储存条件:
仅用于科研14℃或-20℃样品收集、处理及保存方法
1. 血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000 转离心10 分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2. 产品仅供科研血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000 转离心30 分钟取上清。
3. 细胞上清液:3000 转离心10 分钟去除颗粒和聚合物。
4. 组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。3000 转离心10 分钟取上清。
5. 保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
产品名称:猪内源性逆转录病毒前病毒PCR试剂盒
英文名称:详见说明书
编号: FSP2814
分类:PCR检测试剂盒
储存条件:-20℃避光保存,避免反复冻融。
运输:低温、避光,快递免费送货上门。
PCR实验方法步骤:
方法
1:在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。
10×PCR buffer
5 μl dNTP mix (2mM)
4 μl 引物1(10pM)
2 μl 引物2(10pM)
2 μl Taq酶 (2U/μl)
1 μl DNA模板(50ng-1μg/μl)
1 μl 加ddH2O至 50 μl
视PCR仪有无热盖,不加或添加石蜡油。
2:调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上,执行扩增。一般:在93℃预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循环30-35次,在72℃ 保7min。
3:伴放线放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒结束反应,PCR产物放置于4℃待电泳检测或-20℃长期保存。
4:PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100μl氯仿进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。
Human RNASET2(Ribonuclease T2) ELISA KitHuman LTA4H(Leukotriene A4 Hydrolase) ELISA Kit4-羟基苯硼酸频哪醇酯 载玻片细胞ANDROGEN RECEPTOR 蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
Human RPS6Kβ1(Ribosomal Protein S6 Kinase Beta 1) ELISA KitHuman LTβ(Lymphotoxin Beta) ELISA Kit4-羟基苯硼酸频哪醇酯 冰冻切片组织ANDROGEN RECEPTOR 蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
Human Sec23b(protein transport protein Sec23B) ELISA KitHuman LTβR(Lymphotoxin Beta Receptor) ELISA Kit4-羟基苯硼酸频哪醇酯 石蜡切片组织ANDROGEN RECEPTOR 蛋白表达NBT显色光学显微镜检测试剂盒
Human RTN4(Reticulon 4) ELISA KitHuman LZMg(Lysozyme G) ELISA Kit4-羟基苯硼酸频哪醇酯 细胞ANDROGEN RECEPTOR 蛋白表达比色法定量检测试剂盒
Human rT3(Reverse Triiodothyronine) ELISA KitHuman M-AChR(Muscarinic Acetylcholine Receptor) ELISA Kit4-羟基苯硼酸频哪醇酯 细胞ANDROGEN RECEPTOR 蛋白表达荧光定量检测试剂盒
Human proPSA(precursor of Prostate Specific Antigen) ELISA KitHuman MAG Ab(Anti-Myelin Associated Glycoprotein Antibody) ELISA Kit次磷酸 ANDROGEN RECEPTOR 蛋白表达西方杂交分析试剂盒
Human RARS(Arginyl tRNA Synthetase, cytoplasmic) ELISA KitHuman MAN1A1(Mannosidase Alpha Class 1A Member 1) ELISA Kit单盐酸肼ANDROGEN RECEPTOR 蛋白免疫共沉淀分析试剂盒
Human RARα(Retinoic Acid Receptor Alpha) ELISA KitHuman MANF(Mesencephalic Astrocyte Derived Neurotrophic Factor) ELISA Kit单盐酸肼ANDROGEN RECEPTOR 蛋白表达ELISA定量检测试剂盒
猪内源性逆转录病毒前病毒PCR试剂盒COLL2-1NO2 ELISA试剂盒20mg132388-68-2Mouse interferon-inducible protein 10, IP-10 Elisa KitHPLC98%COLL2-1NO2 ELISA试剂盒20mgHTLV5.25ozCAS号:湿盒(大)50-89-579-57-296T丝切蛋白1(CFL1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%COLL2-1NO2 ELISA试剂盒20mgHTLV1787-61-7高端化学试剂松弛素/胰岛素样肽受体3(RXFP3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)5.25ozCAS号:湿盒(透明)/孵育盒50-89-51115-70-496T淋巴素β(LTβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%Coll2-1 ELISA试剂盒20mgMCP1787-61-7高端化学试剂RAR相关孤儿素受体γ(RORγ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
