Dakiki 人B淋巴细胞系

"Dakiki 人B淋巴细胞系
细胞背景资料：B淋巴细胞；EBV转染 
细胞形态：淋巴母细胞样 
细胞培养方面注意的几点：无菌意识要强：实验进行前，超净台以紫外灯照射３０分钟灭菌，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面，并开启超净工作台风扇运转数分钟后，才开始实验操作。每次操作只处理一株细胞株，以避免失误混淆或细胞间污染。实验完毕后，将实验物品带出工作台，以７０%ethanol擦拭无菌操作抬面。无菌操作工作区域应保持清洁及宽敞，必要物品，例如支架、吸管等公用物品可以暂时放置，其它个人实验用品用完应立即拿出。实验用品以７０%乙醇擦拭后才带入无菌操作台内。实验操作应在中央无菌区域，一般勿在边缘区域操作。小心取用无菌之实验物品，避免造成污染。勿碰触吸管尖头部或是容器瓶口，亦不要在打开之容器正上方操作实验。容器打开后，以手夹住瓶盖并握住瓶身，倾斜约４５°角取用，尽量勿将瓶盖盖口朝上放置桌面。选择正确的培养基：不同的细胞可能培养基不同，甚至不同的文献可能对相同的细胞培养基成分也是可能不同的。如我当时培养神经干细胞，有文献就选用neurobase培养基，而我的实验目的主要是做抗氧化和氧化方面的，而这种培养基中含有抗氧化剂成分，此时，我就不得不选择另外一种不含抗氧化剂的培养基。瓶装血清一定要逐步解冻:４℃冰箱全溶后再分装，在溶解过程中须规则摇晃均匀(小心勿造成气泡)，使温度与成分均一，减少沉淀的发生。勿直接由–２０℃直接至３７℃解冻，因温度改变太大，容易造成蛋白质凝结而发生沉淀。热灭活是指５６℃，３０分钟加热已完全解冻之血清。水浴锅升到５６℃后，将血清放入，待温度升高到５６℃后计时，一般５分钟左右规则摇晃均匀一次。此热处理之目的是使血清中之补体成份去活化。除非必须，一般不要作此热处理，因为会造成沉淀物之显著增多，且会影响血清之品质。注意更换新血清(包括不同批次)对细胞的影响。 
细胞生长：悬浮 
细胞物种来源：人源或鼠源等其它物种来源 
Dakiki 人B淋巴细胞系
细胞产品包装：复苏形式：T２５培养瓶(一瓶)或冻存形式：１ml冻存管(两支) 
公司细胞库冻存并保种有2300多种各类细胞系。针对每种不同的细胞系，公司摸索并积累了大量细胞培养条件和优化参数，为您的细胞实验保驾护航。细胞培养是生命科学研究中最基础、也是最常用的实验手段。从冻存→复苏→传代→实验，在每一次细胞培养的过程中我们都是精心呵护，小心培养，心里都是默默承诺：我要护你一世周全！可是可是……无数次细胞都因污染而离我而去，投入的不只是我们貌美如花的青春，还有那一去不复返的经费！在细胞生物学，生物化学，免疫学，神经生物学，病理学……只要涉及细胞的研究领域，都面临着支原体污染的威胁。在众多污染物中，也就属支原体最狡猾了，他最善于隐藏自己，因为被支原体污染的细胞不会马上死亡，但会改变细胞的新陈代谢，甚至会改变细胞的基因表达谱，我们就这样被欺骗了无数次，谁让我们就是个看“颜值”的花痴了。可是我们通过被虐了几百次的经验中总结出来，当你的细胞出现了这些症状时：生长速率改变；活性减弱；形态改变；染色体畸变；转染效率显著降低；细胞复苏后存活率降低……。那你就得千万小心了，也许你的细胞已经被支原体欺凌了！ 
细胞传代方法：１：２-１：３传代；每周换液２-３次。 
细胞来源说明：细胞主要来源ATCC、DSMZ、ECACC、RIKEN、INCell、promocell、ScienCell、ECACC、JCRB、KCLB、Asterand、ICLC以及少数国外著名大学建系 
细胞生长特性：悬浮 
Dakiki 人B淋巴细胞系
