储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 产品仅供科研血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
产品名称:马动脉炎病毒(EAV)核酸
英文名称:详见说明书
编号: FSP2923
分类:核酸检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
Human Smad3/MADH3(Mothers Against Decapentaplegic Homolog 3) ELISA KitMouse MCP-1(Monocyte Chemotactic Protein 1) ELISA Kit甲醇蛋白定量样品预处理试剂
Human SMAD2(Mothers against decapentaplegic homolog 2) ELISA KitMouse MDC/CCL22(Macrophage-Derived Chemokine) ELISA Kit甲醇BCA蛋白质浓度定量试剂盒
Human APOM(Apolipoprotein M) ELISA KitMouse MMP-12(Matrix Metalloproteinase 12) ELISA Kit2-氯-3-氟异烟酸甲酯LOWRY蛋白质浓度定量试剂盒
Human APOD(Apolipoprotein D) ELISA KitMouse MMP-2(Matrix Metalloproteinase 2) ELISA Kit2-氯-3-氟异烟酸甲酯NINHYDRIN蛋白质浓度定量试剂盒
Human CXCR4(C-X-C chemokine receptor type 4) ELISA KitMouse MMP-3(Matrix Metalloproteinase 3) ELISA Kit2-氯-3-氟异烟酸甲酯NITRATION蛋白质浓度定量试剂盒
Human AMY2(Amylase Alpha 2, Pancreatic) ELISA KitMouse MMP-9(Matrix Metalloproteinase 9) ELISA Kit2-氯-3-氟异烟酸甲酯FRUORESCAMINE蛋白质浓度荧光定量试剂盒
Human DDAH2(N(G),N(G)-dimethylarginine dimethylaminohydrolase 2) ELISA KitMouse MSP/MST1 ELISA Kit2-氯-3-氟异烟酸甲酯蛋白活性稳定液
Human HIG2(Hypoxia-inducible gene 2 protein) ELISA KitMouse NRP1(Neuropilin-1) ELISA Kit7-甲氧基吲哚蛋白饱和溶液
马动脉炎病毒(EAV)核酸97%20mgTranscription Factor/Activator Protein 1 你 10329-75-6Rat monocyte chemotactic protein 3, MCP-3 Elisa Kit HPLC95%97%20mgSTA-IgG进口、国产用于链球菌的增菌培养英文名称:Morphine Monohydrate CII (AS)50mg重组人 CD27 / TNFRSF7 蛋白 (Fc 标签)特价促销123483-19-2高端化学试剂组织金属蛋白酶抑制因子2(TIMP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%97%20mgSTA-IgG7389-87-9高端化学试剂Human Hya]uronate binding protein, HABP Elisa Kit进口、国产用于链球菌的分离培养;细菌的赖氨酸、吲哚和动力复合生化试验英文名称:Cetylpyridinium Chloride500mg重组人 SLITRK6 蛋白 (His 标签)13849-90-6高端化学试剂内皮细胞TEK酪氨酸激酶(Tie2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%97%20mgGliadin43-4913515-97-4高端化学试剂Human cross linked N-telopeptide of type Ⅰ collagen, NTX Elisa Kit
97%20mgTransforming growth factor-beta-induced protein ig-h3,TGFBI/BIGH3 ELISA kit 10329-75-6Rat monocyte chemotactic protein 3, MCP-3 Elisa Kit HPLC95%97%20mgGliadin43-49进口、国产用于链球菌的分离培养;细菌的赖氨酸、吲哚和动力复合生化试验英文名称:Cetylpyridinium Chloride500mg重组人 SLITRK6 蛋白 (His 标签)13849-90-6高端化学试剂内皮细胞TEK酪氨酸激酶(Tie2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%97%20mgGliadin43-4913515-97-4高端化学试剂Human cross linked N-telopeptide of type Ⅰ collagen, NTX Elisa Kit进口、国产链球菌的选择性分离培养英文名称:Chlorobutanol200mg重组人 SAE1 蛋白 (His & GST 标签)特价供应145134-63-0高端化学试剂免疫球蛋白样EGF样域酪氨酸激酶1(Tie1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%97%20mgAMY113515-97-4高端化学试剂Human cross linked N-telopeptide of type Ⅰ collagen, NTX Elisa Kit
