"Dakiki:人B淋巴复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:悬浮
可以这样说,对于需要消化传代的细胞,每一次的消化都是对这个细胞存活与否,状态HAO与不HAO至关重要的考验。很多同学都遇到过这个问题,自己养的细胞开始的几代长的还挺HAO的,可是穿过几代之后就发现自己的细胞不行了,状态越来越差劲了。对于这个问题,可以非常肯定地说,你的消化环节出问题了。你每一次的消化都让细胞受到较大损伤了。所以,越长越差。在消化的过程中,你加入胰酶后,所有细胞都在被胰酶消化着,但是我们忽视了一个问题就是,细胞的生长状态是不一样的,每一个细胞的贴壁情况也是不一样的,有的贴壁牢固,有的贴壁没有那么牢固的,所以,让所有的细胞消化同样的时间对细胞是不公平的,他们受到了差别待遇当然会有脾气的,大家争取做到因材施教,比如试试下面的“四步消化法”。(以难消化细胞为例),具体操作:1)首先不加胰酶,倒掉旧培养基加入少量新培养基洗1-2遍(目的是将漂浮着的死细胞之类尽量洗掉)。2)然后再加入少量新培养基直接吹打一遍,这一遍是把贴壁不牢固的细胞吹打下来。再用培养基洗一遍,两次所得悬液混合传入新瓶。(你可以将这些传入新瓶培养,以与后面胰酶消化过的细胞对比观察看谁长的更HAO一点就知道该细胞对胰酶的敏感度了)3)吸干净瓶内剩余液体,加入0.3ml左右的胰酶润洗一遍,吸掉弃之,再加入1ml左右的胰酶消化。消化的同时置于显微镜下观察,待细胞与细胞之间间隙明显的时候立即吸掉胰酶,加入新培养基开始吹打,吹打2-3遍后吸取悬液于试管或新瓶暂存。用2ml左右新培养基洗一遍与前面的混合。(也可以传入新瓶培养,以与后面及前面的做对比)4)然后把前面刚吸出来的胰酶重新加进去瓶里继续消化剩余的贴壁牢固的细胞。当然你也可以用新的胰酶,如果你们那比较富裕的话,继续镜下观察,待剩余细胞间隙明显,细胞独立开来的时候,吸掉胰酶,加入新培养基吹打。悬液传入新瓶培养(根据实际情况把握)。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
HHL5细胞类似产品::NCI-H322细胞、HTori3细胞、DOK细胞
H-2172细胞类似产品::B16-F10--RED细胞、H341细胞、GM04671细胞
NCI-H841细胞类似产品::BNL.1ME A.7R.1细胞、NOZAWA细胞、Colo16细胞
MD Anderson-Metastatic Breast-134-VI细胞类似产品::HIBEpiC细胞、HRA19细胞、P3 NS1 Ag4/1细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:B淋巴细胞;EBV转染
Dakiki:人B淋巴复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:淋巴母细胞样
WEHI-3B细胞类似产品::Okayama University Medical School-23细胞、H1385细胞、GA-10-Clone-4细胞
PECAPJ34细胞类似产品::BT细胞、C518细胞、Hs611T细胞
Intestinal Epithelioid Cell line No. 6细胞类似产品::PG-4细胞、MESSA-DX5细胞、RCC4细胞
购买细胞注意事项:1)收到细胞后首先观察细胞瓶是否完HAO,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系;2)仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等;3)用75%酒精擦拭细胞瓶表面,显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落,将细胞置于培养箱内静置培养过夜,隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁,若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力,如果证实细胞活力正常,请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养;如果染色结果显示细胞无活力,请拍下照片及时和我们联系,信息确认后我们为您再免费寄送一次;4)建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和公司技术部沟通交流。【细胞传代操作步骤】一、贴壁细胞传代:1)提前将培养基、PBS放入37℃水浴锅内预热,用75%酒精擦拭后再放入超净台内;2)吸除或倒掉细胞瓶内旧培养液,加少量PBS润洗细胞;3)加入适量胰酶,使胰酶的量能盖住细胞,37℃孵育,每隔2~3min显微镜下观察,待贴壁细胞间间隙变大、细胞趋于圆形但还未漂起时弃去胰酶,加入新鲜培养基,晃动细胞瓶,终止胰酶作用;4)用吸管小心吹打贴壁的细胞,制成细胞悬液。控制吹打的力度,避免产生大量的气泡;5)将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养,隔天观察贴壁生长情况。二、悬浮细胞传代:1)将细胞悬液转移到无菌离心管内,1000rpm离心5min;2)弃去上清,加入新鲜的培养基,用吸管小心吹散沉淀,制成细胞悬液;3)将细胞悬液分别接种到另外的2~3个细胞瓶内,加入新鲜培养基,置37℃温箱培养。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