如何把细胞养的形态更好更漂亮。１.不同的细胞，喜欢的环境是不一样的。这个不仅仅是说培养基的不同，还有就是细胞生长的空间密度问题。有一些细胞是数量多一点比较好生长，生长状态也比较好。这种一般是属于生长速度慢的细胞。譬如内皮细胞。而有一些是细胞是数量少一点细胞状态会生长的比较好，譬如巨噬细胞和某些肿瘤细胞。尤其是巨噬细胞，生长速度非常得快，贴壁速度很快，所以传代时就应该留很少量的细胞，这样细胞状态会比较好。并且巨噬细胞比较喜欢扎堆生长，而堆与堆之间是有空间的。如果长成相连在一起的一满片的时候，细胞形态基本上就会差了，老化的会比较多，对后期实验结果是不好的。所以在养细胞的时候应该摸索该细胞喜欢的生长空间密度问题。２.对于有些人总是会遇到养的细胞形态怎么都不好的问题。这个其实是有一个方法可以改善的。对于贴壁细胞，如果细胞形态不好，（或者细胞形态不清晰，表面似有异物等）可以在传代的时候进行如下操作：首先，倒掉旧的培养基，加入３ml新的培养基（有无血清的都可）洗涤一次，用滴管吸走，然后再加入３ml的培养基，进行预吹打，控制吹打力度，轻轻地大概沿着瓶底过一遍，然后吸走。这时侯再开始正式的消化、吹打。（巨噬细胞我们只吹打，不消化的）；其次，把吹打下来的细胞悬液加入到新的培养瓶内，培养瓶事先加入培养基，放入培养箱内培养，按时间点观察细胞贴壁情况。１０分钟观察一次，２０分钟，３０分钟观察一次。选择一个时间点，已经有部分细胞贴壁的情况下，重新置于洁净台，底面朝上迅速倒出其中的培养基，加入３ml新培养基再轻轻洗一次。然后加入完全培养基培养。后续观察细胞生长情况以及形态。我称之为“二传”。呵呵。如果一次效果还不理想，可重复多次。直到找到细胞完美形态。其中要注意，结合细胞喜欢的生长情况。喜欢多一点数量长得好的细胞你就等贴壁细胞比较多点的时候再传。反之亦然。３.关于培养瓶内加入培养基的量的问题。这个是要靠自己去摸索你所养的细胞的。并不是小的玻璃方瓶１２ml，大方瓶１４ml的。有些细胞反而是培养基少一点相反细胞形态会长得比较好。（可能也是竞争很大，有优胜劣汰吧。呵呵。）对于生长速度快的细胞，易生长的细胞加少一点培养基细胞形态会更好。但是要注意换液掌握。４.关于选择培养瓶的问题。个人发现生长速度快的细胞在玻璃瓶内生长的状态会比一次性相对好一些。而对于同一种细胞，在其生长旺盛快速的时期在玻璃瓶内的生长状态也比内好。这可能是因为比玻璃瓶更容易贴壁。生长速度快的细胞在这种相对“更安逸”的环境里反而长得状态不如玻璃瓶好。所以对于生长速度慢的细胞如果想要更漂亮的细胞状态，比玻璃瓶会好，对于生长速度慢的细胞，玻璃瓶则会更好。同样，对于同一种细胞，在其生长速度慢的时候，会好一点，比如刚刚复苏的时候，或者原代培养的时候。而在其生长旺盛的时候，玻璃瓶则相对会好一点。 
细胞形态特性：详见细胞说明书 
HIT-T15细胞系相关产品：SMA560细胞、H747细胞、SNU886细胞 
Anip[973]细胞系相关产品：B16BL6细胞、WTRL1细胞、293-EBNA细胞 
LNCaP FGC细胞系相关产品：H446细胞、SMC-1细胞、H1092细胞 
NCI-H524细胞系相关产品：DHL8细胞、IMR32细胞、UPCI-SCC090细胞 
NCI.H226细胞系相关产品：HEC1-B细胞、5-8F细胞、NCI H508细胞 
J-774A.1细胞系相关产品：CEM-CCRF细胞、OCI-Ly 19细胞、PC12(高分化)细胞 
B16 melanoma F10细胞系相关产品：NCIH69细胞、OKT3细胞、EFO-27细胞 
MeSoTheliOma-211H细胞系相关产品：BIU-87细胞、Instituto Biologico-Rim Suino-2细胞、SU-DHL-1细胞 
A 72细胞系相关产品：AC29细胞、SW-579细胞、UPCISCC154细胞 
SNU1040细胞系相关产品：16HBE14o-细胞、PLA-801D细胞、RSC 96细胞 
