具有下列特点:
1. 一站式,足够 50 次酶切-连接反应、50 次预扩反应和 1600 次 AFLP PCR(PCR 按 30 uL 体系计算),但不包括 DNA 纯化和带型分析试剂(如 PAGE 电泳试剂和 银染试剂)。
2. 本系列产品提供 EcoRI-MseI 组合,适用于 GC 含量在 50%以上的基因组。对 GC 含量在 50%以下的基因组,需从本公司采购 AFLP(EcoRI-TaqI)组合。
3. 各种参数都经过优化,一次 PCR 所得 AFLP 片段数一般在 10-100 之间,可重复 性好,误差小于 0.6%。4. 本产品适用于基因组在 500 Mb-6000 Mb 的材料(如动物和植物),对于基因组 在 50-500 Mb 的材料(如细菌和真菌)或 50Mb 以下的材料(如质粒,cosmid, BAC,YAC 和 PAC 等),需要分别另购专门的+1 型预扩引物混合液和+3 型 EcoRI 引物(8 种)AFLP 引物对。
服务流程:
接受订单及样品——RNA提取——RNA质量检测——样品cDNA合成——定量试验——数据分析——结果交付——售后服务。
产品名称 | 英文名称 | 货号 |
透明毛圆线虫探针法荧光定量PCR试剂盒 | Trichostrongylus vitrinus | XGR97340 |
【结果分析条件设定】
u 基线(Baseline)设定:应选择该次实验指数扩增前所有样本荧光信号比较稳定的一段区域(所有样本荧光信号无较大波动),起始点(Start)应避开荧光采集起始阶段的信号波动,终止点(End)应比最早出现指数扩增的样本Ct值减少1~3个循环,建议基线设为6~15。
u 阈值(Threshold)设定:将阈值线设定在刚好超过正常阴性质控品扩增曲线的最高点。
【质控标准】
1. 阴性质控品的检测结果应为阴性,无指数扩增期,Ct=40或无Ct;
2. 阳性质控品的检测结果应为阳性,有明显的指数扩增期,Ct值应小于等于35;
3. 以上要求需在一次实验中同时满足,否则该次实验视为无效。
【结果判断】
1. 阳性:有明显的指数扩增期,且Ct<38;
2.可疑:有明显的指数扩增期,且38≤Ct<40,此时样本为可疑样本;对于可疑样本建议复核一次,若复核结果Ct<40且有指数扩增期,则判定为阳性,否则判定为阴性;
3. 阴性:无指数扩增期,Ct=40或无Ct值均判定为阴性样本。
【对检验结果的解释】
1. 实验室环境污染、试剂污染、样品交叉污染会出现假阳性结果;
2. 试剂运输、保存不当或试剂配制不准确引起的试剂检测效能下降,可能会导致出现假阴性结果。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
ACHN, 人肾细胞腺癌细胞 胚肺细胞,HLF细胞 Hep 3B2.1-7 [Hep 3B; Hep-3B; Hep3B](人肝癌细胞)米卡芬净钠Micafungin 质量规格:>97%,BR
小鼠B细胞杂交瘤细胞;SH2羊藿苷F2Icariside F2质量规格:BR,美国进口
RTN4R Others Mouse 小鼠 RTN4R / NOGOR 人细胞裂解液 (阳性对照) 多韦替尼Dovitinib质量规格:>99%,BR
人胰腺癌细胞;PANC-1乙酰黄芪皂苷IAcetytastragaloside质量规格:HPLC≥98%
CD99 Others Rat 大鼠 CD99 人细胞裂解液 (阳性对照) 5-苯基-2,4-戊二1酸(标准品)5-Phenyl-2,4-pentadienoic acid质量规格:>98%,标准品
ZR-75-30人癌细胞 Human breast cancer cell line ZR-75-30 RPMI-1640(GIBCO)+10%FBSβ-羟基它莫西芬β-Hydroxy Tamoxifen质量规格:美国进口
FIGF Protein Rat 重组大鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (Fc 标签)顺式-β-羟基它莫西芬cis-β-Hydroxy Tamoxifen质量规格:美国进口
大鼠星形胶质细胞(RA)(5×105) Caki-1, 人肾透明细胞癌皮肤转移细胞 Human(S)-盐酸乐卡地平(S)-Lercanidipine Hydrochloride质量规格:美国进口
非洲绿猴肾细胞;VERO C1008 (E6)外消旋N-去甲基异丙嗪rac N-Demethyl Promethazine质量规格:美国进口
HMGB1 Others Mouse 小鼠 HMGB1 / HMG1 人细胞裂解液 (阳性对照) 异丙嗪亚砜Promethazine Sulfoxide质量规格:美国进口
IL1RN Protein Rat 重组大鼠 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 标签)盐酸托莫西汀(标准品)质量规格:HPLC>99%,标准品Atomoxetine HCl
透明毛圆线虫探针法荧光定量PCR试剂盒NCI-H596(人肺腺鳞癌细胞) 5×106cells/瓶×2 cv-1(非洲绿猴肾细胞)阿托伐醌,阿托喹酮质量规格:>98.5%,USP32,BR,可用于细胞培养Atovaquone
CL-0432RTE(大鼠气管上皮细胞)5×106cells/瓶×2阿托伐醌,阿托喹酮(标准品)质量规格:HPLC>98%,标准品Atovaquone
IL23 Others Mouse 小鼠 IL-23 / IL23A & IL12B Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) 阿西替尼质量规格:>99%,VEGFR 抑制剂,细胞培养级Axitinib
人肠微血管内皮细胞RNAHIMEC miRNA5 μg阿扎哌隆质量规格:>99%Azaperone
大鼠垂体细胞(RPC)(1×106) A549/DDP, 人肺腺癌耐药细胞株 Human全反式 5,6-环氧视黄酸质量规格:美国进口all-trans 5,6-Epoxy Retinoic Acid
人羊膜细胞;WISH9-顺式-视黄酸质量规格:美国进口9-cis-Retinoic acid
IL17RB Others Human 人 IL17BR / IL17RB / IL-17 Receptor B 人细胞裂解液 (阳性对照) 4-酮基13-顺式-视黄酸质量规格:美国进口4-Keto 13-cis-Retinoic Acid
CL-0343HA(人羊膜细胞)5×106cells/瓶×24-酮基9-顺式视黄酸质量规格:美国进口4-Keto 9-cis Retinoic Acid
P3-NS-1/1-Ag4.1细胞,骨髓瘤细胞 人T细胞白血病细胞,6T-CEM细胞 EB病毒转化的人B细胞;KM94024-叔丁基邻苯二甲腈(>98.0%(GC)(N))质量规格:>98.0%(GC)(N)4-tert-Butylphthalonitrile
实验外包:
1.基因组学:基因芯片、SNP检测、DNA甲基化检测、生物信息学分析
2.转录组学:microRNA芯片、LncRNA芯片、表达谱芯片、RNA-seq
3.蛋白质组学:2D-DIGE、SILAC、iTRAQ、TMT、Label-free、MRM
4.基因检测:DNA/RNA提取、RT-PCR、Real-timePCR
5.蛋白质检测:Western blot、Co-ip EMSA、CHIP、免疫荧光、ELISA
6.病理检测:HE染色、特殊染色、组织切片、免疫组化、流式细胞分选
7.代谢组学:GC-MS、LC-MS、NMR
8.细胞及动物模型:原代细胞、细胞模型、动物模型构建