"A20:小鼠B细胞淋巴瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长:悬浮
冻存和复苏的原则:慢冻快融》当细胞冷到零度以下,可以产生以下变化:细胞器脱水,细胞中可溶性物质浓度升GAO,并在细胞内形成冰晶。如果缓慢冷冻,可使细胞逐步脱水,细胞内不致产生大的冰晶;相反,结晶就大,大结晶会造成细胞膜、纲胞器的损伤和破裂。复苏过程应快融,目的是防止小冰晶形成大冰晶,即冰晶的重结晶。慢冻程序》1.标准程序:采用细胞冻存器》当温度在-25℃以上时,1~2℃/min;当温度达-25℃以下时,5~10℃/min;当温度达-100℃时,可迅速放入液氮中。2.简易程序:将冷冻管(管口要朝上)放入纱布袋内,纱布袋系以线绳,通过线绳将纱布袋固定于液氮罐罐口,按每分钟温度下降1~2℃的速度,在40min内降至液氮表面过夜,次晨投人液氮中。3.传统程序:冷冻管置于4℃10分钟→-20℃30分钟→-80℃16~18小时(或隔夜)→液氮槽长期储存。细胞冻存方法:1.预先配制冻存液》(1)8%DMSO+细胞生长液(92%血清)2.取对数生长期细胞,经胰酶消化后,加入适量冻存液,用吸管吹打制成细胞悬液(1×10(6)~5×10(6)细胞/ml)。3.加入1ml细胞于冻存管中,密封后标记冷冻细胞名称和冷冻日期。液氮长期保存。保存细胞的复苏方法:1.快速解冻》冻存细胞从液氮中取出后,立即放入37℃水浴中,轻轻摇动冷冻管,使其在1分钟内全部融化(不要超过3分钟)。2.解冻后的细胞可直接接种到含完全生长培养液的细胞培养瓶中直接进行培养,24小时后再用新鲜完全培养液替换旧培养液,以去除DMSO。3.如果细胞对冷冻保护剂别敏感解冻后的细胞应先通过离心去除冷冻保护剂,然后再接种到含完全生长培养液的培养瓶中。
细胞物种来源:人源或鼠源等其它物种来源
Centre Antoine Lacassagne-62细胞类似产品::MESSA细胞、IHC-ST1细胞、CEM-CCRF (CAMR)细胞
SUM-149PT细胞类似产品::AU 565细胞、LIM 1215细胞、HEYA8细胞
KMB 17细胞类似产品::MCF10A细胞、COV362细胞、SNU216细胞
2780CP细胞类似产品::KOPN8细胞、TFH细胞、CHP-100细胞
[细胞产品包装]鲜活细胞:T25培养瓶(一瓶)或冻存细胞:1ml冻存管(两支)
细胞背景资料:淋巴瘤;BALB/cAnN
A20:小鼠B细胞淋巴瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞形态:淋巴母细胞样
U-251 MG细胞类似产品::AML-EOL-1细胞、AMO1细胞、PC615.3细胞
LY细胞类似产品::H7721细胞、H35 Reuber细胞、Karpas-422细胞
KE 37细胞类似产品::SU-DHL-4细胞、NCI-H747细胞、KP-N-RT细胞
细胞传代注意事项:①传代培养时注意无菌操作并防止细胞间的交叉污染。所有操作尽量靠近酒精灯火焰。每次ZuiHAO只进行一种细胞的操作。每种细胞使用一套器材;②每天观察细胞形态,掌握HAO细胞是否健康的标准:健康细胞的形态饱满,折光性HAO,生长致密时即可传代;③如发现细胞有污染迹象,应立即采取措施,一般应弃置污染的细胞,如果必须挽救,可加含有抗生素的BBS或培养基反复清洗,随后培养基中加入较大量的抗生素,并经常更换培养基。传代细胞的建系和维持:细胞系的维持通过换液传代再换液、再传代和细胞种子冻存来实现。对每一个细胞系来说都有其自身的点,要做HAO建系的维持必须记录HAO细胞档案,换液传代和做HAO细胞系的管理工作。培养细胞的冻存及复苏:细胞低温冻存是培养室常规工作和通用技术。细胞冻存在-196℃液氮中,储存时间几乎是无限的。细胞冻存及复苏的原则是慢冻快融。
细胞传代方法:1:2-1:3传代;每周换液2-3次。
细胞来源说明:来源于RCB、ATCC、KCLB、DSMZ、ECACC、INCell、ScienCell、ECACC、JCRB、Asterand、ICLC等知名细胞库
A20:小鼠B细胞淋巴瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
细胞生长特性:悬浮
细胞传代后放入培养箱没有摇匀,或者放入时摇匀,但在细胞贴壁前,又移动了培养瓶,频繁开关培养箱引起的振动或者培养瓶中培养液过少,培养箱搁板表面不平整,这些因素会导致细胞生长不均匀。研究人员在细胞培养时出现存活率不佳,常见原因可归纳为:培养基使用错误或培养基品质不佳。血清使用错误或血清的品质不佳。运输过程对细胞有严重影响。解冻过程错误。冷冻细胞解冻后,加以洗涤细胞和离心。悬浮细胞误认为死细胞。培养温度使用错误。细胞置于–80°C 太久。一些悬浮细胞抱团生长是正常现象,大部分悬浮细胞在细胞密度很GAO的情况下,很可能会出现部分细胞抱团生长的现象,聚团细胞很容易死亡并演化成絮状物,殃及周围的悬浮细胞,因此在培养悬浮细胞时需控制HAO细胞密度。如果出现了细胞团,可以通过细胞筛去掉部分较大的细胞团,也可以尝试一下方法:将细胞悬液收集到15ml离心管中,静置20min左右,小心取上层细胞上清培养(该方法只能去除部分较大的细胞团)。部分细胞本身存在一定的空泡(如HepG2,Ishikawa及一些耐药株等),这个是正常现象。如果只有少数细胞有内出现极少空泡,则很可能是细胞状态不佳,可以通过调整血清浓度,控制消化,控制传代比例及时间等方法来调整细胞状态;如果大部分细胞出现空泡,且单个细胞内空泡数目偏多,则可能细胞代次较GAO,细胞老化所致,需更换代次较早的细胞。
H-1299细胞类似产品::T98G细胞、P116细胞、MFE 296细胞
U-87MG细胞类似产品::D341Med细胞、B16/BL6细胞、TT细胞
BC-PAP细胞类似产品::NMCG-1细胞、QG56细胞、WM 239A细胞
CMT-93细胞类似产品::Bac1 2F5细胞、D341MD细胞、H1105细胞
RK-13细胞类似产品::CALU 1细胞、Hep II细胞、MES-23.5细胞
AG06814-N细胞类似产品::H-838细胞、SKNO1细胞、TE8细胞
RBL 1细胞类似产品::DMS79细胞、NIH-OVCAR-3细胞、HeLa S-3细胞