SW480E细胞系相关产品：MDA-361细胞、NCI-H650细胞、SU-DH-L5细胞 
HT-29/CX-1细胞系相关产品：231-luc细胞、PC-3/M细胞、HL60细胞 
OVCAR-5细胞系相关产品：R 1610细胞、Lieming Xu-2细胞、VSC4.1细胞 
OCILY-19细胞系相关产品：HLEB3细胞、SUM149细胞、CV-1细胞 
IPLB-SF-21-AE细胞系相关产品：SKMEL24细胞、SCC154细胞、JC细胞 
HS766T细胞系相关产品：CTLL(2)细胞、HMO6细胞、PZ-HPV-7细胞 
HS766T细胞系相关产品：CTLL(2)细胞、HMO6细胞、PZ-HPV-7细胞 
C643细胞系相关产品：VCaP细胞、CL1细胞、Hepa1-6细胞 
NCIH69细胞系相关产品：RD 2细胞、H-1963细胞、ASPC1细胞 
KYSE 510细胞系相关产品：NCIH1105细胞、RK 13细胞、Hs737T细胞 
Dakiki 人B淋巴细胞系
SUM 159细胞系相关产品：C8-D1A细胞、IALM细胞、NCI-H2066细胞 
MV(4;11)细胞系相关产品：PC12(高分化)细胞、WISH细胞、451-LU细胞 
EL4细胞系相关产品：MDCK.2细胞、SK-MEL3细胞、SV40-HCEC细胞 
251 MG细胞系相关产品：2BS细胞、NCIH1618细胞、Hep G2/C3A细胞 
U 138 MG细胞系相关产品：A375-MEL细胞、R-1059-D细胞、32D-Cl3细胞 
BE(2)M-17细胞系相关产品：P3X63 AG8-653细胞、GM00637B细胞、50.B1细胞 
STTG1细胞系相关产品：QGY 7701细胞、LNCaP-Clone-FGC细胞、SKRC20细胞 
NCTC 3960细胞系相关产品：MD Anderson-Metastatic Breast-157细胞、HOS/MNNG细胞、JAR细胞 
NCI-N87细胞系相关产品：NRK细胞、NCI-H2196细胞、Fetal Bovine Heart Endothelial细胞 
CZ-1细胞系相关产品：ST细胞、EFO-27细胞、HMC细胞 
HCO细胞系相关产品：SNU368细胞、Wien 133细胞、SJSA-1细胞 
MES-23.5细胞系相关产品：P3J.HR1K细胞、TMD-8细胞、RT4细胞 
rHSC-99细胞系相关产品：624细胞、Onda 11细胞、Panc327细胞 
CHG5细胞系相关产品：BE2-M17细胞、OCI-Ly1细胞、UCLA-SO-M20细胞 
KM-12细胞系相关产品：T8细胞、MZCRC1细胞、U-251 MG细胞 
P3.times.63 Ag8.653细胞系相关产品：KYSE-520细胞、NCI.H460细胞、MM1-S细胞 
AU 565细胞系相关产品：Det 562细胞、OCM1细胞、WC00097细胞 
SUM159PT细胞系相关产品：DMS153细胞、KMH2细胞、BJA-B-1细胞 
NCI-H810细胞系相关产品：ACHN细胞、JB6 Cl 30-7b细胞、H2228细胞 
H-747细胞系相关产品：HPC-Y5细胞、H727细胞、VMRC-LCD细胞 
CV1细胞系相关产品：OVISE细胞、HSC细胞、H-2110细胞 
PL11细胞系相关产品：BHK细胞、Madin Darby Canine Kidney细胞、PF-382细胞 
EO771细胞系相关产品：NCIH841细胞、BALB/3T3 cl. A31细胞、Hs 852.T细胞 
H196细胞系相关产品：WM-2664细胞、HcaF细胞、GM01232细胞 
ARPE19细胞系相关产品：Balb/3T3-4-Cl31细胞、U 937细胞、IM 9细胞 
