/C1细胞系相关产品:OVCAR-420细胞、MDA175细胞、A427细胞
H-2030细胞系相关产品:OCIAML4细胞、HCC827细胞、H-128细胞
NCI-H524细胞系相关产品:DHL8细胞、IMR32细胞、UPCI-SCC090细胞
NCI H2106细胞系相关产品:IPLB-SF-21细胞、Human podocyte细胞、TE671/RD细胞
细胞生长特性:贴壁
HCE-T Cell:人角膜上皮细胞系
贴壁细胞消化传代时通常采用两种方法:一、加入胰酶等细胞脱落后,再加培养基中止胰酶作用,离心传代;二、加入胰酶后,镜下观察待细胞始脱落时,弃胰酶,加培养液分瓶。但前者太麻烦,而后者有可能对细胞施加胰酶选择,因为总是贴壁不牢的细胞先脱落,对肿瘤细胞来说,这部分细胞有可能是恶性程度较高的细胞亚群。一种简单的消化传代方法。加入PBS洗去血清或加入胰酶先中和血清的作用(30s),弃之,再加入适量胰酶作用10s-40s(根据细胞消化的难易程度),弃之,这样依赖残余的胰酶就可将细胞消化单细胞。对于较难消化的细胞,可以用2%利多卡因消化5-8分钟,然后再弃去,加培养基吹打也可以,对细胞的影响不大。不用PBS也不用Hanks洗,只要把旧培养液吸的干净一点,直接加酶消化应该不会有什么问题。弃培养液后,用0.04%的EDTA冲洗一次,再用1/4v的0.04%的EDTA室温孵育5min,弃取大部分EDTA,加入与剩余EDTA等量的胰酶(预热)总体积1/10v。消化到有细胞脱落。不过有人说EDTA对细胞不好,有证据吗?培养的BASMC:倒掉旧培养液加入少量胰酶冲一下,倒掉再加入0.125-0.25%胰酶约6-10滴或1ml(25ml bottle)消化再加入适量新培养基中和,并分瓶这种方法简单、省事;效果很好并且不损失细胞!
细胞形态特性:详见细胞说明书
MLA-144细胞系相关产品:H-1963细胞、WEHI 231细胞、P3X63Ag8653细胞
UPCI-SCC-154细胞系相关产品:C-28/I2细胞、NCIH209细胞、WM-115细胞
HCT 15细胞系相关产品:COV 434细胞、NCIH2170细胞、MSTO211H细胞
H2009细胞系相关产品:MCF7细胞、OC-316细胞、HEK293-H细胞
AML-193细胞系相关产品:SNU878细胞、KYSE 30细胞、Kelly细胞
K7M2 wt细胞系相关产品:Caov-4细胞、J-774A.1细胞、Jeko1细胞
VMRC-RCZ细胞系相关产品:SW-839细胞、H-358细胞、Panc02.03细胞
HCE-T Cell:人角膜上皮细胞系
NCIH526细胞系相关产品:Panc8.13细胞、WERI Rb-1细胞、ATC241细胞
M-NFS-60细胞系相关产品:ACC-2细胞、EOL1细胞、Caco-2 BBe细胞
RS(4;11)细胞系相关产品:Stanford University Pediatric T-cell line 1细胞、MUTZ1细胞、THLE2细胞
HGMC细胞系相关产品:MFE 296细胞、DSL-6A/C1细胞、OVCAR-8细胞
NCI-H1404细胞系相关产品:THP-1细胞、159PT细胞、XWLC-05细胞
TE85细胞系相关产品:tdott细胞、NCIH208细胞、Hs 840.T细胞
MDCC-MSB-1细胞系相关产品:C-33-A细胞、RDES-1细胞、NCI-H1623细胞
P3X63NS1细胞系相关产品:KYSE 30细胞、RSC 96细胞、VP 267细胞
H2170细胞系相关产品:MBdSMC细胞、IM95细胞、MADB 106细胞
Leghorn Male Hepatoma cell line细胞系相关产品:2V6.11细胞、P-19细胞、COR-L 105细胞
RS(4;11)细胞系相关产品:Stanford University Pediatric T-cell line 1细胞、MUTZ1细胞、THLE2细胞
PC-9/S1细胞系相关产品:SU86-86细胞、H-498细胞、D407细胞
U-266细胞系相关产品:EA.hy 926细胞、NCI H508细胞、HCC-1500细胞
BEL/FU细胞系相关产品:KOSC-2 cl3-43细胞、HBL1细胞、RT-BM细胞
HUT 28细胞系相关产品:NCIH1666细胞、SNU-475细胞、MEG-01细胞
SJRH 30细胞系相关产品:NCI-H498细胞、GA-10(Clone 4)细胞、HVSMC细胞
CT26.CL25细胞系相关产品:MDA-435细胞、H-64细胞、H2122细胞
