PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
产品名称:口蹄疫病毒A型(FMDV-A)核酸检测试剂盒
英文名称:详见说明书
编号: FSP2888
分类:核酸检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 产品仅供科研从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
数据采集:
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm,发射光谱在 530nm。
数据处理:
以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。
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Human CCDC82(Coiled-coil domain-containing protein 82) ELISA KitHuman PGRN(Progranulin) ELISA Kit十二烷基硫酸锂微型RNA(miRNA)同位素探针制备试剂盒
Human APOC4(Apolipoprotein C-IV) ELISA KitHuman CFHR2(Complement factor H-related protein 2) ELISA KitL-丙氨酸甲酯盐酸盐特定微型RNA(miRNA)扩增引物合成
Human S100A2(Protein S100-A2) ELISA KitHuman CAGE1(Cancer associated gene 1 protein) ELISA KitL-丙氨酸甲酯盐酸盐特定成熟微型RNA(miRNA)分子合成
Human COMT(Catechol O-methyltransferase) ELISA KitHuman DSP(Dentin Sialoprotein) ELISA KitL-丙氨酸甲酯盐酸盐特定成熟微型RNA(miRNA)反义抑制剂合成
Human CCT8L1P(Putative T-complex protein 1 subunit theta-like 1) ELISA KitHuman S100 Protein ELISA KitL-丙氨酸甲酯盐酸盐特定成熟微型RNA(miRNA)2位修饰抑制剂合成
Human DHFR(Dihydrofolate reductase) ELISA KitHuman CLUSTERIN ANTIBODY(CLUSTERIN ANTIBODY) ELISA Kit酒石酸氧锑钾微型RNA(miRNA)目标基因探测试剂盒
Human IFNA10(Interferon alpha-10) ELISA KitHuman CCL1(Chemokine C-C-Motif Ligand 1) ELISA Kit酒石酸氧锑钾微型RNA(miRNA)表达载体连接试剂盒
口蹄疫病毒A型(FMDV-A)核酸检测试剂盒TQ1 马来酰亚胺20mg 1072-97-5Rat Factor Ⅷ-related Antigen, FⅧAg Elisa KitHPLC98%TQ1 马来酰亚胺20mgpro-IL-1β进口、国产英文名称:Methoxyflurane1ml重组 Human Serum Albumin / HSA / ALB 蛋白特价供应7554-90-796T粘蛋白17(MUC17)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%TQ1 马来酰亚胺20mgpro-IL-1β68-41-7高端化学试剂Human Brain derived neurotrophic facor, BDNF Elisa Kit进口、国产BR英文名称:50mg重组人 CXCL14 / BRAK 蛋白现货促销560-66-796T性别决定区Y框蛋白1(SOX1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%TQ1 琥珀酰亚胺酯20mgRORC268-41-7高端化学试剂Human Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule, ALCAM Elisa Kit
TQ1 琥珀酰亚胺酯20mg 1072-98-6Rat Factor Ⅷ-related Antigen, FⅧAg Elisa KitHPLC98%TQ1 琥珀酰亚胺酯20mgRORC2进口、国产BR英文名称:50mg重组人 CXCL14 / BRAK 蛋白现货促销560-66-796T性别决定区Y框蛋白1(SOX1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%TQ1 琥珀酰亚胺酯20mgRORC268-41-7高端化学试剂Human Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule, ALCAM Elisa Kit进口、国产英文名称:50mg重组人 EGFL6 / EGF-L6 蛋白 (His 标签)特价促销127191-86-096T性别决定区Y框蛋白2(SOX2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%TQ2酸 20mgMAC68-41-7高端化学试剂Human Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule, ALCAM Elisa Kit
TQ2酸 20mg 1072-98-6Rat Pyruvate Kinase, M2-PK Elisa KitHPLC98%TQ2酸 20mgMAC进口、国产英文名称:50mg重组人 EGFL6 / EGF-L6 蛋白 (His 标签)特价促销127191-86-096T性别决定区Y框蛋白2(SOX2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%TQ2酸 20mgMAC68-41-7高端化学试剂Human Activated Leukocyte Cell Adhesion Molecule, ALCAM Elisa Kit进口、国产BR英文名称:Cathinone Hydrochloride CI50mg重组人 CCL27 / CTACK 蛋白 (His 标签)41365-32-696T性别决定区Y框蛋白3(SOX3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%TQ2胺 20mgAPMAP534-03-2高端化学试剂Human Activin A, ACV-A Elisa Kit
TQ2胺 20mg 1072-98-6Rat Pyruvate Kinase, M2-PK Elisa KitHPLC98%TQ2胺 20mgAPMAP进口、国产BR英文名称:Cathinone Hydrochloride CI50mg重组人 CCL27 / CTACK 蛋白 (His 标签)41365-32-696T性别决定区Y框蛋白3(SOX3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%TQ2胺 20mgAPMAP534-03-2高端化学试剂Human Activin A, ACV-A Elisa Kit进口、国产英文名称:Triamcinolone Acetonide500mg重组人 SPHK1 / Sphingosine Kinase 1 蛋白特价供应17313-52-996T激肽释放酶9(KLK9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%TQ2 CPG *500 Å*20mgCYP19A1534-03-2高端化学试剂Human Activin A, ACV-A Elisa Kit
