"SU-DHL-2:人弥漫性大细胞淋巴瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:悬浮
冻存和复苏的原则:慢冻快融》当细胞冷到零度以下,可以产生以下变化:细胞器脱水,细胞中可溶性物质浓度升GAO,并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻,可使细胞逐步脱水,细胞内不致产生大的冰晶;相反,结晶就大,大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序:采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时,1~2℃/min;当温度达-25℃以下时,5~10℃/min;当温度达-100℃时,可迅速放入液氮中。2.简易程序:将冷冻管(管口要朝上)放入纱布袋内,纱布袋系以线绳,通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口,按每分钟温度下降1~2℃的速度,在40min内降至液氮表面过夜,次晨投人液氮中。3.传统程序:冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。细胞冻存方法:1.预先配制冻存液》(1)8%DMSO+细胞生长液(92%血清)2.取对数生长期细胞,经胰酶消化后,加入适量冻存液,用吸管吹打制成细胞悬液(1×10(6)~5×10(6)细胞/ml)。3.加入1ml细胞于冻存管中,密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法:1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,轻轻摇动冷冻管,使其在1分钟内全部融化(不要超过3分钟)。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养,24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液,以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂,然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
HOC细胞类似产品::H-2073细胞、293S细胞、H1648细胞
X63细胞类似产品::MPASMC细胞、C8-D1A细胞、SU4细胞
MyLa2059细胞类似产品::SKMEL-24细胞、PC 61 5.3细胞、NCI-H1781细胞
S37细胞类似产品::HBE135-E6E7细胞、Jurkat, Clone E6-1细胞、NCIH716细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:弥漫性大细胞淋巴瘤;胸腔积液转移;女性
SU-DHL-2:人弥漫性大细胞淋巴瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:淋巴母细胞样
RMa-bm细胞类似产品::CT26WT细胞、HEL-92.1.7细胞、HCC2218细胞
Pa017C细胞类似产品::PLA802细胞、CWR22Rv1细胞、Li-7细胞
22Rv-1细胞类似产品::SGC7901细胞、HCC-70细胞、Monomac-1细胞
培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。【冻存细胞】1)选对数增生期细胞(证明无支原体污染),在冻存前1d换液;2)按常规方法把培养细胞制备成悬液,计数,使细胞密度达5×10/ml左右密度,离心,去上清;3)加入配制HAO的冻存液(培养液6.8ml,小牛血清2ml,DMSO 1ml,5.6%NaHCO3 0.1ml),按与去上清相同的量一滴一滴加入离心管中,然后用吸管轻轻吹打令细胞重悬。冻存细胞时培养液中加入保护剂10%二甲基亚砜(DMSO)或甘油,可使冰点降低,使细胞内水分在冻结前透出细胞外;4)分装于无菌冻存管中,每管加1.5m悬液;5)旋HAO冻存管并仔细检查,一定要盖紧,做HAO标记;6)冻存:在殊的仪器或简易的液氮容器中,按-1℃/min的速度,在30~40min时间内,下降到液氮表面,再停30min后,直接投入液氮中。要适当掌握下降冷冻速度,过快能影响细胞内水分透出,太慢则促进冰晶形成。操作时应戴防护眼镜和手套,以免液氮冻伤。【复苏细胞】1)从罐中取出冻存管;2)迅速放入36℃~37℃水浴,不时摇动,使其急速融化,30~60s内完成;3)冻存管用70%酒精擦拭消毒后,打开盖子,用吸管将细胞悬液注入离心管中,再滴加10ml培养液;4)低速离心(500~1000r/min) 5min,去上清后再用培养液洗一次;5)用培养液适当稀释后,装入培养瓶37℃培养,次日更换一次培养液后,继续培养。以后仍按常规进行培养。冻存细胞数量要充分,密度应达到10/ml,在融后稀释20倍时,仍能保持5×10/ml数量。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
SU-DHL-2:人弥漫性大细胞淋巴瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:悬浮
贴壁细胞传代:去掉原T25培养瓶里面的培养基,T25瓶加3-4ml PBS洗1-2次;弃PBS,再加1.5 ml的Trypsin-EDTA(1X)消化液消化细胞,显微镜下观察,待细胞变圆,细胞间隙明显,部分细胞刚开始脱离瓶壁,加4 ml左右完全培养液混匀终止消化,将细胞小心吹打下来,1000rpm/min室温离心5min;弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:2-1:3,1:3-1:6,1:6-1:8),每T25瓶补足培养基至5-6ml,37℃、5%CO2孵箱培养。悬浮细胞传代:一般仅需持续加入新鲜培养基于原培养角瓶中,稀释细胞浓度即可,若培养液太多时,将细胞悬液移入离心管中,1000rpm/min 室温离心5min。弃上清,细胞沉淀用完全培养液重悬,按要求分瓶(视细胞密度而定1:4-1:8),每T25瓶加完全培养液至4-5ml,37℃、5%CO2孵箱培养。有些悬浮细胞趋于成团生长,此时细胞生长状态良HAO,当补液时,需避免反复吹打。
LLC-MK-2细胞类似产品::A-9细胞、SN12CPM6细胞、NCI-H1734细胞
38C-13细胞类似产品::MAVER细胞、HT-3细胞、U343细胞
DI TNC-1细胞类似产品::MXI细胞、KP-4细胞、SW948细胞
NeHepLxHT细胞类似产品::SNU-C2A细胞、SLMT1细胞、SNU449细胞
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Jiyoye (P-2003)细胞类似产品::H-1299细胞、COS1细胞、HMCB细胞
ROS 17/2.8细胞类似产品::HLFa细胞、293 Ad5细胞、UMNSAH-DF 1细胞
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KYSE70细胞类似产品::TF-1细胞、H-1838细胞、52PE细胞
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DR2R 1610细胞类似产品::GNM细胞、DLD 1细胞、Panc2_03细胞
MDA-MB 361细胞类似产品::Roswell Park Memorial Institute 6666细胞、HUASMC细胞、SF-126细胞
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MEF细胞类似产品::OKAC1细胞、SNT-8细胞、C8-D1A细胞
SUDHL8细胞类似产品::OCI Ly19细胞、N1E115细胞、GM05887细胞
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293-FT细胞类似产品::P3-NS1/1Ag 4.1细胞、H-2066细胞、LADMAC细胞
SK LU 1细胞类似产品::EMT6细胞、LA-N-6(OAN)细胞、NCIH1836细胞
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DI TNC-1细胞类似产品::MXI细胞、MDA-MB 468细胞、H-1703细胞
Sp2/O-Ag14细胞类似产品::MUVEC细胞、SJ-RH30细胞、H-87细胞
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H1693细胞类似产品::PC-14细胞、QGY7703细胞、NE1-E6E7细胞
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HT55细胞类似产品::SUM 159PT细胞、UM-UC-14细胞、ML-2细胞
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HuH-28细胞类似产品::MCCAR细胞、Hs934T细胞、Jurkat, Clone E6-1细胞
CV 1细胞类似产品::hADSCs细胞、BALL-1细胞、Z310细胞
IPI-2I细胞类似产品::KP-N-RT-BM-1细胞、Hs870T细胞、TE-14细胞
2B4细胞类似产品::MOPC细胞、PK 15细胞、KY180细胞
H3255细胞类似产品::RCC-4细胞、KP4细胞、KU-812F细胞
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