Coll2-1 ELISA试剂盒20mg132388-59-1Mouse interferon-inducible protein 10, IP-10 Elisa KitHPLC98%Coll2-1 ELISA试剂盒20mgMCP5.25ozCAS号:湿盒(透明)/孵育盒50-89-51115-70-496T淋巴素β(LTβ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%Coll2-1 ELISA试剂盒20mgMCP1787-61-7高端化学试剂RAR相关孤儿素受体γ(RORγ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)4ozCAS号:湿盒(小)33430-62-592-84-296T干扰素调节因子1(IRF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%c-jun ELISA试剂盒10mgNGF41787-61-7高端化学试剂溶质载体家族16成员3(SLC16A3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
c-jun ELISA试剂盒10mg132388-59-1Mouse Epithelial neutrophil activating peptide 78, ENA-78 Elisa KitHPLC98%c-jun ELISA试剂盒10mgNGF44ozCAS号:湿盒(小)33430-62-592-84-296T干扰素调节因子1(IRF1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%c-jun ELISA试剂盒10mgNGF41787-61-7高端化学试剂溶质载体家族16成员3(SLC16A3)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)5mlCAS号:湿盒(棕色避光)/孵育盒 (官网黑色避光图片) 29*19*4cm33430-62-5502-70-596T糖基化依赖性细胞黏附分子(GlyCAM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%chemerin ELISA试剂盒20mgNGF52538-85-4高端化学试剂溶质载体家族30成员1(SLC30A1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
chemerin ELISA试剂盒20mg132388-59-1Mouse Epithelial neutrophil activating peptide 78, ENA-78 Elisa KitHPLC98%chemerin ELISA试剂盒20mgNGF55mlCAS号:湿盒(棕色避光)/孵育盒 (官网黑色避光图片) 29*19*4cm33430-62-5502-70-596T糖基化依赖性细胞黏附分子(GlyCAM1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%chemerin ELISA试剂盒20mgNGF52538-85-4高端化学试剂溶质载体家族30成员1(SLC30A1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)15mgCAS号:试剂透明储物包装盒33430-62-5204255-11-896T血小板因子4V1(PF4V1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%c-fos ELISA试剂盒20mgNT2538-85-4高端化学试剂溶质载体家族30成员4(SLC30A4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
c-fos ELISA试剂盒20mg7536-58-5Mouse Anti-Thrombin Ⅲ, AT-Ⅲ Elisa KitHPLC98%c-fos ELISA试剂盒20mgNT15mgCAS号:试剂透明储物包装盒33430-62-5204255-11-896T血小板因子4V1(PF4V1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%c-fos ELISA试剂盒20mgNT2538-85-4高端化学试剂溶质载体家族30成员4(SLC30A4)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)500mgCAS号:手套 PE手套 100只/包 50包/箱 扬子95648-78-52545-00-896T干扰素ω(IFNω)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%CDCP1检测试剂盒20mgApoA-52538-85-4高端化学试剂溶质载体家族30成员7(SLC30A7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
CDCP1检测试剂盒20mg7536-58-5Mouse Anti-Thrombin Ⅲ, AT-Ⅲ Elisa KitHPLC98%CDCP1检测试剂盒20mgApoA-5500mgCAS号:手套 PE手套 100只/包 50包/箱 扬子95648-78-52545-00-896T干扰素ω(IFNω)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%CDCP1检测试剂盒20mgApoA-52538-85-4高端化学试剂溶质载体家族30成员7(SLC30A7)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)10mgCAS号:手套 PE手套 100只/包 50包/箱 国产95648-78-5482-39-396T粒细胞趋化蛋白2(GCP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%CD8分子检测试剂盒20mgNAM20691-84-3高端化学试剂鞘氨醇1酸酯裂解酶1(SGPL1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
CD8分子检测试剂盒20mg7536-58-5Mouse neuropeptide Y, NP-Y Elisa KitHPLC98%CD8分子检测试剂盒20mgNAM10mgCAS号:手套 PE手套 100只/包 50包/箱 国产95648-78-5482-39-396T粒细胞趋化蛋白2(GCP2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%CD8分子检测试剂盒20mgNAM20691-84-3高端化学试剂鞘氨醇1酸酯裂解酶1(SGPL1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)15mgCAS号:手套 乳胶手套 100只/盒 20盒/箱 大号 国产18423-43-3465-00-996TIgG-Fc片段受体Ⅰ(FcγRⅠ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%CD82分子检测试剂盒20mgTB-Ab IgM20691-84-3高端化学试剂11-β-羟基类固醇脱氢酶2(HSD11β2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