Mel-624细胞类似产品::CCK81细胞、OCI-Ly8细胞、KYSE-30细胞
GM0637细胞类似产品::SUM149细胞、TOV112D细胞、Leukemic 1210细胞
COLO 320 HSR细胞类似产品::DR2R1610细胞、E0771细胞、H-498细胞
SRA 01/04细胞类似产品::HN4细胞、CEM-0细胞、MC38细胞
NCIH1568细胞类似产品::THEECs细胞、118 MG细胞、RPMC细胞
CCD-841-CoN细胞类似产品::DOK细胞、SK MEL 28细胞、LK 2细胞
MC116细胞类似产品::Hs839.T细胞、SCaBER细胞、IHHA-1细胞
293-FT细胞类似产品::P3-NS1/1Ag 4.1细胞、H-2066细胞、LADMAC细胞
A2008细胞类似产品::OsACL细胞、AU-Mel细胞、H-35 Reuber细胞
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Calf Pulmonary Artery Endothelial细胞类似产品::GTL16细胞、T47-D细胞、MDA-468细胞
16-HBE14o细胞类似产品::SN12-PM6细胞、HEC1-B细胞、P-388D1细胞
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JROECL 19细胞类似产品::BI-Mel细胞、KRC Y细胞、HBSMC细胞
Sun Yat-sen university Ophtalmic center-Retinoblastoma 50细胞类似产品::Hs822T细胞、SNU-449细胞、U266 B1细胞
L-5178-Y细胞类似产品::Clone 929细胞、MD Anderson-Metastatic Breast-330细胞、GM03569D细胞
A20:小鼠B细胞淋巴瘤复苏细胞(提供STR鉴定图谱)
Y3-Ag1,2,3细胞类似产品::HO-8910细胞、CD18/HPAF细胞、LLC-MK2细胞
M20 [Human melanoma]细胞类似产品::WM115细胞、MeT5A细胞、SUM 159细胞
HCCC9810细胞类似产品::Hs 840.T细胞、MEL细胞、Human Lung Microvascular Endothelial Cell line-5a细胞
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MSB1细胞类似产品::LIPF178C细胞、HGC-27细胞、KPL1细胞
PG-4 (S+L-)细胞类似产品::SB细胞、MCF7细胞、COC1/CDDP细胞
Li-7细胞类似产品::NCTC clone 929细胞、Balb/3T3-4-Cl31细胞、VM-CUB-I细胞
NRK49F细胞类似产品::SN4741细胞、GM04678细胞、3T3-L1 ad细胞
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U-118 MG细胞类似产品::DH82细胞、NTHY-ORI3.1细胞、Ontario Cancer Institute-Acute Myeloid Leukemia-3细胞
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SW 1222细胞类似产品::H-2029细胞、T. T细胞、CAL 51细胞
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RBL 1细胞类似产品::DMS79细胞、NIH-OVCAR-3细胞、HeLa S-3细胞
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McARH7777细胞类似产品::NCIADR.RES细胞、MRCV细胞、MASMC细胞
HT-29细胞类似产品::HS578细胞、HBL-1 [Human diffuse large B-cell lymphoma]细胞、HcerEpic细胞
McA-RH 7777细胞类似产品::H157细胞、Gerner 7666细胞、COR-L279细胞
XuanWei Lung Cancer-05细胞类似产品::GM 2132细胞、MFE 280细胞、R D细胞
LTEPsm细胞类似产品::NCI-H596细胞、ONS76细胞、LC-1/sq细胞
16-HBEo细胞类似产品::Normal Rat Kidney-49F细胞、OSC-19细胞、NCIH1915细胞
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OCI-AML3细胞类似产品::HCC0078细胞、UPCI:SCC90细胞、P3X63Ag8.653细胞
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NCI-SNU-398细胞类似产品::SCC-9细胞、MDA 231-LM2-4175细胞、SNU423细胞
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TW 01细胞类似产品::A20细胞、ECC-1细胞、SC细胞
TW 01细胞类似产品::A20细胞、ECC-1细胞、SC细胞
HEP-3B2细胞类似产品::CNE-2Z细胞、OCLY8细胞、KMM-1细胞
Mahlavu细胞类似产品::Sp2/0-Ag14细胞、MB468细胞、HO-1-N-1细胞
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L-M (TK-)细胞类似产品::Sp2/0细胞、SKGT2细胞、SKG IIIa细胞
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KNS-81细胞类似产品::H-1876细胞、RS1细胞、BRL 3A细胞
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