TQ2 CPG *500 Å*20mg 1073-05-8Rat acetylcholine receptor antibody, AChRab Elisa KitHPLC98%TQ2 CPG *500 Å*20mgCYP19A1进口、国产英文名称:Triamcinolone Acetonide500mg重组人 SPHK1 / Sphingosine Kinase 1 蛋白特价供应17313-52-996T激肽释放酶9(KLK9)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%TQ2 CPG *500 Å*20mgCYP19A1534-03-2高端化学试剂Human Activin A, ACV-A Elisa Kit进口、国产BR,90%英文名称:Clidinium Bromide500mg重组人 ERK3 / MAPK12 / P38-gamma 蛋白现货促销160896-49-196T视网膜钙黏附蛋白(RCAD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC99%TQ2 CPG *1000 Å*20mgCD47534-03-2高端化学试剂human Neuregulin 1, NRG-1 Elisa Kit
TQ2 CPG *1000 Å*20mg 1073-05-8Rat acetylcholine receptor antibody, AChRab Elisa KitHPLC99%TQ2 CPG *1000 Å*20mgCD47进口、国产BR,90%英文名称:Clidinium Bromide500mg重组人 ERK3 / MAPK12 / P38-gamma 蛋白现货促销160896-49-196T视网膜钙黏附蛋白(RCAD)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC99%TQ2 CPG *1000 Å*20mgCD47534-03-2高端化学试剂human Neuregulin 1, NRG-1 Elisa Kit进口、国产BR英文名称:Enalapril Maleate200mg重组人 CARKL / SHPK 蛋白特价促销104195-61-196TGATA结合蛋白3(GATA3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%TQ2马来酰亚胺 20mgA1616-91-1高端化学试剂human Neuregulin 1, NRG-1 Elisa Kit
TQ2马来酰亚胺 20mg 1073-05-8Rat Gamma-aminobutyric acid, GABA Elisa KitHPLC98%TQ2马来酰亚胺 20mgA1进口、国产BR英文名称:Enalapril Maleate200mg重组人 CARKL / SHPK 蛋白特价促销104195-61-196TGATA结合蛋白3(GATA3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%TQ2马来酰亚胺 20mgA1616-91-1高端化学试剂human Neuregulin 1, NRG-1 Elisa Kit进口、国产英文名称:Beta Cyclodextrin250mg重组人 PDHA1 / C54G1 蛋白1 (aa 30-390)76296-73-696T钙非依赖性脂酶A2(iPLA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC99%TQ2琥珀酰亚胺酯 20mgCD68616-91-1高端化学试剂Human Atrial Natriuretic Peptide, ANP Elisa Kit
TQ2琥珀酰亚胺酯 20mg 1073-06-9Rat Gamma-aminobutyric acid, GABA Elisa KitHPLC99%TQ2琥珀酰亚胺酯 20mgCD68进口、国产英文名称:Beta Cyclodextrin250mg重组人 PDHA1 / C54G1 蛋白1 (aa 30-390)76296-73-696T钙非依赖性脂酶A2(iPLA2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC99%TQ2琥珀酰亚胺酯 20mgCD68616-91-1高端化学试剂Human Atrial Natriuretic Peptide, ANP Elisa Kit 进口、国产诊断试剂用英文名称:20mg重组人 CD300A 蛋白 (Fc 标签)特价供应76296-74-796Tα-血红蛋白稳定蛋白(αHSP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%TQ3 酸20mgPⅡCP616-91-1高端化学试剂Human Atrial Natriuretic Peptide, ANP Elisa Kit
TQ3 酸20mg 1073-06-9Rat 5-Hydroxytryptamine, 5HT Elisa KitHPLC95%TQ3 酸20mgPⅡCP进口、国产诊断试剂用英文名称:20mg重组人 CD300A 蛋白 (Fc 标签)特价供应76296-74-796Tα-血红蛋白稳定蛋白(αHSP)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%TQ3 酸20mgPⅡCP616-91-1高端化学试剂Human Atrial Natriuretic Peptide, ANP Elisa Kit 进口、国产BR英文名称:Cefmenoxime Hydrochloride350mg重组人 BTC / Betacellulin 蛋白现货促销136040-43-296T粘蛋白1(MUC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%TQ3胺20mgPⅡBNP616-91-1高端化学试剂Human dopamine D2 receptor, D2R Elisa Kit
TQ3胺20mg 1073-06-9Rat 5-Hydroxytryptamine, 5HT Elisa KitHPLC95%TQ3胺20mgPⅡBNP进口、国产BR英文名称:Cefmenoxime Hydrochloride350mg重组人 BTC / Betacellulin 蛋白现货促销136040-43-296T粘蛋白1(MUC1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC95%TQ3胺20mgPⅡBNP616-91-1高端化学试剂Human dopamine D2 receptor, D2R Elisa Kit进口、国产BR英文名称:Leflunomide200mg重组人 SLAMF6 / Ly108 蛋白 (Fc 标签)特价促销96562-88-896T性别决定区Y框蛋白18(SOX18)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%TQ3 CPG *500 Å*20mgPⅡANP616-91-1高端化学试剂Human dopamine D2 receptor, D2R Elisa Kit
储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。