CD82分子检测试剂盒20mg73821-95-1Mouse neuropeptide Y, NP-Y Elisa KitHPLC98%CD82分子检测试剂盒20mgTB-Ab IgM15mgCAS号:手套 乳胶手套 100只/盒 20盒/箱 大号 国产18423-43-3465-00-996TIgG-Fc片段受体Ⅰ(FcγRⅠ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%CD82分子检测试剂盒20mgTB-Ab IgM20691-84-3高端化学试剂11-β-羟基类固醇脱氢酶2(HSD11β2)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)15mgCAS号:手套 乳胶手套 100只/盒 20盒/箱 小号 国产18423-43-3482-91-796TIgG-Fc片段受体Ⅱ(FcγRⅡ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%CD73分子检测试剂盒20mgCOX I20691-84-3高端化学试剂L-型电压依赖钙离子通道α1S亚基(CACNα1S)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
CD73分子检测试剂盒20mg73821-95-1Mouse Growth Hormone Releasing Peptide, GHRP Elisa KitHPLC98%CD73分子检测试剂盒20mgCOX I15mgCAS号:手套 乳胶手套 100只/盒 20盒/箱 小号 国产18423-43-3482-91-796TIgG-Fc片段受体Ⅱ(FcγRⅡ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%CD73分子检测试剂盒20mgCOX I20691-84-3高端化学试剂L-型电压依赖钙离子通道α1S亚基(CACNα1S)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)15mgCAS号:手套 乳胶手套 100只/盒 20盒/箱 中号 国产18423-43-351-55-896T细胞附着蛋白1(CYTH1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%CD6分子检测试剂盒100mgNR4A15144-89-8高端化学试剂L-型电压依赖钙离子通道α1C亚基(CACNα1C)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
CD6分子检测试剂盒100mg73821-95-1Mouse Growth Hormone Releasing Peptide, GHRP Elisa KitHPLC98%CD6分子检测试剂盒100mgNR4A115mgCAS号:手套 乳胶手套 100只/盒 20盒/箱 中号 国产18423-43-351-55-896T细胞附着蛋白1(CYTH1)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%CD6分子检测试剂盒100mgNR4A15144-89-8高端化学试剂L-型电压依赖钙离子通道α1C亚基(CACNα1C)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)15mgCAS号:手套 一次性无粉(丁腈)防护手套 10盒/箱 大号 国产951-78-06871-44-996TIgE-Fc受体Ⅰ(FcεRⅠ)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)HPLC98%CD68分子检测试剂盒100mg15-LOX15144-89-8高端化学试剂L-型电压依赖性钙离子通道α1D亚基(CACNα1D)检测试剂盒(酶联免疫吸附试验法)
使用方法:
一、样品 DNA 的制备
用自选方法提取 Cps DNA。注意:DNA 纯化方法是决定检测灵敏度的关键因素。如果不能很好纯化样品 DNA,后面的 PCR 再灵敏也不能提高整体检测灵敏度。
二、制备 Cps 标准曲线(以 10-10E6 这 6 个 10 倍稀释度为例。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分)。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体病毒做阳性对照,只提供没有传染性的、可以直接使用的 DN**段作为阳性对照。
1. 标记 6 个离心管,分别为 6,5,4,3,2 和 1 号。
2. 用带芯枪头分别加入 45 μL 超纯水(用带芯枪头,下同)。
3. 先将本试剂盒提供的阳性对照用 TE 缓冲液或超纯水 10 倍梯度稀释到10E7 拷贝/μL(注:请不要将本试剂盒提供的标准品一次性稀释至 10E7拷贝/μL,建议每次稀释 10 倍,梯度稀释至 10E7 拷贝/μL)。
4. 在 6 号管中加入 5 μL 10E7 拷贝/μL 的 Cps 阳性对照(上步稀释所得),充分震荡 1 分钟,得 10E6 拷贝/μL 的阳性对照。
5. 换枪头,从 6 号管中取 5 μL 溶液到 5 号管中,充分震荡 1 分钟,得 10E5拷贝/μL 的阳性对照。
6. 换枪头,从 5 号管中取 5 μL 溶液到 4 号管中,重复上面的操作直到得到 6个稀释度的阳性对照。
7. NC 管中不加任何阳性对照。
8. 从 1-6 号管中分别取 5 μL 和待测样品一起进行定量 PCR(见下步),每个样品做 3 次重复。PCR 后得到每个阳性对照稀释样品的荧光 PCR Ct 值,并以之为纵轴,以浓度的对数值为横轴,绘制标准曲线。
数据采集:
具体操作按所用仪器推荐的流程进行。本产品中所含的荧光染料在不结合DNA 时,吸收光谱在 471nm,结合 DNA 时的吸收光谱在 500nm,发射光谱在 530nm。
数据处理:
以 Cps 阳性对照浓度的 log 值为横轴,以 Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品浓度的 log 为横轴,以 Ct 值为纵轴,通过待测样品的 Ct 值计算出样品 DNA 的浓度。