Dakiki:人B淋巴复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:悬浮
一般使用trypsin-EDTA 浓度为0.25%trypsin-0.53mM EDTA.2Na或0.05%trypsin-0.02mM EDTA.2Na。消化液浓度过GAO时,易造成培养基中细胞碎片增多,黑渣子增多,常规细胞传代时建议用0.05%的胰酶进行消化,对于难消化的细胞可采用0.25%胰酶进行消化,细胞密度过GAO超过80%时,采用分步消化法。胰酶储存在-20°C,解冻在4°C进行,次开瓶后应立即少量分装于无菌试管中,保存于-20°C,避免反复冷冻解冻造成trypsin之活性降低,并可减少污染之机会。胰酶消化的程度是细胞培养中的一个关键步骤:消化过度细胞碎片增多,黑渣子增多,细胞会成片脱落,严重影响细胞活性,并有部分细胞漂浮,随弃去的胰酶流失;消化不足则细胞难于从瓶壁上吹下,反复吹打同样也会损伤细胞活性。不同细胞对消化液的敏感性不同,胰酶消化的时间也会有差异。胰酶消化时间与胰酶的浓度,是否含EDTA,胰酶的储存时间,胰酶的储存温度,是否反复冻融,消化加入的胰酶体积,消化温度及细胞的密度有关。对于新购买的细胞,建议客户先用低浓度的胰酶仔细去摸索一下消化时间,可每隔1分钟镜下观察细胞是否变圆,记录Zui佳消化时间,下一次操作参考之前的记录来控制时间即可。
GC1-SPG细胞类似产品::SaOS-2细胞、SUM149-PT细胞、H-1048细胞
PG-4(S+L-)细胞类似产品::F36P细胞、NCI-H157细胞、VCaP细胞
WERI-Rb 1细胞类似产品::C4-2细胞、RK13细胞、Y3-Ag1,2,3细胞
JCA-1细胞类似产品::NTC-200细胞、H-1975细胞、Fox/NY细胞
C81-61细胞类似产品::JB 6细胞、Hs 445细胞、Panc8.13细胞
BE2_C细胞类似产品::SJRH30细胞、HN4细胞、AE1201细胞
H-378细胞类似产品::SW839细胞、NCI-H87细胞、Alpha Mouse Liver 12细胞
VP229细胞类似产品::SW-1222细胞、HUT 226细胞、OCM-1A细胞
NTHY-ORI3.1细胞类似产品::hEEC细胞、Mv1Lu细胞、HMy2.CIR细胞
aNK细胞类似产品::OVCA8细胞、BNL 1ME A.7R.1细胞、NALM-6-M1细胞
LN-382细胞类似产品::W256细胞、SVGp12细胞、U-266细胞
CFSC-8B细胞类似产品::L-6 myoblast细胞、HCAEC细胞、M20 [Human melanoma]细胞
H2106细胞类似产品::RIMEC细胞、SW 403细胞、RCC-10RGB细胞
PLC8024细胞类似产品::LS-174T细胞、KYSE30细胞、Panc3_27细胞
H-524细胞类似产品::SRA01/04细胞、FC33细胞、Rat Glomerular Endothelial细胞
H676B细胞类似产品::CEM T4细胞、AN3细胞、ROS1728细胞
H676B细胞类似产品::CEM T4细胞、AN3细胞、ROS1728细胞
ML2细胞类似产品::HARA-B细胞、H-526细胞、SGC996细胞
P1-Raji细胞类似产品::RCC-10RGB细胞、MG-HU-3细胞、OCI-AML-5细胞
SGC-996细胞类似产品::Hs 604.T细胞、HCET细胞、LAN1细胞
HK-2 [Human kidney]细胞类似产品::University of Arizona Cell Culture-812细胞、KBM-7/Hap8细胞、H-522细胞
E.G7-OVA细胞类似产品::EOC20细胞、CAKI 1细胞、AD-293细胞
293A细胞类似产品::WC00044细胞、A-2058细胞、4175细胞
LA4细胞类似产品::293/EBNA-1细胞、NS1细胞、T HEECs细胞
Dakiki:人B淋巴复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
MA 104细胞类似产品::IHHA-1细胞、NCIH1876细胞、NCI-H1568细胞
CL-34细胞类似产品::MDA134细胞、IOSE-29细胞、Hep 3B细胞
HT-1376细胞类似产品::SUSM1细胞、NCI-H716细胞、KBM7细胞