LL2细胞系相关产品：UMNSAH-DF 1细胞、HL-60细胞、SW 1116细胞 
H1395细胞系相关产品：MIO-M1细胞、Hs840_T细胞、Caco2BBe细胞 
HEK 293-EBNA细胞系相关产品：HIT clone T15细胞、NCIH211细胞、SUM-52-PE细胞 
MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞系相关产品：RINm-5F细胞、3T3-Swiss albino细胞、EBC1细胞 
3T3 L1细胞系相关产品：NL20SV细胞、IEC6细胞、NALM 6细胞 
Mevo细胞系相关产品：Sci-1细胞、BxPC-3细胞、MDA2B细胞 
U138-MG细胞系相关产品：HN-6细胞、ST-2细胞、BIU87细胞 
ReNcell CX细胞系相关产品：HM06.A1细胞、U251MG细胞、P3-x63-Ag8 653细胞 
HNE-3细胞系相关产品：SK ES 01细胞、SK 1细胞、HOS-MNNG细胞 
HCC-1937细胞系相关产品：RBMEC细胞、OE21细胞、MDAMB330细胞 
SGC-7901/DDP细胞系相关产品：CCD-841CoTr细胞、DHL5细胞、LLCPK1细胞 
SIRC细胞系相关产品：YD-15细胞、RPE-hTERT细胞、NIH 3T3细胞 
C-33A细胞系相关产品：NCIH740细胞、CEM-T4细胞、PC3M-IE8细胞 
H-1105细胞系相关产品：UWB1289细胞、Pt K2 (NBL-5)细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞 
H2126细胞系相关产品：AMC-HN-8细胞、NCI-HUT-520细胞、K562/ADP细胞 
C-Lu65细胞系相关产品：MOLP-2细胞、RCC10细胞、NCIH2009细胞 
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Jurkat (clone E6-1)细胞系相关产品：SW756细胞、CEM-CCRF (CAMR)细胞、MOLT-16细胞 
OVCAR.3细胞系相关产品：Vero C1008细胞、SKNEP1细胞、Madin Darby Canine Kidney细胞 
Hs739T细胞系相关产品：OCI-Ly 7细胞、B-cell with DC Morphology细胞、H-2171细胞 
KYSE-50细胞系相关产品：Hs604T细胞、Calu 3细胞、SW 620细胞 
HCC1937细胞系相关产品：JROECL 21细胞、SHSY-5Y细胞、DMS53细胞 
MUG-Chor1细胞系相关产品：Mv1.Lu细胞、L细胞、SW 1783细胞 
SG231细胞系相关产品：K7M2细胞、32Dc3细胞、MRMT-1细胞 
Hs445细胞系相关产品：SK-RC-39细胞、CAL85-1细胞、CEM-C1细胞 
Embryonic Bovine Tracheal cells细胞系相关产品：NCM460细胞、HNE2细胞、DMS 153细胞 
RBL-2H3细胞系相关产品：EFM192B细胞、Farage Original Line细胞、Z-138细胞 
Dunn LM8细胞系相关产品：343MG细胞、D283 Med细胞、LNCaP FGC细胞 
LNCaP FGC细胞系相关产品：H446细胞、Stanford University-Diffuse Histiocytic Lymphoma-2细胞、T-ALL 1细胞 
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