97%20mgTGFBR3 ELISA Kit 10333-92-3Rat Macrophage Colony-Stimulating Factor, M-CSF Elisa Kit HPLC95%97%20mgAMY1进口、国产链球菌的选择性分离培养英文名称:Chlorobutanol200mg重组人 SAE1 蛋白 (His & GST 标签)特价供应145134-63-0高端化学试剂免疫球蛋白样EGF样域酪氨酸激酶1(Tie1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%97%20mgAMY113515-97-4高端化学试剂Human cross linked N-telopeptide of type Ⅰ collagen, NTX Elisa Kit进口、国产蜡样芽孢杆菌的溶血测试验英文名称:Edetic Acid200mg重组人 CFHR2 / FHR2 / HFL3 蛋白 (His 标签)现货促销522-94-1高端化学试剂免疫球蛋白样EGF样域酪氨酸激酶1(Tie1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%98%20mgZP-Ab13515-97-4高端化学试剂Human Helicobacter pylori IgM, Hp-IgM Elisa Kit
98%20mgtransforming growth factor β receptor 2,TGF-βR2 ELISA kit 10333-92-3Rat Macrophage Colony-Stimulating Factor, M-CSF Elisa Kit HPLC95%98%20mgZP-Ab进口、国产蜡样芽孢杆菌的溶血测试验英文名称:Edetic Acid200mg重组人 CFHR2 / FHR2 / HFL3 蛋白 (His 标签)现货促销522-94-1高端化学试剂免疫球蛋白样EGF样域酪氨酸激酶1(Tie1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%98%20mgZP-Ab13515-97-4高端化学试剂Human Helicobacter pylori IgM, Hp-IgM Elisa Kit进口、国产蜡样芽孢杆菌的溶血试验英文名称:Sulfasalazine 125mg重组人 PARVA / Actopaxin 蛋白 (GST 标签)特价促销31768-94-2高端化学试剂基质细胞衍生因子1(SDF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%98%20mgHCG-Ab 5619-04-5高端化学试剂Human Helicobacter pylori IgM, Hp-IgM Elisa Kit
98%20mgTGFBR1 ELISA Kit 103404-90-6Rat Macrophage-Derived Chemokine, MDC Elisa Kit HPLC95%98%20mgHCG-Ab进口、国产蜡样芽孢杆菌的溶血试验英文名称:Sulfasalazine 125mg重组人 PARVA / Actopaxin 蛋白 (GST 标签)特价促销31768-94-2高端化学试剂基质细胞衍生因子1(SDF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%98%20mgHCG-Ab 5619-04-5高端化学试剂Human Helicobacter pylori IgM, Hp-IgM Elisa Kit进口、国产饮用水中导生细菌分离培养英文名称:Tolazoline Hydrochloride 300mg重组人 Tubulin folding cofactor A / TBCA 蛋白2901-66-8高端化学试剂干细胞因子受体(SCFR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%99%20mgNAD 5619-04-5高端化学试剂Human Cytotoxin-associated protein, CagA Elisa Kit
99%20mgTSC22 ELISA Kit 103404-90-6Rat Macrophage-Derived Chemokine, MDC Elisa Kit HPLC95%99%20mgNAD进口、国产饮用水中导生细菌分离培养英文名称:Tolazoline Hydrochloride 300mg重组人 Tubulin folding cofactor A / TBCA 蛋白2901-66-8高端化学试剂干细胞因子受体(SCFR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%99%20mgNAD 5619-04-5高端化学试剂Human Cytotoxin-associated protein, CagA Elisa Kit进口、国产检测水中的大肠菌群英文名称:Levodopa 200mg重组人 VASN / Vasorin 蛋白 (His 标签)特价供应24815-24-5高端化学试剂干细胞因子受体(SCFR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%99%20mgELOVL5 5619-04-5高端化学试剂Human Cytotoxin-associated protein, CagA Elisa Kit