SKCO1细胞类似产品::PC3M-1E8细胞、NG108-15细胞、RBVEC细胞
N-Tera-2细胞类似产品::RBL-2H3细胞、IEC 18细胞、PC-3M IE8细胞
Intestinal Epithelioid Cell line No. 6细胞类似产品::PG-4细胞、MESSA-DX5细胞、RCC4细胞
SNU-620细胞类似产品::DoHH2细胞、NPC-TW01细胞、NCIH1435细胞
Loucy细胞类似产品::Hep G2/C3A细胞、Mc Ardle 7777细胞、Hs294T细胞
IHH细胞类似产品::HS5细胞、Jurkat-E6细胞、LPC-H12细胞
SKN-SH细胞类似产品::Hs606细胞、GOS-3细胞、B16-F0细胞
NCI-H1373细胞类似产品::HLMVEC细胞、Colon 38细胞、RIN Cl-5F细胞
OLN 93细胞类似产品::Co320细胞、NCI-H2452细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-16细胞
B16细胞类似产品::Panc-08.13细胞、CCD33Co细胞、Panc-8_13细胞
NBL-1细胞类似产品::LC-1 sq细胞、Highly Aggressively Proliferating Immortalized细胞、KU19-19细胞
HEK293-EBNA1细胞类似产品::16HBE细胞、M21细胞、IPECJ2细胞
SGC-7901细胞类似产品::NCIH596细胞、NK-92细胞、V-79-4细胞
GTL 16细胞类似产品::FO [Mouse myeloma]细胞、UPCISCC154细胞、MDAMB436细胞
VP229细胞类似产品::SW-1222细胞、HUT 226细胞、OCM-1A细胞
NSC-34细胞类似产品::CMK细胞、FRhK-4细胞、SKRC 39细胞
Hs 274细胞类似产品::CFPAC-1细胞、TK-10细胞、AML 12细胞
UCLA NPA871细胞类似产品::MADB106细胞、A2780 CP70细胞、MDAMB361细胞
UCLA NPA-87-1细胞类似产品::SNU-16细胞、MHCC97-L细胞、HCC78细胞
Leukemia L1210细胞类似产品::Normal Rat, August 3, 1983细胞、NCI.H226细胞、HCGC细胞
MC-4细胞类似产品::SUIT2细胞、PTK-2细胞、CAL-85-1细胞
GTL 16细胞类似产品::FO [Mouse myeloma]细胞、UPCISCC154细胞、MDAMB436细胞
HEL 92.1.7细胞类似产品::MA104细胞、MSTO-211 H细胞、T-24细胞
BaF3细胞类似产品::ECV304细胞、NCIH526细胞、H-1437细胞
HBZY1细胞类似产品::VeroE6细胞、Mac-1细胞、LS 174T细胞
TE6细胞类似产品::MEF细胞、Hs 274.T细胞、DLM8细胞
Vero 76 clone E-6细胞类似产品::SK HEP 01细胞、JEKO细胞、SKNSH细胞
R1610细胞类似产品::H510细胞、Murine Thymic Epithelial Cell line 1细胞、HUT 28细胞
RERF-LCMS细胞类似产品::NCI-H1882细胞、MAntle cell VERona-1细胞、BLO-11细胞
H-1688细胞类似产品::MDA330细胞、LLC-PK-1细胞、Moorfields/Institute of Ophthalmology-Muller 1细胞
138MG细胞类似产品::TYKnu细胞、HEK293-EBNA1细胞、DrG细胞
Nb2细胞类似产品::C-4I细胞、C32-mel细胞、U-251MG细胞
H-1819细胞类似产品::5637细胞、J45.01细胞、PNEC30细胞
K7M2细胞类似产品::GM03569D细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞、H2107细胞
WERI-Rb 1细胞类似产品::C4-2细胞、UPCI-SCC-90细胞、ND7/23细胞
OVCA432_Bast细胞类似产品::NCI-A549细胞、130-T细胞、SW-1271细胞
EBTr细胞类似产品::RWPE2细胞、SNU869细胞、TSU-Pr1细胞
HCC 70细胞类似产品::Nthy-ori 3-1细胞、SK-MEL28细胞、AC16 [Human hybrid]细胞
LN-229细胞类似产品::RGCs细胞、786-0细胞、hSCC-25细胞
SKO-007细胞类似产品::HCC1833细胞、NBL-5细胞、HKBML细胞
TCC-SUP细胞类似产品::NTERA-2/D1细胞、COLO824细胞、SK-RC-20细胞
NCI-SNU-C2B细胞类似产品::X63-Ag8细胞、SUM 52细胞、GL261细胞
ECC1细胞类似产品::MC3T3-E1 Subclone 24细胞、GM-3573细胞、DKMG细胞