Leghorn Male Hepatoma cell line细胞系相关产品:2V6.11细胞、P-19细胞、COR-L 105细胞
NUGC-2细胞系相关产品:LNCaP C4-2细胞、HBE 135-E6/E7细胞、H1703细胞
Human Microglia Clone 3细胞系相关产品:HCC2108细胞、SCL2细胞、32Dcl3细胞
NIT-1细胞系相关产品:NPA 87细胞、Co-115细胞、HCC202细胞
ECC-1细胞系相关产品:3T3 Swiss Albino细胞、Neuro2a细胞、H2126细胞
mousepodocyte细胞系相关产品:HH [Human lymphoma]细胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞、MCA-38细胞
M3 Clone M-3细胞系相关产品:HMy2.CIR细胞、HN-6细胞、T/G HA-VSMC细胞
Hs839T细胞系相关产品:U-87MG ATCC细胞、PANC0203细胞、SK-Hep1细胞
RMa-bm细胞系相关产品:CT26WT细胞、HEL-92.1.7细胞、HCC2218细胞
FRTL-5细胞系相关产品:Hs-675-T细胞、P3X63Ag8.653细胞、SO-RB50细胞
RPTEC/TERT 1细胞系相关产品:RFL6细胞、NCIH1568细胞、Psi2 DAP细胞
32D.3细胞系相关产品:TKB-1细胞、Hs 636.T细胞、Capan1细胞
SK-GT-4细胞系相关产品:6-10B细胞、H1963细胞、M2-10B4细胞
REC1细胞系相关产品:MKN-7细胞、HEMCSS细胞、CEM clone 7细胞
HANK1细胞系相关产品:MCA-38细胞、H-1781细胞、NCI-H322细胞
PLC/PRF/5细胞系相关产品:Ramos.G6.C10细胞、HEY A8细胞、OS-RC-2细胞
NIH:OVCAR-8细胞系相关产品:X63-Ag8.653细胞、QBI-HEK 293A细胞、IEC-6细胞
MCF7/WT细胞系相关产品:MDAMB134VI细胞、MMAc-Serum Free细胞、C26细胞
MN9D细胞系相关产品:U251n细胞、Vero from pool #76细胞、HAPI细胞
L428细胞系相关产品:Roswell Park Memorial Institute 2650细胞、MCF-7/AdrR细胞、H82细胞
SUSM-1细胞系相关产品:NCIH2073细胞、Hs604T细胞、MKN45细胞
B16-F10细胞系相关产品:Sp2/mIL-6细胞、HEK293-A细胞、EU-4细胞
National Medical Center-Glioma 1细胞系相关产品:HBE 135-E6E7细胞、HSCT6细胞、KYSE 410细胞
Normal Rat Kidney-49F细胞系相关产品:A-172MG细胞、Tu177细胞、HCC-1419细胞
343 MG细胞系相关产品:SUD6细胞、alpha-TC1.6细胞、H-747细胞
HCC-95细胞系相关产品:Kit-225细胞、HDQ-P1细胞、DMS-273细胞
HCE-T Cell:人角膜上皮细胞系
H2029细胞系相关产品:CAL27细胞、Panc08.13细胞、Hs 274细胞
GS-9L细胞系相关产品:BC-028细胞、Neukoplast细胞、OAW42细胞
NCIH211细胞系相关产品:NIH:OVCAR-10细胞、MDA-361细胞、NCI-H740细胞
Namalwa细胞系相关产品:A 253细胞、CV-1 in Origin Simian-7细胞、Mc Ardle 7777细胞
NIH-OVCAR-3细胞系相关产品:251 MG细胞、Mono-Mac-6细胞、High-5细胞
HEK (AD293)细胞系相关产品:WI 38细胞、HT 1197细胞、BAEC细胞
HEB细胞系相关产品:KMS26细胞、H-847细胞、EB1细胞
SW48细胞系相关产品:NCI-H2452细胞、LAN5细胞、RS4:11细胞
NPA-87细胞系相关产品:RC92A细胞、H-4细胞、SUPT-1细胞
TT细胞系相关产品:IEC 6细胞、no.11细胞、GM04154B细胞
MDA435细胞系相关产品:NUGC-3细胞、MFE280细胞、JEG3细胞
MUG-Chor1细胞系相关产品:Mv1.Lu细胞、OCI Ly3细胞、EBC1细胞
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