99%20mgTransforming Growth factor β3,TGF-β3 ELISA kit 103429-32-9Rat macrophage inflammatory protein 2, MIP-2 Elisa KitHPLC95%99%20mgELOVL5进口、国产检测水中的大肠菌群英文名称:Levodopa 200mg重组人 VASN / Vasorin 蛋白 (His 标签)特价供应24815-24-5高端化学试剂干细胞因子受体(SCFR)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%99%20mgELOVL5 5619-04-5高端化学试剂Human Cytotoxin-associated protein, CagA Elisa Kit进口、国产水中细菌总数的检测英文名称:Pantolactone500mg重组人 LMAN2L 蛋白 (His 标签)现货促销639-30-5高端化学试剂CD40配体(CD40L)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%98%20mgIgD5868-59-7高端化学试剂Human gastric inhibitory polypeptide, GIP Elisa Kit
98%20mgTGF β2 ELISA Kit 10347-81-6Rat macrophage inflammatory protein 2, MIP-2 Elisa KitHPLC95%98%20mgIgD5进口、国产水中细菌总数的检测英文名称:Pantolactone500mg重组人 LMAN2L 蛋白 (His 标签)现货促销639-30-5高端化学试剂CD40配体(CD40L)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%98%20mgIgD5868-59-7高端化学试剂Human gastric inhibitory polypeptide, GIP Elisa Kit进口、国产饮用水中总大肠菌群多管发酵法检验英文名称:Lactose Monohydrate 500mg重组人 KDM1 / LSD1 蛋白 (His & GST 标签)特价促销474-48-6高端化学试剂CD30配体(CD30L)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%98%20mgLHR868-59-7高端化学试剂Human gastric inhibitory polypeptide, GIP Elisa Kit
98%20mgTGF-β1 ELISA kit 10347-81-6Rat macrophage inflammatory protein 3β, MIP-3β Elisa KitHPLC95%98%20mgLHR进口、国产饮用水中总大肠菌群多管发酵法检验英文名称:Lactose Monohydrate 500mg重组人 KDM1 / LSD1 蛋白 (His & GST 标签)特价促销474-48-6高端化学试剂CD30配体(CD30L)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%98%20mgLHR868-59-7高端化学试剂Human gastric inhibitory polypeptide, GIP Elisa Kit进口、国产运送肠道致病菌标本英文名称:Benoxinate Hydrochloride200mg重组人 Lysozyme G-like 1 / LYG1 蛋白 (His 标签)21956-56-9高端化学试剂调节激活正常T-细胞表达分泌因子(RANTES)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%98%20mgFSHR868-59-7高端化学试剂Human gastrin-reliasing peptide, GRP Elisa Kit
98%20mgTGF-α ELISA Kit 103478-58-6Rat macrophage inflammatory protein 3β, MIP-3β Elisa KitHPLC95%98%20mgFSHR进口、国产运送肠道致病菌标本英文名称:Benoxinate Hydrochloride200mg重组人 Lysozyme G-like 1 / LYG1 蛋白 (His 标签)21956-56-9高端化学试剂调节激活正常T-细胞表达分泌因子(RANTES)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%98%20mgFSHR868-59-7高端化学试剂Human gastrin-reliasing peptide, GRP Elisa Kit进口、国产饮用水中大肠菌群滤膜法检验英文名称:Nitrofurazone 200mg重组人 FcERI / FCER1A 蛋白 (His 标签)特价供应108-54-3高端化学试剂胎盘生长因子(PLGF)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%98%20mgPFKFB3868-59-7高端化学试剂Human gastrin-reliasing peptide, GRP Elisa Kit
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
数据采集:
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm,发射光谱在 530nm。
数据处理:
以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。