Hos TE-85细胞类似产品::MS1细胞、H650细胞、ACC3细胞
MDA-MB-175VII细胞类似产品::H-2108细胞、SF767细胞、BNL-HCC细胞
NU-GC-3细胞类似产品::MGC803细胞、ACCM细胞、MC 116细胞
MOLM-13细胞类似产品::NCI N87细胞、Sol8细胞、WEHI3B细胞
LC-1细胞类似产品::NCI-H1836细胞、JB6 clone 30, subclone 7b细胞、CO115细胞
NCI-H1385细胞类似产品::TCCSUP细胞、H1703细胞、LYR细胞
MDA.MB.231细胞类似产品::PANC 203细胞、VP267细胞、KY70细胞
CWR22R细胞类似产品::EAhy926细胞、A72细胞、SK_N_BE2C细胞
COLO_320DM细胞类似产品::HANK-1细胞、SUDHL-8细胞、H22细胞
U-CH1细胞类似产品::CAL33细胞、Rin-M-5F细胞、CT26WT细胞
Caki-2细胞类似产品::SK-Mel 1细胞、B16-F10-BL6细胞、MPVECs细胞
Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8细胞类似产品::L 540细胞、RMC细胞、P3-X63-Ag8-653细胞
Asian Medical Center-Head and Neck cancer-8细胞类似产品::L 540细胞、RMC细胞、P3-X63-Ag8-653细胞
NB1RGB细胞类似产品::SK-MEL-2-LUC细胞、H-1819细胞、SHIN-3细胞
EA. hy 926细胞类似产品::SUM190PT细胞、THLE-2细胞、AU 565细胞
NCIH1650细胞类似产品::MUTZ1细胞、Anip973细胞、32Dc3细胞
RPTEC/TERT1细胞类似产品::PTK-2细胞、H1819细胞、NT2细胞
WM-239-A细胞类似产品::Daudi细胞、Jurkat (clone E6-1)细胞、MKN-28细胞
HEH2细胞类似产品::Walker/LLC-WRC256细胞、SNU119细胞、Huh-7.5细胞
BetaTC6细胞类似产品::NIH-OVCAR-3细胞、Hs895.T细胞、A-172细胞
MMAc-SF细胞类似产品::HEB细胞、Kit-225-K6细胞、MB157细胞
P36细胞类似产品::MGSMC细胞、NCIH2227细胞、NHDF细胞
hTERT-HME-1细胞类似产品::293-EBNA细胞、HGF-1细胞、KOPN-8细胞
SUDHL-4细胞类似产品::NCI H345细胞、NW-MEL-38细胞、H-676B细胞
IM-95细胞类似产品::A-204细胞、AMJ2-C8细胞、JB6 Cl 30-7b细胞
751-NA细胞类似产品::EFO27细胞、HeLa.S3细胞、138MG细胞
HPASMC细胞类似产品::SW780细胞、Hs-600-T细胞、PAMC82细胞
HRA 19细胞类似产品::Rat Lung Epithelial-6-T-antigen Negative细胞、NCI-H2444细胞、L02细胞
SAOS 2细胞类似产品::EO771细胞、SU.86细胞、Toledo细胞
H2135细胞类似产品::HCC-1143细胞、Pa14C细胞、OCI-Ly19细胞
MONO-MAC 6细胞类似产品::H-2135细胞、P30/OHK细胞、EOC 20细胞
SKLU01细胞类似产品::WM 239细胞、MM-1S细胞、ATDC-5细胞
Hu-P-T4细胞类似产品::COV362细胞、697细胞、Menschliche Und Tierische Zellkulture-3细胞
COLO829细胞类似产品::HS-695T细胞、L-02细胞、H341细胞
Bovine Turbinate细胞类似产品::MARC-145细胞、TCC-PAN2细胞、RPMI-1846细胞
HS-294细胞类似产品::KPL-4细胞、RIN-m5F细胞、Huh 7.5细胞
Dakiki:人B淋巴复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
SKMES-1细胞类似产品::PCI-04B细胞、MDBK细胞、GES1细胞
Madin-Darby Bovine Kidney细胞类似产品::C3H/10T1/2细胞、WM 239-A细胞、U-266 AR1细胞
SK Mel28细胞类似产品::USMC细胞、KU 812F细胞、RWPE-2细胞
PK136细胞类似产品::NFS60细胞、Vero-76细胞、Institute for Medical Research-90细胞
NBL-3细胞类似产品::RL952细胞、H-2085细胞、WSUDLCL2细胞
WiDr细胞类似产品::HPAF细胞、TOV-112细胞、L cell细胞
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